Lysozymes were isolated and purified from various organs of cultured flounder by using chitin-coated cellulose column chromatography. The molecular weights of them were compared with each other in 15% SDS-PAGE gels. The result showed that all lysozymes isolated from various organs of flounder had the same molecular weight of about 14000. To clarify the role of lysoryme as a body defence, the antibacterial activities of flounder lysozyme on seven bacterial pathogens, five Gram-negative and two Gram-positive species, were investigated. The lysozyme had substancial antibacterial activity on four strains, two Gram-negative and two Gram-positive species. These suggest that flounder lysozyme plays a role in body defence against both Gram-negative and Gram-positive bacterial pathogens.
Biological activities (${\alpha},{\alpha}'$-diphenyl-${\beta}$-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity, fibrinolytic activity and reducing power) and biochemical properties (protein content and electrophoretical protein patterns) were examined in solid state fermentation with Bacillus subtilis and Aspergillus kawachii using silkworm powder (SP) as substrate. The highest protein contents and free radical scavenging activities were seen in the SP fermented for 12 days with B. subtilis and A. kawachii, and these were in a time-dependent manner. The highest reducing power was seen in the SP fermented for 6 days with B. subtilis and for 12 days with A. kawachii, respectively. The highest fibrinolytic activities were seen in silkworm fermented for 6 days with B. subtilis and A. kawachii, but this activity was higher in the A. kawachii fermented SP than that of B. subtilis. When total protein patterns were analyzed by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), the proteins of the SP fermented with B. subtilis for 3 days were completely degraded, while the protein degradation in the SP fermented with A. kawachii occurred after 12 days and this degradation increased proportionally to culture time. As a result, the SP fermented with both B. subtilis and A. kawachii showed higher fibrinolytic activities after 6 days of fermentation and antioxidative activity after 12 days, indicating that physiological activities of the fermented SP using these strains were highly improved compared to the unfermented SP, and that this compound could be a candidate material as a dietary supplement of healthy functional foods.
An antimicrobial peptide producing bacterium, Bacillus subtilis A405, was screened and identified among 700 of antagonistic bacteria. The heat-resistant antimicrobial peptide, AMP-405, was purified from the broth culture of B. subtilis A405 through $20{\sim}40%$ ammonium sulfate precipitation and ultrafiltration. The AMP-405 exhibited strong antimicrobial activities against Botrytis cinerea, Cercospora sp., Fusarium oxysporum, Penicillium digitatum, Celletotrichum gloeosporioides, Rhizoctonia solani, Pythium ultimum, Pyricularia oryzae, Escherichia coli, Pseudomonas spp. and Candida albicans. The molecular weight of the peptide was about 3.0 kDa determined by SDS-PAGE, Native-PAGE and Tris-Tricine gradient electrophoresis, and composed of 9 kinds of amino acid such as aspartic acid, glycine, serine, glutamine, valine, leucine, isoleucine, proline, tyrocine. To determine the efficiency of AMP-405 as a potential maintenance of fruits freshness, cherry tomato was srored at $25^{\circ}C$ for 2 weeks after treatment with $50{\mu}g/ml$ of AMP-405 and $10^{5}$ spores/ml of Botrytis cinerea simultaneously. Treatment with AMP-405 resulted in significantly less infection by Botrytis cinerea, than the treatment with tap water as a control.
Journal of the Korean Society of Clothing and Textiles
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v.35
no.4
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pp.455-465
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2011
This study explores the CSR activities of Korean fashion corporations. A contents analysis of corporate websites was carried out to investigate the structure and function of their websites and the activity dimensions related to the CSR of Korean fashion corporations. The subjects were the Korean top 100 fashion corporations according to total sales in 2009. The findings throughout the research are as follow. First, a total of 46 corporations created the contents about CSR activities on their websites. A total of 32 of them communicated their CSR activities on the main menu at the intro page of the website. Second, the CSR activities of Korean fashion corporate were classified the 3P dimensions, profit (economic responsibilities), planet (environmental responsibility), and people (social responsibility). We found a total of 228 CSR issues for Korean fashion corporations. The issues included in the people dimension were 71.0%, planet issues 16.7%, and profit issues 12.3%. The most significant issue was the economic support responsibility to social organizations included in the people dimension.
Journal of the Korean Institute of Landscape Architecture
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v.45
no.3
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pp.9-20
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2017
Camp Page, which has been located in front of Chuncheon Station for about 50 years since 1958, recently opened to the public. Chuncheon City is currently struggling to construct a park on this site due to an uncertainty of general plans and financial difficulties. Accordingly, this research conducted a cognitive survey about site usage with Camp Page users in order to clarify directions for efficient establishment of parks within the former military base. The course of research includes analytical methods such as a survey targeting Chuncheon citizens and tourists both in the field and online, a frequency analysis of 1,360 index samples, a cross analysis and t-test. As a result, firstly, Chuncheon citizens recognized the image of Chuncheon as a city with a fresh, clean lakeshore whereas tourists think of it as a city for sightseeing and leisure. Hence, it was justifiable to conclude that the city should organize various programs for people to enjoy leisure activities while at the same time protecting the environment. Second, the awareness of tourists about Camp Page was relatively low and both citizens and tourists recognize that it was not sufficient enough for enjoyment of free time. The majority answered "space for culture and art and for experiencing the natural environment" when asked about the direction of space creation at Camp Page, which indicates that the site will need to be available both for cultural art and nature experiences. Lastly, it was thought that the direction of developing leisure facilities in Chuncheon city should include the improvement of worn out installations and developing chain products among programs. This research will be able to use fundamental data for the efficient utilization of the returned U.S. military camps that are constantly merging.
Oligosaccharyltransferase (OTase) catalyzes the transfer of a lipid-linked oligosaccharide (LLO) to the nascent polypeptide. Most eukaryotes have an OTase composed of a multisubunit protein complex. However, the kinetoplastid Leishmania major and the bacterium Campylobacter jejuni have only a single subunit for OTase activity, Stt3p and PglB, respectively. In this study, a new in vitro assay for OTase was developed by using a fluorescent peptide containing N-glycosylation sequon, Asn-Xaa-Thr/Ser, where Xaa can be any amino acid residue except Pro. L. major Stt3p and C. jejuni PglB as a model OTase enzyme demonstrated the formation of glycopeptides from a fluorescent peptide through OTase activities. For separation and measurement of the glycopeptides produced by the OTases, Tricine-SDS-PAGE, a lectin column and fluorospectrophotometer, and HPLC were applied. Comparison of these assay methods for analyzing a fluorescent glycopeptide showed HPLC analysis is the best method for separation of glycopeptides and nonglycosylated peptides as well as for quantify the peptides than other methods.
Protease activities were measured in vegetables used as cooking material or a side dish. Proteases of green pepper (Kwari and Chungyang), perilla leaves, soybean sprout and mungbean sprout were showed high activities. Especially, protease in soybean sprout was the highest activity among them. After dialysis, remaining activities in mungbean sprout, green pepper (Kwari and Chungyang) and perilla leaves were 12, 23, 45% and 37%. In the results of thawing after freezing the proteases, remaining activities in sprout of mungbean and soybean were 100% and 65%. Protease in soybean sprout was showed higher activity and stability than others. Proteolytic effects of soybean sprout on myofibrillar and sarcoplasmic protein were showed higher than stroma protein. In SDS-PAGE, myosin heavy chain, actin and tropomyosin were hydrolyzed with increasing time. Protease activity was rapidly increased with increasing meat concentration in a early proteolysis reaction, but was slightly increased in later.
Martins, Maria Luisa Louro;De Freitas Barbosa, Miguel Pedro;De Varennes E Mendonca, Amarilis Paula Alberti
BMB Reports
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v.35
no.2
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pp.220-227
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2002
Two aspartate aminoransferase (EC 2.6.1.1) isoenzymes (AAT-1 and AAT-2) from Lupinus albus L. cv Estoril were separated, purified, and characterized. The molecular weight, pI value, optimum pH, optimum temperature, and thermodynamic parameters for thermal inactivation of both isoenzymes were obtained. Studies of the kinetic mechanism, and the kinetics of product inhibition and high substrate concentration inhibition, were performed. The effect of some divalent ions and irreversible inhibitors on both AAT isoenzymes was also studied. Native PAGE showed a higher molecular weight for AAT-2 compared with AAT-1. AAT-1 appears to be more anionic than AAT-2, which was suggested by the anion exchange chromatography. SDS-PAGE showed a similar sub-unit molecular weight for both isoenzymes. The optimum pH (between 8,0 and 9.0) and temperature ($60-65^{\circ}C$) were similar for both isoenzymes. In the temperature range of $45-65^{\circ}C$, AAT-2 has higher thermostability than AAT-1. Both isoenzymes showed a high affinity for keto-acid substrates, as well as a higher affinity to aspartate than glutamate. Manganese ions induced an increase in both AAT isoenzymes activities, but no cooperative effect was detected. Among the inhibitors tested, hydroxylamine affected both isoenzymes activity by an irreversible inhibition mechanism.
The uneven distribution of acidic and basic chitinases in different parts of rice seed, and also the characterization of hull-specific chitinases, are reported here. After extraction of chitinases from polished rice, bran, and rice hulls, the chitinases were separated into acidic and basic fractions, according to their behavior on an anion exchanger column. Both fractions from different parts of rice seed showed characteristic activity bands on SDS-PAGE that contained 0.01% glycol chitin. The basic chitinases from rice hulls were further purified using chitin affinity chromatography. The chitinase, specific to rice hulls (RHBC), was 88-fold purified with a 1.3% yield. RHBC has an apparent molecular weight of 22.2 kDa on SDS-PAGE. The optimal pH and temperature were 4.0 and $35^{\circ}C$, respectively. With [$^3H$]chitin as a substrate, RHBC has $V_{max}$ of 13.51 mg/mg protein/hr and $K_m$ of 1.36 mg/ml. This enzyme was an endochitinase devoid of ${\beta}$-1,3-glucanase, lysozyme, and chitosanase activities.
The comparative effects of the fibrinolytic, and tyrosinase inhibition activities and electrophoretical protein patterns with freeze-drying silkworm powder (FDSW), heating-drying silkworm powder (HDSW) and fermented silkworm powder by Bacillus subtilis or Lactobacillus hilgardii were investigated. When total protein patterns of FDSW, HDSW, both fermented SW, were analyzed by native- and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), there were slightly varietal differences in electrophoretical protein patterns. Major minerals of FDSW and HDSW were K, Ca, Mg, and Zn. Major compositional amino acids of FDSW and HDSW were glycine, alanine, glutamic acid, aspartic acid, and serine. Major fatty acids of FDSW and HDSW were linolenic acid, oleic acid, and palmitic acid. Fibriolytic activity was the highest in the fermented FDSW by 5% B. subtilis among the various samples. Tyrosinase inhibition activity was higher in the water and 70% methanolic extract of FDSW than in HDSW. DPPH radical scavenging activity was slightly stronger in HDSW than in FDSW. In addition, DPPH radical scavenging activity was higher in FDSW or HDSW fermented by L. hilgardii than that fermented by B. subtilis, however, all samples exhibited a relatively low activity compared to the butylated hydroxytoluene (BHT). These results may provide the basic data to understand the biological activities of fermented SW.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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