The pabS gene of Agaricus bisporus 02 encoding a putative PABA synthase was cloned, and then the recombinant protein was expressed in Escherichia coli BL21 under the control of the T7 promoter. The enzyme with an N-terminal GST tag or His tag, designated GST-AbADCS or His-AbADCS, was purified with glutathione Sepharose 4B or Ni Sepharose 6 Fast Flow. The enzyme was an aminodeoxychorismate synthase, and it was necessary to add with an aminodeoxychorismate lyase for synthesizing PABA. AbADCS has maximum activity at a temperature of approximately 25℃ and pH 8.0. Magnesium or manganese ions were necessary for the enzymatic activity. The Michaelis-Menten constant for chorismate was 0.12 mM, and 2.55 mM for glutamine. H2O2 did distinct damage on the activity of the enzyme, which could be slightly recovered by Hsp20. Sulfydryl reagents could remarkably promote its activity, suggesting that cysteine residues are essential for catalytic function.
Antimetastatic effects of Agaricus mixed prescription (AMP) were studied in the respect of blood-borne metastasis. For this aim, cytotoxicity against various cancer cells and normal cells, Chicken Chorioallantoic membrane (CAM) assay, cancer cell adhesion assay, platelet aggregation assay, pulmonary colonization, life span of S-180 implanted mice, and cytokine release assay were evaluated, respectively. The results were summarized as follows; AMP did not exert any cytotoxicity against all cell lines with IC50 of 25mg/ml on B16BL6. AMP disrupted formation of CAM at 1mg/ml. AMP was suppressive in adhesion assay of B16BL6. AMP also inhibited tumor induced platelet aggregation. In pulmonary colonization assay by B16BL6, the number of colonies in the lungs was significantly decreased in sample group than in control group. In animal study with S-180, the life span of AMP treated group was extended than that of control group. IL-12 was effectively increased in AMP treated group in cytokine release assay. Taken together, AMP can be possibly applied to cancer or metastasis.
Angiogenesis, the formation of new blood vessels, is considered to be involved in many pathological symptoms such as diabetic retinopathy, arthritis, inflammation and solid tumour. In particular, it is thought that angiogenesis is critical for development and growth of solid tumour. Recent study shows that there is a highly significant association of microvessel density with overall survival and relapse-free survival in patients with breast tumour In this study, the inhibition effect of angiogenesis of traditional herbs used for the treatment of cancer was examined. It was found out that the extract of Agaricus blazei by boiling water is a possible inhibitor of angiogenesis. It inhibited normal developmental angiogenesis In the chorioallantoic membrane of chick embryos and also inhibited capillary-like tube formation by endotherial cells on matrigel in vitro. These results suggest that Agaricus blazei can be a potent angiogenesis inhibitor.
A highly efficient cellobiohydrolase (CBH)-secreting basidiomycetous fungus, Agaricus arvensis KMJ623, was isolated and identified based on its morphological features and sequence analysis of internal transcribed spacer rDNA. An extracellular CBH was purified to homogeneity from A. arvencis culture supernatant using sequential chromatography. The relative molecular mass of A. arvencis CBH was determined to be 65 kDa by SDSPAGE and 130 kDa by size-exclusion chromatography, indicating that the enzyme is a dimer. A. arvencis CBH showed a catalytic efficiency ($k_{cat}/K_m$) of 31.8 $mM^{-1}\;s^{-1}$ for p-nitrophenyl-${\beta}$-D-cellobioside, the highest level seen for CBH-producing microorganisms. Its internal amino acid sequences showed significant homology with CBHs from glycoside hydrolase family 7. Although CBHs have been purified and characterized from other sources, A. arvencis CBH is distinguished from other CBHs by its high catalytic efficiency.
버섯으로부터 새로운 항통풍성 소재를 개발하여 이를 대체의약의 소재나 건강 기능성 제품 개발에 응용할 수 있는 자료를 얻고자 12종의 국내 버섯 자실체들의 물 추출물을 제조하여 이들의 항통풍성 xanthine oxidase 저해 활성을 측정하였다. 시료 버섯 가운데 신령 버섯 자실체의 물 추출물이 가장 높은 72.9%의 저해 활성을 보였고 이 저해 물질은$30^{\circ}C$에서 24시간 추출하였을 때 가장 많이 용출 되었다.
Oh, Youn-Lee;Choi, In-Geol;Kong, Won-Sik;Jang, Kab-Yeul;Oh, Min ji;Im, Ji-Hoon
Mycobiology
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제49권1호
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pp.61-68
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2021
Agaricus bisporus, commonly known as the button mushroom, is widely cultivated throughout the world. To breed new strains with more desirable traits and improved adaptability, diverse germplasm, including wild accessions, is a valuable genetic resource. To better understand the genetic diversity available in A. bisporus and identify previously unknown diversity within accessions, a phylogenetic analysis of 360 Agaricus spp. accessions using single-nucleotide polymorphism genotyping was performed. Genetic relationships were compared using principal coordinate analysis (PCoA) among accessions with known origins and accessions with limited collection data. The accessions clustered into four groups based on the PCoA with regard to genetic relationships. A subset of 67 strains, which comprised a core collection where repetitive and uninformative accessions were not included, clustered into 7 groups following analysis. Two of the 170 accessions with limited collection data were identified as wild germplasm. The core collection allowed for the accurate analysis of A. bisporus genetic relationships, and accessions with an unknown pedigree were effectively grouped, allowing for origin identification, by PCoA analysis in this study.
본 연구에서는 국내에서 개발된 국내에서 개발된 10개의 양송이 품종을 CAPS 마커를 이용하여 구분하였다. An 등(2021)이 개발한 CAPS 마커 AB-gCAPs-017, AB-gCAPs-047, AB-gCAPs-055, AB-gCAPs-071을 이용하여 새아, 새도, 새한, 새연, 새정, 도담, 설강, 다향, 호감, 하담을 구분할 수 있었다. 본 연구의 결과는 국내 개발 양송이 품종에 대하여 품종간의 구별성과 유전적 다양성을 부여하여 품종보호에 대한 분자생물학적 근거를 마련하였다.
양송이버섯(Agaricus bisporus)은 세계에서 가장 많이 소비되는 버섯이며, 서구화된 식습관의 확대로 인해 국내의 소비량도 최근 증가하고 있는 추세이다. 양송이버섯 품종은 2000년 이전에는 해외품종을 도입하여 사용하였으며, 최근 교잡에 의한 국산 품종의 개발이 시작되었다. 하지만 여전히 다른 버섯품목에 비해 품종의 수가 적은 실정이다. 배양온도별 균사생장속도는 25>20>15>30>$10^{\circ}C$ 순으로 균사생장이 우수한 것으로 확인되었으며, 최근 육성된 국내육성종들은 과거부터 수집된 종에 비해 균사생장이 우수한 그룹에 속하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 ASI1338계통은 균사생장이 우수한 범위가 넓은 계통임을 확인 할 수 있었다. 세균성갈색무늬병 저항성 검증결과 ASI1007, ASI1085, ASI1310, ASI1339 저항성이 강한 계통이었으며, ASI1053, ASI1103, ASI1140, ASI1146, ASI1177, ASI1183, ASI1195, ASI1321, ASI1331, ASI1336 저항성이 상대적으로 약한 계통임을 확인할 수 있었다. 양송이버섯 수집자원의 평균 초발이 일수는 16.5일, 평균수확일수는 5.7일, 평균 수확량은 142.7 g/2 kg bag이었다. 각 특성들의 상관관계를 분석한 결과 균사생장속도는 10, 15, 20, $25^{\circ}C$는 서로 높은 상관성을 보이며 균사가 생장하였으나, $30^{\circ}C$에서는 다른 온도의 생장결과와 상관성이 낮아졌다. 수확량은 초발이일수, 수확일수와 상관관계가 높았다.
국내에서 인공재배되고 있는 느타리버섯 (Pleurotus ostreatus), 표고버섯 (Lentinus edodes), 양송이버섯 (Agaricus bisporus)의 유기산 및 지방산 조성을 GLC법에 의하여 분석하고 버섯의 종류, 크기, 부위에 따른 성분조성의 차이를 비교 검토하였다. 유기산은 3종의 버섯에서 lactic, oxalic, fumaric, succimic, malic, citric 및 pyroglutamic acid등이 확인되었고 malic, citric, pyroglutamic acid등이 많이 함유되어 있었다. 총 유기산 함량은 느타리버섯 $2.4{\sim}4.0%$, 표고버섯 $1.7{\sim}3.6%$, 양송이버섯 $1.9{\sim}3.1%$이었다. 부위별로는 갓부위가 자루부위보다 많았는데 느타리버섯에서는 oxalic과 pyroglutamic acid, 표고버섯은 malic과 citric acid, 양송이버섯은 fumaric acid가 특히 많았으며 크기별로는 크기가 클수록 총유기산 함량은 감소하는 경향이었고 특히 citric acid의 감소가 현저하였다. 지방산은 linoleic, palmitic 및 oleic acid가 주요 지방산이었으며 부위 및 크기별로 비교했을 때는 지방산 조성에 뚜렷한 차이가 없었다.
인공 재배된 신령버섯(Agaricus blazei)의 자실체를 열풍 건조한 다음 다당류를 추출, 분리 정제하여 항암면역활성을 측정하고 그들의 물리화학적 특성의 일부를 조사하였다. 면역증강 다당류는 0.9% sodium chloride와 열수를 사용하여 순차적으로 추출하고 에탄을 침전, 투석 및 동결건조로 얻었으며, 이들 다당류는 이온 교환수지와 겔을 사용하여 균질한 다당류로 정제하였다. 정제된 다당류의 임파구의 항체 형성능 촉진 효과를 in vitro에서 조사한 결과, 0.9% sodium chloride 추출 분획에서 AG-2가, 열수 추출 분획에서 AG-6, -7 및 -8에서 비교적 높은 활성을 보였으며, 특히 AG-3이 양성 대조구(LPS)보다 높은 활성을 보였다. 활성이 비교적 높은 다당류의 경우 주로 glucose로 구성되어 있으며 단백질과 결합된 단백-다당체이었다. 정제된 다당류는 AG-4를 제외하고 모두 glucose를 비롯한 $2{\sim}6$종의 단당류를 갖고 있는 heteropolysaccharide이었으며, AG-1의 경우 galactose, mannose 및 fucose가 79.1:8.9:12.0의 몰비로, AG-5의 경우 glucose, mannose 및 xylose가 45.6:17.9:25.2의 몰비로 존재하였으며, 이들 두 분획은 약한 면역증강활성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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