The intact dental pulps which were free of their tooth bud from adult rat incisors, and oral mucosa were transplanted subcutaneously in homologous rats to study the formation of calcified tissue. The rat were sacrificed after 1,2,3 and 4 weeks following transplantation of dental pulp and oral mucosa. The samples which contained the transplanted and surrounding tissue were fixed in 10% NBF, stained with hematoxylin and eosin, alizarin red S, von Kossa, and alcian blue. Microscopic examinstins revealed as follows: 1. The transplanted oral mucosas were not calcified but tended to form the epithelial cysts. 2. At 1 week after transplantation of dental pulp the calcified structures were appeared at the periphery of the transplantation of dental pulp but weakly reacted to alizarin red S, von Kossa, and alcian blue. 3. At 2 weeks after transplantation of dental pulp the calcified structures began to expand from the periphery to the center of the transplanted dental pulp and occupied the large areas comparatively, and strongly reacted to alizarin red S, and von Kossa stains. 4. At 3 weeks after transplantation of pulp tissue the fibrous components were grown at the periphery of the transplanted pulp tissuesand at 4 weeks a large amount of fibrous tissues were observed. The transplanted pulp tissue tended to form foreign bodies gradually.
We report large tumors of the left thoracic cavity, which arose from the ribs, were diagnosed as chondrosarcoma in a 4-year-old male mixed dog. The dog was presented with swelling in the left side of the chest wall and lameness. The masses were found to be circumscribed, whitish-grey, large and firm. The cut surface revealed whitish-grey lobules of varying size with cartilaginous consistency. Those were subsequently metastasized to the lung and mandibular lymph node. Histologically, the tumors were made up of clusters of chondroid cells having pleomorphic hyperchromatic nuclei with occasional mitosis. A special and immunohistochemical staining was performed to confirm the diagnosis. Chondroid matrix in tumor showed a positive reaction for alcian blue-periodic acid-Schiff staining. Immunoreactivity to S-100 proteins was present in the cytoplasm and/or nucleus of chondrocytes in tumor. The final diagnosis was grade III chondrosarcoma in the rib, considering histological features in grading criteria.
This study is a report about a specific patient whose primary stomach adenocarcinoma metastasized to uterine cervix adenocarcinoma. A thirty-nine year old female patient was initially diagnosed as having metastatic adenocarcinoma in the supraclavicular lymph node. Upon further examination, she was diagnosed with stomach adenocarcinoma. 8 months later, a cervix punch biopsy was performed. The stains used for examination were H&E stain, PAS stain, Alcian blue stain, Mucicarmine stain, Papanicolaou's (Pap.) stain, and as immunohistochemical stains, cytokeratin 7 and 20 were done. In the H&E stain, the tumor cells showed prominent and eccentric nuclei, thin nuclear membrane in abundant mucous cytoplasm, and cylinder shape. In the PAS stain, intracytoplasmic mucin vacuoles were stained with pink, and in Alcian blue and Mucicarmine stains, intracytoplasmic mucin vacuoles were stained with blue and red. As in the above results, she was diagnosed with undifferentiated adenocarcinoma. As found on the cytologic smear preparation of the uterine cervix stained by Papanicolaou's stains, the background was relatively clear, the number of malignant cells was relatively low, and large and eccentric nuclei in abundant cytoplasm were observed. Upon observing the tissue preparation of the uterine cervix biopsy by H&E stain, a clear background, large and eccentric nuclei, and a signet ring cell types were observed, and the number of malignant cells were fewer than in the primary uterine cervix adenocarcinoma. The vacuoles in cytoplasm were observed. The nuclear membrane and chromatin were thick and very rough, and upon observation by cytokeratin 7 and 20 of immunohistochemical stain, the tumor cells indicated a positive rate of 70% and 20%, respectively. According to these results, also she was diagnosed with metastasized uterine cervix adenocarcinoma. In summary of the results of pathologic findings on stomach biopsy and cytologic, histopathologic, and immunohistochemical finding on uterine cervix biopsy, the adenocarcinoma of her uterine cervix could assert the adenocarcinoma of signet ring cell type that was metastasized from the primary undifferentiated adenocarcinoma in stomach.
연골세포 분화기구 연구의 기초단계로서 미세 세포배양법을 정립하였으며, 세포의 응집정도와 연골분화의 관계를 조사하기 위하여 계배 limb bod 간충직세포를 여러가지 농도로 micromass 배양하면서 세포농도에 따른 세포증식정도와 proteoglycan에 결합된 alcian blue의 양 및 [35 S] sulfate의 sulfate proteohlycan에 표지되는 속도를 측정하고, 면역조직화학법을 이용하여 type II collegen의 발현을 관찰하였다. 각 농도별로 배양한 Hambruger-Hamilton stage 23/24 간충직세포 중 5. $\times$ 106 cells/ml 이상의 농도로 배양한 세포는 연골세포로 분화하였으나, 저농도로 배양한 세포는 분화하지 않았다. 반면에 stage 18/19 간충직세포는 분화단계 중에서 동일세포들끼리 응집되는 단계이며 stage 23/24 간충직세포 이 단계를 지나 분화능을 갖는 세포응축의 단계인 것으로 생각된다. 본 연구 결과 세포응집 및 분화능은 간충직세포의 발생시기에 따라 다르며, 분화능을 갖기 위해서는 세포응집이 선행조건이고, 그 적정 미세 배양 농도는 5-10 $\times$ 106 cells/ml임을 알았다. 한편, hyaluronidase의 활성은 stage 23/24세포 배양 전 과정에서 비교적 일정한 것으로 나타나 이 시기의 세포분화에는 별로 중요하지 않는 것으로 보인다.
목적 : Trypsin으로 관절연골의 변성을 인공적으로 유도한 뒤 관절연골의 구성성분인 glycosaminoglycan(GAG)의 소실을 생화학적으로 정량분석하고 $Gd(DTPA)^{2-}$-(gadolinium diethylene triamine pentaacetic acid)조영증강, 그리고 T1, T2, rho 이완시간등과 어떤 상관관계가 있는지를 조사함으로써 관절연골의 초기 퇴행성 변화에 대해서 자기공명영상(MRI)으로 관찰이 가능한 지를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 적출된 3개의 돼지 슬개골에서 실험에 사용될 관절연골조각을 폭 8 mm, 길이 10 mm 크기의 관절연골조각을 3개 만들었다. 분광광흡수계(spectrophotometry)에서 dimethylmethylene blue를 이용한 chondroitin sulfate standard의 흡수도를 측정하여 GAG을 정량분석 하였다. 관절연골을 배양할 용액은 0.2 mg/ml trypsin, 1 mM $Gd(DTPA)^{2-}$ 첨가된 trypsin, 그리고 대조군용 인산염완충식염수(phosphate buffered saline, PBS)의 3가지를 준비하였다. 배양시간은 1시간에서 5시간까지는 매시간마다 배양하였고 24시간과 48시간까지 배양하였다. MRI촬영은 1시간에서 5시간까지만 매시간마다 배양후 시행하였다. 1.5T 기기에서 MRI촬영은 T1강조영상(TR/TE, 450/22)과 혼합에코기법(mixed echo sequence) (TR/TE, 760/21-168, 8 echoes)등을 시행하였다. 모든 촬영에서 영상영역은 50 mm, 절편두께는 2 mm, 그리고 매트릭스는 $256\times512$ 였다. MRI촬영자료에서 관절연골부위를 픽셀단위로 비교분석 하였다. 배양이 끝난 관절연골은 hematoxylin & eosin, toluidine blue, alcian blue, trichrome 염색 등을 시행하여 관찰하였다. 결과 : Dimethylmethylene blue를 이용한 GAG의 정량분석결과 배양시간증가에 따라 GAG의 농도가 비례적으로 증가하였다. $Gd(DTPA)^{2-}$ 첨가된 trypsin배양에서 관절연골의 T1 강조 영상에서의 신호강도는 trypsin 배양에 비하여 평균 $42.0\%$ 증가하였고 4시간과 5시간배양에서는 trypsin에서만 배양한 관절연골에 비하여 신호강도가 더욱 뚜렷하게 증가되었다 (p<0.05). 관절연골의 T1, T2, rho 이완시간은 배양시간에 따라 유의성 있는 차이가 관찰되지 않았으나 $Gd(DTPA)^{2-}$ 첨가된 trypsin배양에서 T1이완시간의 증가가 관절연골의 표층부와 이행부에서 측정되었다. 조직검사결과 trypsin 배양의 관절연골에서 toluidine blue와 alcian blue염색에서 결손이 관찰되었다. 결론 : Trypsin 배양시간에 따라 관절연골의 GAG결손을 정량적으로 확인할 수 있었고 픽셀크기 $97.9\times195\;{\mu}m$인 MRI로 $Gd(DTPA)^{2-}$-조영증강 및 이완시간을 측정할 수 있었다. 배양시간에 따른 GAG결손은 T1, T2, rho 이완시간보다 $Gd(DTPA)^{2-}$-조영증강에서 유의한 차이를 관찰할 수 있었다. 그러므로 관절연골의 초기 퇴행성 변화를 진단하는 데는 T1강조영상에서 $Gd(DTPA)^{2-}$-조영증강정도를 비교하는 것이 가장 유용할 것으로 사료된다.
꿩 비만세포는 원형, 난원형, 방추형 또는 부정형이었고 세포질돌기를 가지고 있었다. 꿩 비만세포는 Karnovsky 용액으로 고정했을 때 가장 좋은 염색성을 얻었고, Toluidine blue로 염색을 했을 때 비만세포의 과립은 이염색성(meta-chromatic)을 나타내었다. 비만세포의 세포질에는 막으로 둘러싸인 과립과 발달이 미약한 세포소기관으로 채워져 있었다. 비만세포의 과립은 원형과 난원형이었고 일부 과립은 막이 함몰된 오목한 모양과 밖으로 돌출된 볼록한 모양이었다. 과립 속의 구조는 동질성, 입자형 또는 망상형이었다.
The endosperm cells and the umbiliform layer of ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) seed are studied with light and electron microscope. Differentiated mitochondria, ER cisternae, proplastids and ribosomes are characteristically observed in the endosperm cells of matured seed. The cell inclusions contain the protein bodies and the spherosomes. Protein body contains, in proteinaceous matrix, globoids and crystalloids. Particularly the crystalloids have the lattice structure, and the formation of globoids is closely related with ER. Umbiliform layer has the positive reaction on alcian blue (pH 2.5) and the metachromasis on the toluidine blue. The umbiliform layer is formed by autolysis of endosperm cells, and composed of the deformated cell wall and the lipoprotein bodies. Particularly a part of the lipoprotein body and the fibrilar network structure have the positive reaction on acid phosphatase.
To study some informations on the morphogenesis and developmental process of the coronal suture in rats, the author performed daily oral administrations of demethylchlorotetracycline, a kind of tetracycline group, in the amount of 30mg/kg of body weight to the female rats from the 7th day of pregnancy to the time of delivery. Microscopic evaluation was undertaken on the fetal rats in the experimental group. The subject of this experiment were defined to the fetal rats of each group at 1st, 3rd, 7th and 14th day after birth. All these fetal rats were sacrificed and the heads were removed. All the tissue sections were fixed with $10\%$ formalin, Bouin' and Carnoy' solution and then stained by Hematoxylin-Van Gieson stain, or Feulgen and Rossenbeck, Periodic acid Schiff, and prepared for alcian blue reaction. The results were as follows; 1. The directions of osteogenic fibers were arranged irregulary during first 3 days, but after the 7th day they tended to change radial directions like control group. 2. The density of deep stained cells by Feulgen-Rossenbeck reaction were shown leu in the experimental group than that in the control group in first 3 days, but there was shown no significant difference between both groups after the 7th day. 3. PAS reaction in early stage was generally negative in the experimental group unlike as in the control group, but diffuse reaction was observed in the loose middle zone like as in the control group after 14th day. 4. Alcian blue reaction was negative in cambial zone, and slightly positive in uniting zone compared with control group in early stage. After 14th day, however, there was observed a tendency of moderately positive reaction.
대하 아가미의 형태와 미세구조를 광학현미경과 전자현미경으로 조사하였다. 대하는 수지형 아가미를 가진 다. 아가미는 출새관과 입새관을 구분하는 세로 격벽을 가진다. 각각의 새판은 전자밀도가 다른 다층구조의 큐터클로 싸여 있다. 새판 기저세포들은 편평형이며, 전자밀도가 높은 세포질을 가진다. 상피세포층은 단층으로 큰 핵을 가진 편평상피로 구성된다. 새판의 기둥구조는 세로방향의 미세소관들과 측면 membrane interdigitation을 가진다. AB-PAS음성 분비세포들은 다세포선의 형태이다. 활성화된 선에서 각 세포의 경계부는 뚜렷하지 않으며, 세포질에는 활면소포체, 미토콘드리아, 전자밀도가 낮으며 막을 가진 분비소포들과 granular rosettes를 가진다. 비 활성화된 선에서는 세포 경계가 뚜렷하며, 세포질에서는 전자밀도가 높은 다수의 작은 과립들이 산재한다. 그리고 alcian blue에 양성인 단세포 분비세포들은 세포질에 발달된 다수의 골지체와 조면소포체들을 함유한다.
Endochondral bone formation is the process by which mesenchymal cells condense into chondrocytes, which are ultimately responsible for new bone formation. The processes of chondrogenic differentiation and hypertrophy are critical for bone formation and are therefore highly regulated. The present study was designed to investigate the effect of aloe-emodin on chondrogenic differentiation in clonal mouse chondrogenic ATDC5 cells. Aloe-emodin treatment stimulated the accumulation of cartilage nodules in a dose-dependent manner. ATDC5 cells were treated with aloe-emodin and stained with alcian blue. Compared with the control cells, the ATDC5 cells showed more intense alcian blue staining. This finding suggested that aloe-emodin induced the synthesis of matrix proteoglycans and increased the activity of alkaline phosphatase. Aloe-emodin also enhanced the expressions of chondrogenic marker genes such as collagen II, collagen X, BSP and RunX2 in a time-dependent manner. Furthermore, examination of the MAPK signaling pathway showed that aloe-emodin increased the activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK), but had no effect on p38 and c-jun N-terminal kinase (JNK). Aloe-emodin also enhanced the protein expression of BMP-2 in a time-dependent manner. Thus, these results showed that aloe-emodin exhibited chodromodulating effects via the BMP-2 or ERK signaling pathway. Aloe-emodin may have potential future applications for the treatment of growth disorders.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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