α-Galactosidase is a debranching enzyme widely used in the food, feed, paper, and pharmaceuticals industries and plays an important role in hemicellulose degradation. Here, T26, an aerobic bacterial strain with thermostable α-galactosidase activity, was isolated from laboratory-preserved lignocellulolytic microbial consortium TMC7, and identified as Parageobacillus thermoglucosidasius. The α-galactosidase, called T26GAL and derived from the T26 culture supernatant, exhibited a maximum enzyme activity of 0.4976 IU/ml when cultured at 60℃ and 180 rpm for 2 days. Bioinformatics analysis revealed that the α-galactosidase T26GAL belongs to the GH36 family. Subsequently, the pET-26 vector was used for the heterologous expression of the T26 α-galactosidase gene in Escherichia coli BL21 (DE3). The optimum pH for α-galactosidase T26GAL was determined to be 8.0, while the optimum temperature was 60℃. In addition, T26GAL demonstrated a remarkable thermostability with more than 93% enzyme activity, even at a high temperature of 90℃. Furthermore, Ca2+ and Mg2+ promoted the activity of T26GAL while Zn2+ and Cu2+ inhibited it. The substrate specificity studies revealed that T26GAL efficiently degraded raffinose, stachyose, and guar gum, but not locust bean gum. This study thus facilitated the discovery of an effective heat-resistant α-galactosidase with potent industrial application. Meanwhile, as part of our research on lignocellulose degradation by a microbial consortium, the present work provides an important basis for encouraging further investigation into this enzyme complex.
Biodegradation is the key process involved in natural lignocellulose biotransformation and utilization. Microbial consortia represent promising candidates for applications in lignocellulose conversion strategies for biofuel production; however, cooperation among the enzymes and the labor division of microbes in the microbial consortia remains unclear. In this study, metagenomic analysis was performed to reveal the community structure and extremozyme systems of a lignocellulolytic microbial consortium, TMC7. The taxonomic affiliation of TMC7 metagenome included members of the genera Ruminiclostridium (42.85%), Thermoanaerobacterium (18.41%), Geobacillus (10.44%), unclassified_f__Bacillaceae (7.48%), Aeribacillus (2.65%), Symbiobacterium (2.47%), Desulfotomaculum (2.33%), Caldibacillus (1.56%), Clostridium (1.26%), and others (10.55%). The carbohydrate-active enzyme annotation revealed that TMC7 encoded a broad array of enzymes responsible for cellulose and hemicellulose degradation. Ten glycoside hydrolases (GHs) endoglucanase, 4 GHs exoglucanase, and 6 GHs β-glucosidase were identified for cellulose degradation; 6 GHs endo-β-1,4-xylanase, 9 GHs β-xylosidase, and 3 GHs β-mannanase were identified for degradation of the hemicellulose main chain; 6 GHs arabinofuranosidase, 2 GHs α-mannosidase, 11 GHs galactosidase, 3 GHs α-rhamnosidase, and 4 GHs α-fucosidase were identified as xylan debranching enzymes. Furthermore, by introducing a factor named as the contribution coefficient, we found that Ruminiclostridium and Thermoanaerobacterium may be the dominant contributors, whereas Symbiobacterium and Desulfotomaculum may serve as "sugar cheaters" in lignocellulose degradation by TMC7. Our findings provide mechanistic profiles of an array of enzymes that degrade complex lignocellulosic biomass in the microbial consortium TMC7 and provide a promising approach for studying the potential contribution of microbes in microbial consortia.
Objective: The objective was to evaluate the impact of different forms of iron including myoglobin, hemin, and ferric chloride on the quality of chicken breast meat. Methods: Chicken breast muscles were subjected to 1, 2, 3 mg/mL of FeCl3, myoglobin and hemin treatment respectively, and the production of reactive oxygen species (ROS) and malondialdehyde, meat color, tenderness, water holding capacity and morphology of meat was evaluated. Results: Hemin was found to produce more ROS and induce greater extent of lipid oxidation than myoglobin and ferric chloride. However, it showed that hemin could significantly increase the redness and decrease the lightness of the muscle. Hemin was also shown to be prominent in improving water holding capacity of meat, maintaining a relatively higher level of the immobilized water from low-field nuclear magnetic resonance measurements. Morphology observation by hematoxylin-eosin staining further confirmed the results that hemin preserved the integrity of the muscle. Conclusion: The results indicated that hemin may have economic benefit for the industry based on its advantage in improving water holding capacity and quality of meat.
This study investigated the effect of the level of ethics in food manufacturing of agricultural products processing companies on food safety and product trust. In general, a company's food manufacturing ethics is complex, includes social responsibility, and has a potential impact on stakeholders. The main implications summarized based on the analysis results are the expansion of the HACCP application of the agricultural product processing system, the production of safe agri-food that fulfills social responsibilities with an ethical awareness, including entrepreneurial awareness, from raw materials to processing, packaging, and distribution from a long-term perspective. It was found that it was necessary to secure product trust and to provide education, consulting and management on ethical awareness.
The effect of age (22, 30, 38, and 46 days) on Beijing duck breast myosin gels was investigated. The results showed that the water holding capacity (WHC) and gel strength were markedly improved at the age of 30 days. Differential scanning calorimetry suggested that the myosin thermal ability increased at the age of 30 and 38 days (p<0.05). A compact myosin gel network with thin cross-linked strands and small regular cavities formed at the age of 30 days, which was resulted from the higher content of hydrophobic interactions and disulfide bonds. Moreover, the surface hydrophobicity of myosin extracted from a 30-day-old duck breast decreased significantly under temperature higher than 80℃ (p<0.05). This study illustrated that myosin extracted from a 30-day-old duck's breast enhanced and stabilized the WHC, thermal stability and molecular forces within the gel system. It concluded that age is an essential influencing factor on the myosin thermal stability and gel quality of Beijing duck due to the transformation of fibrils with different myosin character.
Objective: The objective of this research was to study the electrical properties and quality of frozen-thawed chicken breast meat and to investigate the relationship between these parameters at different times of frozen storage. Methods: Thawed samples of chicken breast muscles were evaluated after being kept in frozen storage at $-18^{\circ}C$ for different periods of time (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, and 8 months). Results: The results showed that water-holding capacity (WHC) and protein solubility decreased while thiobarbituric acid-reactive substances content increased with increasing storage time. The impedance module of samples decreased during 8-month frozen storage. Pearson correlation coefficients showed that the impedance change ratio (Q value) was significantly (p<0.05) related to pH, color, WHC, lipid oxidation and protein solubility, indicating a good relationship between the electrical properties and qualities of frozen-thawed chicken breast meat. Conclusion: Impedance measurement has a potential to assess the quality of frozen chicken meat combining with quality indices.
The objective of this study was to compare the physicochemical and nutritional properties of breast and thigh meat from commercial Chinese crossbred chickens (817 Crossbred chicken, 817C), imported commercial broilers (Arbor Acres broiler, AAB), and commercial spent hens (Hyline Brown, HLB). The crossbred chickens, commercial broilers and spent hens were slaughtered at their typical market ages of 45 d, 40 d, and 560 d, respectively. The results revealed that several different characteristic features for the three breeds. The meat of the 817C was darker than that of the other two genotypes. The 817C were also characterized by higher protein, lower intramuscular fat, and better texture attributes (cooking loss, pressing loss and Warner-Bratzler shear force [WBSF]) compared with AAB and HLB. The meat of the spent hens (i.e. HLB) was higher in WBSF and total collagen content than meat of the crossbred chickens and imported broilers. Furthermore, correlation analysis and principal component analysis revealed that there was a clear relationship among physicochemical properties of chicken meats. With regard to nutritional properties, it was found that 817C and HLB exhibited higher contents of essential amino acids and essential/non-essential amino acid ratios. In addition, 817C were noted to have highest content of microelements whereas AAB have highest content of potassium. Besides, 817C birds had particularly higher proportions of desirable fatty acids, essential fatty acids, polyunsaturated/saturated and (18:0+18:1)/16:0 ratios. The present study also revealed that there were significant differences on breast meat and thigh meat for the physicochemical and nutritional properties, regardless of chicken breeds. In conclusion, meat of crossbred chickens has some unique features and exhibited more advantages over commercial broilers and spent hens. Therefore, the current investigation would provide valuable information for the chicken meat product processing, and influence the consumption of different chicken meat.
Objective: The objectives of this study were to investigate the direct antioxidative effect of 90 Kda heat shock protein (Hsp90) obtained from duck muscle. Methods: The interaction of Hsp90 with phospholipids and oxidized phospholipids was studied with surface plasmon resonance (SPR), and their further oxidation in the presence of Hsp90 was evaluated with thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) assay. The scavenging effect on the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azinobis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) was measured, and the electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy in combination with 5-tert-Butoxycarbonyl-5-methyl-1-pyrroline-N-oxide and 2-phenyl-4,4,5,5,-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide (PTIO) was utilized to determine the abilities of Hsp90 in scavenging hydroxyl and PTIO radicals. Results: SPR showed Hsp90 could bind with both phospholipids and oxidized phospholipids, and prevent their further oxidation by the TBARS assay. The DPPH and ABTS scavenging activity increased with Hsp90 concentration, and could reach 27% and 20% respectively at the protein concentration of 50 μM. The EPR spectra demonstrated Hsp90 could directly scavenge ·OH and PTIO· radicals. Conclusion: This suggests that Hsp90, a natural antioxidant in meat, may play an important role in cellular defense against oxidative stress, and may have potential use in meat products.
In order to improve feed values of Korean agricultural by-products, various treatments including physical, chemical, physicochemical and fermentation were suggested in th is review article. Physical treatments such as chopping, grinding and pelleting reduce partiole size of agricultural by-products, and increase passage rate from the rumen, thus may increase voluntary feed intake and weight gain. Digestibility and voluntary feed intake of straw, rice hull and sawdust, also, may be increased by chemical treatment using sodium hydroxide or ammonia. Especially, because nitrogen content of by-products increase and toxic problem is not posed by ammonia treatment, it's practical usage is recommended in Korea. Silage or fermentation treatment using principles of microbial fermentation may improve palatability of low quality by-products. As mentioned above, it is concluded that various treatments suggested are desirable and improve feed value but may raise several problems. Unfortunately, because cost for installation and products is great and processing work is complicate, farmers are not using well these processing methods until now. Therefore, in order to increase the practical usage at farm level, it is thought that many research works be achieved for efficient process which have simple operation and low installation cost.
A fibrinolytic enzyme was produced by an edible mushroom of Pleurotus ostreatus using submerged culture fermentation. The enzyme was purified from the culture supernatant by applying a combination of freeze-thaw treatment, ammonium sulfate precipitation, hydrophobic interaction, and gel filtration chromatographies. The enzyme was purified by a 147-fold, with a yield of 7.54%. The molecular masses of the enzyme an determined by gel filtration and SDS-PAGE were 13.6 and 18.2 kDa, respectively. The isoelectric point of the enzyme was 8.52. It hydrolyzed fibrinogen by cleaving the ${\alpha}$ and ${\beta}$ chains of fibrinogen followed by the ${\gamma}$ chains, and also activated plasminogen into plasmin. The enzyme was optimally active at $45^{\circ}C$ and pH 7.4. The enzyme activity was completely inhibited by EDTA, whereas protease inhibitors of TPCK, SBTI, PMSF, aprotinin and pepstatin showed no inhibition on its activity. The partial amino acid sequences of the enzyme as determined by Q-TOF2 were ATFVGCSATR, GGTLIHESSHFTR, and YTTWFGTFVTSR. These sequences showed a high degree of homology with those of metallo-endopeptidases from P. ostreatus and Armillaria mellea. The purified enzyme can also be applied as a natural agent for oral fibrinolytic therapy or prevention of thrombosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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