Controlled Expression of Promoter from Alkali-tolerant Bacillus sp. DNA in Fed-batch Culture

Fed-batch 배양에 의한 알칼리내성 Bacillus 속 Promoter의 발현조절

The influence of glucose concentration on cell growth rate and on the expression level of the strong promoter obtained from alkali-tolerant Bacillus sp. YA-14 chromosomal DNA was studied. In fed-batch culture, the promoter activity could be maximized by maintaining a very low level of glucose concentration in the broth and glucose consumption rate below 1.08g/g cell-h. The induction of the promoter was possible by addition of sporulation medium after the cell was grown in growth medium with only low level of CAT activity.

토양에서 분리한 알칼리내성 Bacillus sp.의 자체 chromosomal DNA에서 유래된 strong promoter를 지닌 plasmid p-12B1을 공여균주에 삽입시키고 이 promoter의 활성을 최적화할 수 있는 배양조건을 검토하였다. 글루코오스가 고갈된 시점부터 세포의 활성은 유지되나 포자는 형성되지 않을 정도로 낮은 글루코오스 소비속도를 유지해 제한된 글루코오스를 연속적으로 공급해줌으로써 promoter의 활성을 최대로 높일 수 있었다. 또한 배지조성의 변화로 균체를 생육시킨 후 유전자 발현을 유도하는 것이 가능하였으며, 이 점에 대해서는 보다 구체적인 연구가 진행되어야 할 것이다.