• 한국해양학회지:바다
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• 제3권2호
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• pp.90-93
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• 1998

국내 남해안의 적조발생지역에서 채집한 Prorocentrum minimum, P. micans, P. triestinum, P. balticum, Gymnodinium sanguineum, Alexandrium catenella, Scrippsiella trochoidea, Heterosigma akashiwo를 순수배양하고 이로부터 PCR을 이용해 약 700 bp에 해당되는 24S rRNA 유전자의 D1과 D2 변이부위를 증폭하고 클로닝한 후 염기서열을 분석하였다. 분석된 염기서열들을 이미 밝혀진 적조원인종들의 것과 ClustalW 프로그램을 사용하여 배열하고 계통수를 구성한 결과 Prorocentrum과 Alexandrium 속의 것들은 형태적인 분류결과와 종수준까지 거의 일치함을 보여주었다. 이러한 연구결과는 그 24S rRNA 유전자의 염기서열분석이 국내에서 발생하는 적조원인종들에 대한 종 수준에서의 신속한 확인에 이용될 수 있음을 제시한다.

• 한국수산과학회지
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• 제39권1호
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• pp.49-54
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• 2006

Cultured cells of the toxic Alexandrium tamarense were fed to four mussel species, Mytilus coruscus, M. edulis, M. galloprovincialis and Septifer vulgatus, to examine the interspecies and interlocality differences in the ability to accumulate paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins. Toxin content of A. tamarense cells varied during culture period. In contrast, toxin composition in the cell (C1,2, GTX1-4 and neoSTX) was constantly stable. In feeding experiment, the four mussel species collected from Geoje intoxicated after uptake of A. tamarense. Toxin content ($average{\pm}SD\;{\mu}g$ STXeq/100 g) of M. coruscus, M. edulis, M. galloprovincialis and Septifer vulgatus were $1,660{\pm}79,\;3,914{\pm}2,242,\;5,626{\pm}1,620\;and\;958{\pm}163$, respectively. Toxin profiles included C1,2, GTX1,4 and neoSTX as the major components, and dcGTX2,3, GTX2,3, neoSTX and STX as the minor ones. Toxin accumulation of three mussel species collected from Pohang, Geoje and Anmyon-do showed interspecies and interlocality differences. Toxin content ($average{\pm}SD\;{\mu}g$ STXeq/100 g) were $91{\pm}4,\;151{\pm}14,\;39{\pm}3$ in M coruscus, $189{\pm}1,\;231{\pm}11,\;206{\pm}15$ in M edu/is and $214{\pm}28,\;326{\pm}30,\;291{\pm}26$ in M. galloprovincialis in order of Anmyon-do, Geoje and Pohang.

• 한국양식학회:학술대회논문집
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• 한국양식학회 2003년도 추계학술발표대회 논문요약집
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• pp.129-129
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• 2003

해양저질에서 휴면포자의 분포와 분포량에 대한 조사는 미래의 와편모조류 적조발생 시기나 장소를 예측할 수 있게 한다. 그러므로 저질내의 휴면포자를 찾고 분리하는 기술이 기본적으로 수행되어야 하며 지금까지 여러 방법이 개발되어 왔다. 이 연구의 목적은 기존의 휴면포자 계수방법들을 비교함으로써 연구의 효율을 제고 하고자 하는데 있다. 이 실험에서는 새만금 해역의 동일정점 저질내에 존재하는 휴면포자를 형광 염색하여 계수하는 Primuline 염색법, 해수, 휴면포자, sodium polytungstate의 비중차이를 이용하여 밀도구배원심법으로 분리하는 방법, 그리고 10% HCl로 탄산질을 제거하고 47% HF로 규산질을 제거한 뒤 휴면포자를 계수하는 고전적 계수방법 (palynological technique)을 사용하여 저질 내의 휴면포자를 분리 비교하였다. Primuline 염색법을 이용하였을 경우 Alexandrium famarense/catenella complex, Alexandrium sp. (spherical), Gonyaulax verior, Gonyaulax scrippsea, Gonyaulax spinifera complex등의 일부 종만 염색되어 관찰되었다. sodium polytungstate를 비중 1.3 g$cm^{-3}$으로 조정한 후 휴면포자를 분리한 밀도구배 원심법은 생물에 거의 무해한 것으로 알려져 있어서 발아가 가능해 휴면포자와 영양세포간의 관계를 규명할 수 있다는 장점이 있으나 계수에 있어서는 재현성이 떨어졌다. 반면 Palynological technique은 발아는 되지 않지만 석회질 벽을 가지는 휴면포자를 제외한 대부분의 종들이 관찰되었다. 이 결과는 실험 목적별로 휴면포자 계수방법을 달리 할 수 있음을 보여준다. 즉 발아실험을 할 경우에는 밀도구배원심법을, Alexandrium과 같은 특정종의 계수목적시에는 Primuline 염색법을, 정점 내 정확한 종 분포 파악을 위해서는 palynological technique을 사용하는 것이 효과적일 수 있다. 하지만 종분포 파악시에는 시간이 많이 소요되므로 좀더 신속하고 정확한 실험을 위해 분자생물학적인 기법들이 요구된다.

• 환경생물
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• 제24권3호
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• pp.275-281
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• 2006

We examined effects of water temperature, salinity, irradiance, and different media on the growth of the toxic dinoflagellate Alexandrium tamarense (HYM9704), which was isolated from Jinhae Bay, Korea. The ranges of temperature and salinity in which the strain was able to grow were $10{\sim}20^{\circ}C$ and $20{\sim}34$ psu, respectively. These values were in accordance with those observed in situ. The maximum growth rates of axenic A. tamarense (HYM9704) was $0.25d^{-1}$ at $15^{\circ}C$, 30 psu, and $100{\mu}Em^{-2}s^{-1}$. The temperature affected the growth rates of axenic A. tamarense more significantly than the salinity. The type of culture media did not affect the growth rates of axenic A. tamarense. The strain in N-limited and P-limited media went into the stationary phase faster than that in T1 and T1/2 medium.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제7권3호
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• pp.130-135
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• 2004

The marine dinoflagellate genus Alexandrium, which produces PSP toxins, has a global distribution. As human-assisted dispersal of the species has been suggested, it is important to develop molecular tools to trace the dispersal pathway. To screen population-specific DNA sequences that differentiate Korean and Japanese A. catenella, we targeted the area downstream of the chloroplast psbA gene using PCR with population-specific DNA primers followed by RFLP (restriction fragment length polymorphism) analysis and sequencing. The RFLP patterns of the PCR products divided Korean and Japanese A. catenella regional isolates into three types: Korean, Japanese, and type CMC3, isolated from Korea. We sequenced the PCR products, but found no similar gene in a homology search. The molecular phylogeny inferred from the sequences separated the Korean and Japanese A. catenella strains, as did the RFLP patterns. However, the Japanese isolates included two slightly different sequences (types J and K), while the Korean sequence was the same as the Japanese K type. In addition, a unique sequence was found in the Korean strains CMC2 and CMC3. Population-specific PCR amplification with Japanese A. catenella type-specific PCR primers designed from the type J sequence yielded PCR products for Japanese strains only, showing that the unknown gene can be used for a population analysis of Korean and Japanese A. catenella.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제7권4호
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• pp.175-183
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• 2004

The dinoflagellate Alexandrium tamiyavanichii Balech, a producer of toxins causing paralytic shellfish poisoning (PSP), has recently been considered as one of main organisms responsible for toxication of shellfish in Japan. In this study, A. tamiyavanichii was subjected to a molecular phylogenetic analysis inferred from 28S rDNA D1-D2 sequences and a species-specific LSU rRNA-targeted oligonucleotide DNA probe was designed to identify A. tamiyavanichii using the whole cell-FISH (fluorescence in situ hybridization). The sequences of the 28S rDNA D1-D2 region of A. tamiyavanichii showed no difference from A. cohorticular AF1746l4 (present name A. tamiyavanichii) and formed a distinct clade from the 'tamarensis species complex'. The probe, TAMID2, reacted specifically with A. tamiyavanichii cultured cells, without any cross-reaction with other species belonging to the same genus, including A. tamarense, A. catenella, A. affine, A. fraterculus, A. insuetum and A. pseudogonyaulax. In a test of cross-reactivity with a field sample, TAMID2 reacted consistently with only A. tamiyavanichii, indicating that the present protocol involving the TAMID2 probe might be useful for detecting toxic A. tamiyavanichii in a simple and rapid manner.

• ALGAE
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• 제23권4호
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• pp.251-255
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• 2008

In Gamak Bay, Paralytic Shellfish Poisoning (PSP) was first detected from seafoods in 2003, however the toxin source is unknown yet. In this study, we report potential PSP producers of toxic dinoflagellates, describing morphology and abundance of cysts isolated from surface sediment of Gamak Bay. The most abundant type in these cysts was characterized with ellipsoidal and transparent wall identical to Alexandrium catenella and/or A. tamarense. Germination experiment of the cysts revealed that all motile cells germinated were morphologically identified as A. tamarense. This result suggests that A. tamarense may relate to PSP contaminations in Gamak Bay. Moreover, bottom water temperature in Gamak Bay is favorable for germination of A. tamarense cysts. Further studies are required to carry out the PSP monitoring for preventing the risk of PSP events that may outbreak in future at Gamak Bay.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제9권1호
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• pp.30-37
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• 2006

We performed experiments on the uptake and excretion of dissolved organic phosphorus (DOP) using two toxic dinoflagellates, Alexandrium tamarense Lebour (Balech) and Gymnodinium catenatum Graham, isolated from Hiroshima Bay, Japan. ATP (adenosine triphosphate), UMP (uridine-5-monophosphate), G-6-P (glucose-6-phosphate) and Glycero-P (glycerophosphate) were used as DOP sources in preliminary uptake experiments. ATP was selected as the DOP species for the short-tenn uptake experiment because preliminary experiments showed it to be the DOP source used by both species. Although the $K_s$ values of A. tamarense and G. catenatum (5.63 and $7.61{\mu}M$, respectively) obtained from the short-term experiments for ATP were only slightly higher than those reported for dissolved inorganic phosphorus (DIP), the ${\rho}_{max}$ values (5.04 pmol/cell/h and 13.4 pmol/cell/h, respectively) were much higher. The DOP excretion rate in batch-culture experiments was estimated at 0.084 pmol/cell/h for A. tamarense and 0.012 pmol/cell/h for G. catenatum, accounting for about 30% and 25%, respectively, of the assimilated phosphorus. Our results suggest that the DIP-depleted conditions of Hiroshima Bay favor these two species by supporting their ability to use DOP.

• 환경생물
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• 제24권2호
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• pp.147-154
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• 2006

한국 진해만에서 분리한 마비성패독 원인종의 하나인 Alexandrium catenella (AlCt-01) 최적 성장특성을 규명하기 위해 온도, 염분, 광도의 다양한 조건에서 A. catenella 성장을 조사하였다. $50\sim150{\mu}E\;m^{-2}s^{-1}$까지는 광도가 증가함에 따라 A. catenella 성장도 증가하였으나 $50\sim150{\mu}E\;m^{-2}s^{-1}$ 이상의 광도에서는 A. catenella 성장이 일정하게 유지하였다. 온도는 $15\sim25^{\circ}C$에서 성장하였고 $20^{\circ}C$에서 가장 잘 성장하였다. A. catenella는 25 PSU까지는 염분이 증가함에 따라 성장률도 증가하였으나 그 이상의 염분 농도에서는 성장이 일정하거나 감소하였다. 본 연구를 통한 A. catenella 최적 성장조건은 $50\sim150{\mu}E\;m^{-2}s^{-1}$, 30 PSU, $20^{\circ}C$에서 가장 높은 성장률 $k=0.45\;d^{-1}$을 나타내었다. 최적 성장조건에서 셀레니움과 철의 다양한 농도에 따라 A. catenella 성장특성을 조사하였는데 철농도는 $11.7{\mu}M$에서 최대값을 나타내었고 $(k=0.48\;d^{-1})$, $11.7{\mu}M$ 보다 낮은 농도에서는 철농도가 감소할수록 A. catenella 성장률도 감소하였다. A. catenella는 $10^{-3}\sim0.1{\mu}M$ 셀레니움 농도에서 A. catenella 세포밀도가 증가하고 대수성 장기 후반(the end of exponential phase)이 길어짐을 관찰 하였다.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제18권11호
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• pp.778-784
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• 2017

참굴(Crassostrea gigas)의 패각운동을 이용하여 Alexandrium 속의 조기 출현모니터링 가능성을 고찰하였다. 지구규모에서 패류독화를 발생시키는 A. fundyense와 잠재적 유독종으로 알려진 A. affine를 이용하여 홀 소자센서(Hall element sensor)를 사용하여 참굴의 패각운동(SVMs)을 측정하였다. 참굴은 Isocrysis galbana를 먹이생물로 하여 안정화 시킨 다음 3일간 절식 시킨 후 실험에 제공하였다. 결과 참굴은 A. fundyense에 대해 세포밀도 20 cells/mL에서 SVMs 횟수가 $10.5{\pm}1.2times/hr$로 증가하여 민감하게 반응하였고, 세포밀도 500 cells/mL에서 재차 $14.1{\pm}5.7times/h$, 5,000 cells/mL에서 $27.9{\pm}11.1times/hr$로 SVMs가 급격한 증가를 보였다. 그러나 A. affine에 대해서는 세포밀도가 300 cells/mL까지 $6.7{\pm}3.9times/hr$로 기준 SVMs와 유사하였고, 세포밀도 1,000 cells/mL 이상에서 $15.3{\pm}10.8times/hr$로 급격히 증가하였다. 즉 A. fundyense는 20 cells/mL에서부터 참굴의 SVMs가 민감하게 반응하였지만, A. affine는 높은 1,000 cells/mL의 세포밀도에서 SVMs가 반응하였다. 이러한 결과에서 유독와편모조에 대한 참굴의 SVMs는 종에 따른 차이가 있어, A. fundyense의 초기발생 예보에는 유용하게 활용 가능하지만, A. affine에 응용하는 것은 어렵다는 결론을 얻었다.