The sustained release dosage form which delivers melatonin (MT) in a circadian fashion over 8 h is of clinical value for those who have disordered circadian rhythms because of its short halflife. The purpose of this study was to evaluate the gelling properties and release characteristics of alginate beads varying multivalent cationic species $(Al^{+++}, \; Ba^{++}, \; Ca^{++}, \; Mg^{++}, \; Fe^{+++}, \; Zn^{++})$. The surface morphologies of Ca- and Ba-alginate beads were also studied using scanning electron microscope (SEM). MT, an indole amide pineal hormone was used as a model drug. The $Ca^{++}, \; Ba^{++}, \; Zn^{++}, \; Al^{++}\; and\; Fe^{+++}\; ions\; except\; Mg^{++}$ induced gelling of sodium alginate. The strength of multivalent cationic alginate beads was as follows: $Al^{+++}\llFe^{+++} the induced hydrogel beads were very fragile and less spherical. Fe-alginate beads were also fragile but stronger compared to Al-alginate beads. Ba-alginate beads had a similar gelling strength but was less spherical when compared to Ca-alginate beads. Zn-alginate beads were weaker than Ca- and Ba-alginate beads. Very crude and rough crystals of Ba- and Ca-alginate beads at higher magnifications were observed. However, the type and shape of rough crystals of Ba- and Ca-alginate beads were quite different. No significant differences in release profiles from MT-loaded multivalent cationic alginate beads were observed in the gastric fluid. Most drugs were continuously released upto 80% for 5 h, mainly governed by the passive diffusion without swelling and disintegrating the alginate beads. In the intestinal fluid, there was a significant difference iq the release profiles of MT-loaded multivalent cationic alginate beads. The release rate of Ca-alginate beads was faster when compared to other multivalent cationic alginate beads and was completed for 3 h. Ba-alginate beads had a very long lag time (7 h) and then rapidly released thereafter. MT was continuously released from Feand Zn-alginate beads with initial burstout release. It is assumed that the different release rofiles of multivalent cationic alginate beads resulted from forces of swelling and disintegration of alginate beads in addition to passive diffusion, depending on types of multivalent ions, gelling strength and drug solubility. It was estimated that 0.2M $CaCl_2$ concentration was optimal in terms of trapping efficiency of MT and gelling strength of Ca-alginate beads. In the gastric fluid, Ca-alginate beads gelled at 0.2 M $CaCl_2$ concentration had higher bead strength, resulting in the most retarded release when compared to other concentrations. In the intestinal fluid, the decreased release of Ca-alginate beads prepared at 0.2 M $CaCl_2$ concentration was also observed. However, release profiles of Ca-alginate beads were quite similar regardless of $CaCl_2$ concentration. Either too low or high $CaCl_2$ concentrations may not be useful for gelling and curing of alginate beads. Optimal $CaCl_2$ concentrations must be decided in terms of trapping efficiency and release and profiles of drug followed by curing time and gelling strength of alginate beads.
Histamine is a kind of primary biogenic amine arising from the decarboxylation of the amino acid L-histidine. The toxicology of histamine and its occurrence and formation in foods are especially emphasized in fermented foods. In this study, the biosensor for detection of histamine with functionalized multi-walled carbon nanotubes (MWCNT) was developed. We also searched for an appropriate insoluble substrate to immobilize the enzyme. The developed biosensor showed a detection limit of $0.1{\mu}M$ hydrogen peroxide. The enzyme reactor was prepared with diamine oxidase immobilized on insoluble carriers including CNBr-activated sepharose 4B, calcium alginate, and controlled pore size glass beads. The coupling efficiency of CNBr-activated sepharose 4B, calcium alginate, and controlled pore size glass beads were 48.5%, 40.3%, and 51.0%, respectively. In addition, the response currents on histamine with each immobilized enzyme reactor prepared with CNBr-activated sepharose 4B, calcium alginate, and controlled pore size glass beads were 120 nA, 110 nA, and 140 nA at $100{\mu}M$ of histamine concentration, respectively. Therefore, it is suggested that controlled pore size glass beads are the best carriers for immobilizing diamine oxidase to detect histamine in this biosensor.
This study is to investigate for obtaining the operating conditions of continuous vinegar production using fluidized bed reactor by Acetobacter aceti cell immobilized in Ca-alginate gel. The optimum conditions obtaining by batch fermentation using fluidized bed reactor were as follows; The fermentation temperature and aeration rate were 3$0^{\circ}C$ and 1.0VVM and the initial concentration of ethanol and acetic acid in medium were 33g/l and 27g/l respectively. The amount of bead used was 25%(w/v). The overall acetic acid productivities of batch fermentations by free cell and immobilized cell were 0.31g/l-hr and 0.48g/l-hr, respectively, at the final acetic acid concentration of 50g/l. In the continuous vinegar production using fluidized bed reactor by immobilized cell under optimum conditions, it was possible to produce 23g/l acetic acid continuously up to 90 days with maximum acetic acid productivity of 2.76g/l-hr at dilution rate 0.12hr-1.
Aspergillus terreus NRRL 1960 was immobilized on various alginate gel beads, Celites, and polyurethane foam cubes, and the comparisons were made for the production of itaconic acid according to the types and sizes of each carrier. The levels of itaconic acid produced from Ca- alginate and Sr-alginate were similar, and the addition of bentonite to Ca- and Sr-alginate resulted in an increase of itaconic acid. The addition of 1.67% bentonite and 0.33% starch to Sr-alginate (SABS bead) produced higher level of itaconic acid (11.59 g/1) than other gel beads. A decrease in the size of Celite increased the itaconic acid production, and the smallest size of Celites, R- 634, produced 6.37 g/l of itaconic acid. Among various types of polyurethane foam cubes, HR 08 (2X2X2 cm) produced about 19 g/l of itaconic acid, which was more efficient than other carriers. In a repeated batch culture using immobilized cells on polyurethane foam cubes (HR 08, 2X2X2 cm), the stability of itaconic acid production was maintained up to 4 batches. Also, the possibility of itaconic acid production by continuous culture was shown in a packed-bed reactor.
This experiment was attempted to improve ethanol productivity by immobilization of Kluyveromyces marxianus FO43 using Jerusalem artichoke powder. Sucrose medium was used to determine optimum conditions for cell immobilization. The optimum conditions were alginate concentration of 2%, bead size of 2 mm, a particle input ratio of 30 : 100, cultivation period of 24 hours, and substrate concentration of 10%(w/v). The immobilized cells produced the high concentrations of ethanol at pH $4.5{\sim}6.5$ and $30{\sim}45^{\circ}C$, broader ranges of pH and temperatures than those of free cells. Under optimum conditions the immobilized cells showed ethanol concentration of 46.4 g/L and productivity of 1.93 g/L.h. The microphotograph using a two phase contrast microscope showed that immobilized cells cultivated under the optimum conditions were densely populated toward the surface area of beads.
In order to increase the persistence of plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) in rhizpsphere soil, the growth of tomato was examined after the application of Arthrobacter woluwensis ED immobilized in alginate bead, which was known as PGPR. When tomato seedlings were treated with A. woluwensis ED of $1{\times}10^6$ cells g $soil^{-1}$ and incubated for 30 days in a plant growth chamber, the shoot length, root length, fresh weight and dry weight of the grown tomato plants treated with the suspended inoculants significantly increased by 36.2, 59, 51.1, and 37.5%, respectively compared to those of the uninoculated control. The treatment of the immobilized bacteria increased those by 42, 67.4, 62.5, and 60.4%, respectively compared to those of the uninoculated control. Therefore, the enhancement of tomato growth by the treatment of the immobilized bacteria was higher than those by the suspended inoculants. The effects of the inoculation on indigenous bacterial community and the fate of the inoculated bacteria were monitored by denaturing gradient gel electrophoresis analysis. The DNA band intensity of A. woluwensis ED in the tomato rhizosphere treated with the suspended inoculants continuously decreased after the inoculation, but the band intensity in the tomato rhizosphere soils treated with the immobilized inoculants showed the maximum at 1 week after inoculation and the decreasing rate was less than that of the suspended inoculants, which indicated the longer maintenance of the immobilized bacteria at rhizosphere soils. Therefore, encapsulation of PGPR in alginate beads may be more effective than liquid inoculant for the plant growth promotion and survival of PGPR at plant rhizosphere.
In these experiment, the conditions of entrapping immobilization of Zygosaccharomyces rouxii that participate in the soysauce brewing are investigated. And carried out the fermentation and aging test by immobilized Zygosaccharomyces rouxii with the hydrolyzed solution prepared from soysauce koji. The results obtained were as follows: 1. Immobilizing conditions of Zygosaccharomyces rouxii. 1) When the concentration of Na-alginate solution is 2.0-2.5%, the bead formation was very good. And the concentration of Na-alginate solution not influenced on the fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii. 2) Effect of ratio of the precultured Zygosaccharomyces rouxii solution and Na-alginate solution on the fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii was not highly recognized. But if the ratio of precultured Zygosaccharomyces rouxii solution increased, the fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii was slightly high. 3) The fermentation activity of immobilized Zygosaccharomyces rouxii that grew over 36hrs was higher than that grew below 24hrs. 4) Increasing the ratio of immobilized Zygosaccharomyces rouxii gel to the fermentative medium, the fermentation activity of Zygosaccharomyces rouxii was higher. 2. The fermentation test by immobilized Zygosaccharomyces rouxii with the hydrolyzed solution of soysauce koji. 1) When fermented for about 96 hrs, the alcoholic fermentation almost stopped and alcohol concentration into the hydrolyzed solution of soysauce koji was 2.6%(v/v) approximately.
A strain of Saccharomyces cerevisiae BY-366 was isolated to produce a strong sucrose-hydrolyzing enzyme. After entrapment of yeast cell invertase with alginate, enzymatic properties of immobilized cells were investigated. The results are as follows. 1. The optimum pH of invertase in immobilized cells and non- immobilized cells was 6.0 and 5.0, and pH stability of invertase in immobilized cells and non- immobilized cells was 6.0 and 5.0, respectively. 2 Activation energy of immobilized cells was 4.7 kcal/mol. 3 The immobilized preparation exhibited high resistance to heat and urea Induced denaturation. 4, The bead size less than 2 mm in diameter was desirable. 5. In spite of repeated use, the enzyme activity of immobilized cells was inhibited slightly in batch reaction, and a small column of the immobilized preparation could hydrolyze relatively high concentration of sucrose almost quantitatively to more than 6 days.
Kim, Eun-Hee;Park, Sung-Ae;Park, Myoung-Su;Yang, Jin-chul;Madhaiyan, Munusamy;Seshadri, Sundaram;Sa, Tong-Min
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.37
no.1
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pp.36-40
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2004
It is now widely accepted that immobilized microbial cells can overcome some of the problems associated with microbial survival stability, efficacy, storage, transportation and ease of application in agricultural environments. Pantoea agglomerans, a phosphate solubilizing bacterium, was immobilized in alginate, agar and gelatin carriers. All the three immobilfized carriers with bacterial cells of P. agglomerans were compared for solubilization of tricalcium phosphate in pure liquid cultures. While alginate beads were tested for phosphate solubilization on alternate days up to five days, agar beads and gelatin cubes were subjected for one time phosphate solubilization analysis after seven days. Both alginate and agar immobilized cells of P. agglomerans exhibited higher efficiency in increasing the solubilizaliun of tricalcium phosphate than gelatin immobilized cells. The culture filtrate of alginate bead inoculation treatment registered a rapid increase in soluble phosphate concentration upon incubation. A corresponding decrease in the pH of the medium was also observed in all the treatments.
For the purpose of developing a high quality agricultural microbial inoculant, methods and materials for improving encapsulation were investigated. Preparation of capsule was conducted by improving extrusion system with micro-nozzle and peristaltic pump. The sodium alginate was selected because of its cheapness, stability of cells, and gel formation ability. The yields, physical properties and gel formation abilities of extractable alginate from sea tangle were investigated by hot water extractable and alkali soluble methods. The extraction yields of hot water extractable alginate (HWEA) and alkali soluble alginate (ASA) from sea tangle were 8 and 20%, respectively. The HWEA was almost not viscous even in 1.5% of the sample solution, whereas the ASA was very highly viscous in above 3% sample solution. The gel formation ability of each samples varied from 1.5% to 5% and the ASA showed a good gel formation ability at 3% solution as commercial alginate (CA). The soil microbial inoculant, Bacillus thuringiensis, Bacillus subtilis, Lactobacillus plantarum and Geotrichum candidum encapsulated sodium alginate with starch and zeolite for stabilizer. The survivability of encapsulated soil microbial inoculant using alginate without stabilizer appeared to be 66, 52, 70 and 50%, respectively. Inclusion of starch and zeolite with alginate bead increased viabilities in Bacillus sp. and Geotrichum candidum by 81-83% and 89%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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