Objectives: The aim of the present study is to evaluate the effects of the extract of Pongamia pinnata on the morphology, viability, and differentiation potential of human stem cells derived from the gingiva. Methods: Stem cells obtained from gingivae were cultured in an osteogenic medium in the presence of methanol extract of Pongamia pinnata (PPT) at concentrations ranging from 0.001 to 1%. Evaluations of cell morphology and cellular viability were done at Day 1. Alkaline phosphatase activity assays and Alizarin red S staining were performed to evaluate the osteogenic differentiation of stem cells. Results: The morphology of stem cells in the presence of PPT at final concentrations of 0%, 0.001%, 0.01%, 0.1%, and 1% did not produce any noticeable changes when compared with the untreated control group. Application of PPT produced a significant increase in alkaline phosphatase activity when compared to the control group. The results of the Alizarin Red S staining showed a significant increase of absorbance with the 0.001% group. Conclusions: Based on these findings, it was concluded that PPT could produce beneficial effects on mesenchymal stem cells with enhanced osteogenic differentiation.
The purpose of this study was to investigate the effect of hydrocortisone in the fusion mechanism of the secondary palatine shelves in the rat. Pregnant rats were injected with 5.0 mg/100 gm body weight of hydrocortisone for 3 days between the 7th day and the 9th day of pregnancy. Between the 14th day md the 18 day of pregnancy, the fetuses were removed and decapitated to be immersed in $10\%$ formalin and Carney's solution. Preparations were stained with alizarin red S, hematoxylin-eosin and alcian blue respectively, and partly were treated for Periodic acid-Schiff reaction. The results were as followings: 1. The incomplete fusion of the palatal epithelium took place though the polarity of epithelial cells. 2. At the edge of shelves the differentiation of mesenchymal cells was observed, but the inter penetration of mesenchyme was not shown. 3. It was considered that the phenomenon of hypocalcification in matrix had relation to the decrease stainability to alizarin red S in shelves. 4. It might be concluded that the connective tissue under epithelium showed the decrease tendency to alcian blue and PAS reaction due to the inhibition of the synthesis of the mucopolysaccharide.
Background: This study was performed to provide a long-term bacterial seal through the formation of reparative dentin bridge, calcium silicate-based pulp capping materials have been used at sites of pulpal exposure. The aim of this study was to evaluate the mineralization-inducing potentials of calcium silicate-based pulp capping materials (ProRoot MTA [PR], Biodentine [BD], and TheraCal LC [TC]) in human dental pulp cells (HDPCs). Methods: Specimens of test materials were placed in deionized water for various incubation times to measure the pH variation and the concentration of calcium released. The morphology of HDPCs cultured on the specimens was examined using a confocal laser scanning microscope (CLSM). Alizarin red S staining and alkaline phosphatase assays were used to evaluate mineralization-inducing potentials of the capping materials. Results: BD showed the highest calcium release in all test periods, followed by PR and TC. (p<0.05). All experimental groups showed high alkalinity after 1 day, except at 14 days. BD showed the highest cell viability compared with PR and TC after 1 and 3 days, while TC showed the lowest value (p<0.05). The CLSM analysis showed that cells were well adhered and expressed actin filaments for all pulp capping materials. Mineralization by PR and BD groups was higher than that by TC group based on alizarin red S staining. BD showed significantly higher alkaline phosphatase activity than PR and TC, while TC showed the lowest value (p<0.05). Conclusion: Within the limitations of the in vitro study, BD had higher mineralization-inducing potential than PR and TC.
The study is about the effect of tetracycline-HCl on the amelogenesis and the dentinogenesis of the albino rats by means of histochemistry and fluorescence microscopy. Females in oestrus were mated overnight and examined the next morning for evidence of copulation. The mothers were intraperitonealy injected with a single dose of tetracycline-HCl from the eighth to tenth day of gestation. The heads of new born rats were fixed in Carnoy's solution and 10% formalin solution. The staining methods were alizarin red S stain, PAS reaction, colloidal iron reaction, Morin's stain and hematoxylin-eosin stain, The results were as follows: 1. By the single injection of tetracycline, the matrix formation of enamel and dentin were disturbed, and the shape and arrangement of ameloblast and odontoblast were distorted. 2. It seemed that, with the higher dose of tetracycline, the positive materials of PAS reaction were increased in the disturbed enamel and dentin matrix, but those of alizarin red S stain and colloidal iron reaction were decreased. 3. The fluorescence intensity in the disturbed enamel and dentin matrix were higher than the other areas and appeared to increase gradually with the higher dose of tetracycline.
정자기장이 MC3T3-E1 세포의 골생성능력에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위하여 MC3T3-E1 세포를 4well 세포배양접시에 $SmCo_5$ 영구자석을 이용하여 76.4mT의 정자기장을 가한 상태에서 5일, 7일, 11일, 15일 및 21일간 배양한 후 세포의 ALP 활성도를 측정하고 Alizarin red S 염색을 통하여 골결절양상을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. $\cdot$정자기장을 가한 군중 7일군, 11일군 및 15일군에서 MC3T3-E1세포의 ALP활성도가 대조군에 비해 낮게 나타났으며 (p<0.01) 그중 11일군에서 가장 억제효과가 많았다. $\cdot$Alizarin red S 염색을 통한 골결절 양상은 11일군까지는 실험군과 대조군 모두에서 염색양상이 나타나지 않았고 15일군에서 대조군은 소량의 골결절이 염색되었으며 실험군은 골결절 염색이 되지 않았으며 21일군에서는실험군과 대조군 모두에서 골결절이 염색되었으나 대조군에서 약간 더 염색된 양상을 나타내었다.
섬유모세포성장인자-23(fibroblast growth factor 23, FGF23)은 뼈를 형성하는 세포에서 주로 생성되지만 그 작용은 신장에서 이루어진다. FGF23은 신장의 나트륨-인산염 공동수송체(Na-phosphate cotransporter)를 억제하여 인산염 재흡수를 감소시킨다. 이렇게 함으로써 인산염 항상성을 조절하는 작용과는 별개로 이것은 in vivo에서 뼈 형성을 억제하는 것으로 알려져 있다. 두개골 조골세포를 이용한 연구에서도 FGF23은 조골세포의 발달, 즉 분화 및 기질의 광화(mineralization)에 악영향을 미쳤다. 본 연구는 FGF23이 골수 유래 간엽줄기세포에서 조골세포로의 발달에 있어서도 유사한 영향을 줄 것인지를 조사한 것이다. 간엽줄기세포주인 D1 세포를 β-glycerophosphate, ascorbic acid, dexamethazone이 포함된 조골배(osteogenic medium)에 배양하여 alkaline phosphatase (Alp) 염색으로 분화를, Alizarin red 염색과 기질의 칼슘 함량의 분석을 통해 광화를 평가하였다. 분화 촉진 유전자인 Runx2, osteocalcin, Alp와 광화 억제 유전자인 Enpp1, Ank의 발현은 RT-PCR로 분석하였다. D1 세포의 증식과 조골세포로의 분화는 생리학적 농도를 훨씬 초과하는 FGF23의 농도에 의해서도 달라지지 않았다. FGF23 처치 1주, 2주, 3주 후 Alizarin red 염색에 의한 광화 정도의 평가에서도 대조군과 실험군의 차이는 발견되지 않았다. 그러나 두 군 모두 시간이 경과함에 따라 광화는 증가되었다. 기질에 침착된 칼슘의 양 또한 차이가 없었다. 분화 촉진 유전자와 광화 억제 유전자의 발현도 양 군 간에 다르지 않았다. 이러한 부정적인(negative) 결과는 FGF23에 의한 세포 내 신호전달의 장애가 아님이 Erk 인산화로 확인되었다. 이상의 결과로 미루어 두개골의 조골세포와 달리 FGF23은 간엽줄기세포에서 조골세포로의 분화와 광화에는 영향을 미치지 않을 것으로 사료된다.
출토복식은 조선시대 복식문화를 알 수 있는 중요한 자료들이다. 그 중에서도 염직물들은 복식의 문화사적 연구뿐만 아니라 보존과학적 연구 및 유물복원을 위해 꼭 필요한 자료들이다. 그러나 매장환경에서 오랜 기간 동안 영향을 받으면서 색은 변퇴색되었으며 발굴 후에도 점차 퇴색되어가므로 본래의 색을 추정하기가 어렵다. 이에 본 연구에서는 적색, 황색, 자색, 청색의 천연염색포 표준시료를 제작하여 고속액체크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography with Photodiode Array Detector, 이하 HPLC-PDA)에 의해 분석하고, 같은 방법으로 출토염직물에 남아있는 색소를 추출하여 분석함으로써 출토직물의 염료분석을 시행하였으며 당시의 색을 추정하기 위해 전자현미경(Scanning electron microscope 이하 SEM)에 연결된 에너지 분산형 원소분석장치(Energy Dispersive X-ray Spectroscopy 이하 EDX)를 이용하여 매염제 분석을 시행하였다. 본 실험을 위해 16~17세기 출토직물편으로 대전시 송천동 출토 은진송씨 송문창 출토직물 2점과 대전시 목달동 출토 여산송씨 송희종 출토직물 1점 등 3점을 사용하였으며, 분석결과 alizarin, purpurin, indigo, ellagic acid 등의 색소가 검출되어 꼭두서니-쪽의 중복염색, 꼭두서니 염색, 석류-쪽의 중복염색 등의 결과를 얻을 수 있었으며 매염제로는 모든 유물에서 Al이 검출되었다.
Aldose reductase was purified to electrophoretic homogeneity from porcine liver. The purified enzyme was a monomer of 36 kDa. The enzyme was strongly inhibited by $Cu^{2+}\;and\;Mg^{2+}$ ions. Incubation of the enzyme with pyridoxal 5'-phosphate led to complete inhibition of enzymatic activity, suggesting that lysine residue is involved at or near the active site of the enzyme. The enzyme exhibited a broad substrate specificity. Furthermore, the enzyme was capable of decolorizing Alizarin, an anthraquinone dye.
By means of Alizarin zirconium stain method the fluoric reaction which showed in the case of deficient hard tissue was observed. Among the hard tissue. the fluoric density appesrs in the graduation that the largest is primary calcified matrix and least is secondany calcified matrix.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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