The biological activity of hot water extract from Ecklonia cava Kjellman (ECE) was investigated to assess antioxidative, anti-skin aging, and nitrite scavenging abilities, as well as alcohol metabolizing activities. Antioxidant activity of ECE was measured by using 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and superoxide dismutase (SOD)-like activity. DPPH radical scavenging activity and SOD-like activity of ECE increased in a remarkably dose-dependent manner, and were about 91.4% and 75% at 1 mg/ml, respectively. The xanthine oxidase inhibitory activity was indicated to be about 70% at 1 mg/ml of ECE. Nitrite scavenging ability of ECE showed to be 93.6% at 1 mg/ml and pH 1.2. The influence of ECE on alcohol metabolism was demonstrated through the generating activity of reduced-nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) by alcohol dehydrogenase (ADH) and acetaldehyde dehydrogenase (ALDH). The facilitating rate of ADH and ALDH activity by ECE was 167.2% and 334% at 10 mg/ml, respectively. In addition, tyrosinase and elastase inhibitory activities of ECE were 58% and 72% at 10 mg/ml, respectively. These results indicated that ECE has valuable biological attributes owing to its antioxidant, nitrite scavenging, alcohol metabolizing, and elastase and tyrosinase inhibitory activities.
To understand the properties of the cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter and the effect of the deleted maize alcohol dehydrogenase I-S (Adhl-S) intron 1 on the expression of the CaMV $35S{\beta}-glucuronidase$ (GUS) gene in potato (Solanum tuberosum L. cv. Superior), we constructed a chimeric gene and transferred it into potato with Agrobacterium tumefaciens mediated method. The pLS201, a gene transfer vector of 17.7 kilobase pairs, was composed of the CaMV 35S promoter, the 249 base pairs of deleted maize Adhl-S intron 1, the GUS reporter gene, and the kanamycin resistance gene as a selectable marker for transformation. The GUS activity was examined by histochemical and spectrophotometric assay in transformed potato plants. The GUS activity was found primarily around the vascular tissue cells in stem and root. In the spectorophotometric assay, the level of GUS activity of transgenic potato transformed with CaMV 35S/249 bp of intron 1 fragment-GUS (pLS201) was compared with that of potato transformed with CaMV 35S-GUS (pBI121). The quantitative spectrophotometric assay showed that the level of GUS activity in potato transformed with pLS201 was higher in leaf, stem and root by 30-, 34- and 42-fold, respectively than those in potato transformed with pBI121. This results indicate that the inclusion of the deleted maize Adhl-S intron 1 resulted in increament of the GUS gene expression in transgenic potato.potato.
Dwamena, Amos K.;Phillips, Robert S.;Kim, Chang Sup
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.3
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pp.373-381
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2019
Site-directed mutagenesis was employed to generate five different triple point mutations in the double mutant (C295A/I86A) of Thermoanaerobacter ethanolicus alcohol dehydrogenase (TeSADH) by computer-aided modeling with the aim of widening the small alkyl-binding pocket. TeSADH engineering enables the enzyme to accept sterically hindered substrates that could not be accepted by the wild-type enzyme. The underline in the mutations highlights the additional point mutation on the double mutant TeSADH introduced in this work. The catalytic efficiency ($k_{cat}/K_M$) of the ${\underline{M151A}}$/C295A/I86A triple TeSADH mutant for acetophenone increased about 4.8-fold higher than that of the double mutant. A 2.4-fold increase in conversion of 3'-methylacetophenone to (R)-1-(3-methylphenyl)-ethanol with a yield of 87% was obtained by using ${\underline{V115A}}$/C295A/I86A mutant in asymmetric reduction. The ${\underline{A85G}}$/C295A/I86A mutant also produced (R)-1-(3-methylphenyl)-ethanol (1.7-fold) from 3'-methylacetophenone and (R)-1-(3-methoxyphenyl)-ethanol (1.2-fold) from 3'-methoxyacetophenone, with improved yield. In terms of thermal stability, the ${\underline{M151A}}$/C295A/I86A and ${\underline{V115A}}$/C295A/I86A mutants significantly increased ${\Delta}T_{1/2}$ by $+6.8^{\circ}C$ and $+2.4^{\circ}C$, respectively, with thermal deactivation constant ($k_d$) close to the wild-type enzyme. The ${\underline{M151A}}$/C295A/I86A mutant reacts optimally at $70^{\circ}C$ with almost 4 times more residual activity than the wild type. Considering broad substrate tolerance and thermal stability together, it would be promising to produce (R)-1-(3-methylphenyl)-ethanol from 3'-methylacetophenone by ${\underline{V115A}}$/C295A/I86A, and (R)-1-phenylethanol from acetophenone by ${\underline{M151A}}$/C295A/I86A mutant, in large-scale bioreduction processes.
Aldehyde dehydrogenase (ALDH) plays an important role in alcohol metabolism; ALDH is responsible for the oxidation of acetaldehyde generated during alcohol oxidation. ALDH is also known to oxidize various other endogenous and exogenous aldehydes. Cytochrome P-450 2E1 (CYP2E1), a liver microsomal enzyme, also metabolizes acetaldehyde and ethanol and can be induced by other inducers including acetone and ethanol. We examined single nucleotide polymorphisms (SNP) of ALDH and CYP2E1 genotypes in Korean. Restriction fragment length polymorphism (RFLP) method was used to determine ALDH and CYP2E1 SNP. Mutation in ALDH was 60% (heterozygote 46.7% and homozygote 13.3%) among 15 cases. CYP2E1 mutation was 52.7% (heterozygote 47.4% and homozygote 5.3%) among 19 cases.
Objectives : The effect of pear extract with Daekumeumjagami and vitamin C medication(PDV) on alcohol metabolism and hepatic injury was assessed following hepatic injury induced by alcohol in mice. Methods : The model of alcoholic hepatic injury was established by orally administration with 3 g/kg 25% alcohol in mice. PDV was orally administrated once a day for 5 days. Mice were randomly divided into 5 groups : normal group, control group, and PDV groups (PDV-A, PDV-B and PDV-C). The activities of aspartate amino transferase (AST) and alanine amino transferase (ALT) and alcohol dehydrogenase (ADH) in serum, superoxide dismutase (SOD) and catalase in liver were determined after alcohol exposure. Results : Compared with control group, treatment with PDV-B and PDV-C significantly elevated activities of ADH. Moreover, the index of hepatic injury in serum was significantly decreased by treatment with PDV-B and PDV-C in ALT activity and PDV-C in AST activity. Additionally, enhanced catalase activities in liver was found in PDV-C treated mice after exposure to alcohol. Also, WBC in blood was significantly lower by treatment with PDV-B and PDV-C. Conclusions : This study suggests that PDV treatment could enhance alcohol metabolism, and prevent hepatic injury after alcoholic hepatic injury and that this effect is likely related to its modulation on the alcohol metabolizing and antioxidant enzymes.
Shin, Chol;Kwack, KyuBum;Cho, Nam H.;Kim, Seong Hwan;Baik, Inkyung
Nutrition Research and Practice
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v.9
no.1
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pp.79-86
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2015
BACKGROUND/OBJECTIVES: It is well-known that alcohol consumption is associated with stroke risk as well as with aldehyde dehydrogenase 2 gene (ALDH2) polymorphisms. However, it is unclear whether ALDH2 polymorphisms are associated with stroke risk independent of alcohol consumption and whether such association is modified by sex. We evaluated sex-specific associations of a common ALDH2 polymorphism and alcohol consumption with stroke risk in a Korean population. SUBJECTS/METHODS: We conducted a prospective cohort study involving 8,465 men and women, aged 40-69 years and free of stroke between June, 2001 and January, 2003, and followed for the development of stroke. We identified new cases of stroke, which were self-reported or ascertained from vital registration data. Based on genome-wide association data, we selected a single-nucleotide polymorphism (rs2074356), which shows high linkage disequilibrium with the functional polymorphism of ALDH2. We conducted Cox proportional hazards regression analysis considering potential risk factors collected from a baseline questionnaire. RESULTS: Over the median follow-up of 8 years, 121 cases of stroke were identified. Carrying the wild-type allele of the ALDH2 polymorphism increased stroke risk among men. The multivariate hazard ratio [95% confidence interval] of stroke was 2.02 [1.03-3.99] for the wild-type allele compared with the mutant alleles, but the association was attenuated after controlling for alcohol consumption. Combinations of the wild-type allele and other risk factors of stroke, such as old age, diabetes mellitus, and habitual snoring, synergistically increased the risk among men. Among women, however, the ALDH2 polymorphism was not associated with stroke risk. CONCLUSIONS: The prospective cohort study showed a significant association between a common ALDH2 polymorphism and stroke risk in Korean men, but not in Korean women, and also demonstrated that men with genetic disadvantages gain more risk when having risk factors of stroke. Thus, these men may need to make more concerted efforts to control modifiable risk factors of stroke.
In this study, we investigated the antioxidant activities, alcohol metabolizing activities, nitrite scavenging ability, angiotensin converting enzyme (ACE), and elastase inhibitory effects of hot water extract from Makgeoly (HWM). Antioxidant activities were measured by using 2,2.diphenyl.1.picryl.hydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity and SOD (superoxide dismutase).like activity. The DPPH radical scavenging activity and SOD.like activity of HWM were remarkably increased in a dose.dependent manner and were 48.0% and 98.7% at 10 mg/ml, respectively. To determine the influence of HWM on alcohol metabolizing activity, the generating activities of reduced.nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) by alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH) were measured. The facilitating rates of ADH and ALDH activity by HWM were remarkably increased in a dose.dependent manner and were 70.2% and 64.1% at 10 mg/ml, respectively. The inhibitory activity against angiotensin converting enzyme (ACE) of HWM was increased in a dose.dependent manner and was 74.2% at 10 mg/ml. The nitrite scavenging ability of HWM showed the most remarkable effect at pH 1.2 and 2 mg/ml. These results indicated that HWM may have valuable biological properties owing to their antioxidant activities, ADH and ALDH activity, nitrite scavenging ability, and ACE inhibitory activity.
γ-Glutamylcysteine synthetase (Gcs1) and glutathione reductase (Glr1) activity maintains minimal levels of cellular methylglyoxal in Candida albicans. In glutathione-depleted Δgcs1, we previously saw that NAD(H)-linked methylglyoxal oxidoreductase (Mgd1) and alcohol dehydrogenase (Adh1) are the most active methylglyoxal scavengers. With methylglyoxal accumulation, disruptants lacking MGD1 or ADH1 exhibit a poor redox state. However, there is little convincing evidence for a reciprocal relationship between methylglyoxal scavenger genes-disrupted mutants and changes in glutathione-(in)dependent redox regulation. Herein, we attempt to demonstrate a functional role for methylglyoxal scavengers, modeled on a triple disruptant (Δmgd1/Δadh1/Δgcs1), to link between antioxidative enzyme activities and their metabolites in glutathione-depleted conditions. Despite seeing elevated methylglyoxal in all of the disruptants, the result saw a decrease in pyruvate content in Δmgd1/Δadh1/Δgcs1 which was not observed in double gene-disrupted strains such as Δmgd1/Δgcs1 and Δadh1/Δgcs1. Interestingly, Δmgd1/Δadh1/Δgcs1 exhibited a significantly decrease in H2O2 and superoxide which was also unobserved in Δmgd1/Δgcs1 and Δadh1/Δgcs1. The activities of the antioxidative enzymes erythroascorbate peroxidase and cytochrome c peroxidase were noticeably higher in Δmgd1/Δadh1/Δgcs1 than in the other disruptants. Meanwhile, Glr1 activity severely diminished in Δmgd1/Δadh1/Δgcs1. Monitoring complementary gene transcripts between double gene-disrupted Δmgd1/Δgcs1 and Δadh1/Δgcs1 supported the concept of an unbalanced redox state independent of the Glr1 activity for Δmgd1/Δadh1/Δgcs1. Our data demonstrate the reciprocal use of Eapx1 and Ccp1 in the absence of both methylglyoxal scavengers; that being pivotal for viability in non-filamentous budding yeast.
In vitro biological activities of ethanol extract of radish including whitening, hangover removal, antimicrobial and antioxidant activities were analyzed. For whitening activity assay, tyrosinase inhibition rate was measured as $IC_{50}$ (50% inhibitory concentration). The $IC_{50}$ values of radish trunk and root extracts were estimated as 0,9 mg/ml and 2.1 mg/ml, respectively. Radish trunk extract showed 2.5-fold tyrosinase inhibition activity of radish root extract, however, there was no significant difference according to radish species. By alcohol dehydrogenase (ADH) activity assay as a hangover removal activity assay, radish trunk extract (2.5 mg/ml) and root extracts (8 mg/ml) showed ]50% activation of ADH. TBA values of radish trunk and root extracts (1% of each) were 43-61 % level of ${\alpha}-tochoperol$ (2.2%). From the analysis of in vitro biological activities of radish, it was suggested that radish could be used in functional food or cosmetics containing hangover removal, whitening and antioxidant activities.
To evaluate the effect of repeated treatment of xylene on its metabolism, m-xylene (0.25 ml of 50% in olive oi1/100 g body weight) has been intraperitoneally given to the rats 1, 4, 8, 12 and 16 times every other day. m-Xylene was once more administered to the animals after 24 hrs since last injection of it. And then the animals were sacrificed after 24 hrs. Four times xylene treated rats showed the significantly elevated urinary m-methylhippuric acid, compared to those treated with the single dose of m-xylene with the continued similiar high levels of urinary m-methylhippuric acid up to the animals pretreated 12 times and then those treated 16 times defined the significantly decreased urinary m-methylhippuric acid compared to those treated 12 times. On the other hand, hepatic aniline hydroxylase and alcohol dehydrogenase activities demonstrated a gradual increase from the first group to the 12 times xylene-treated animals, but those treated 16 times showed the significantly decreased value compared with the 12 times treated-group. And aldehyde dehydrogenase activities in rats treated with m-xylene 8, 12 or 16 times were significantly decreased compared to those pretreated one or four times. In the early stage of xylene administration, proliferation of SERs were seen whereas SERs were decreased and RERs were clearly increased in xylene-treated rats 16 times. These results indicate that the frequency of xylene injection may influence upon the changes in xylene metabolite, m-methylhippuric acid and it may be due to induction of xylene metabolizing enzymes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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