This study was undertaken to know the effect of fat diet (for eight weeks) on changes of inflammatory markers [tumor necrosis factor (TNF-${\alpha}$) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$)] and blood coagulation system [platelet aggregation function (PAF), prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT)] in rats. Serum TNF-${\alpha}$, $PGE_2$, biochemical markers, PAF, PT, aPTT, and body weight were measured and compared between the control (normal diet-rats) and the fat group (fat diet-rats). The weights in the fat group were higher than those of the control group. TNF-${\alpha}$, $PGE_2$, glucose, aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), and creatinine levels were greater in the fat group compared with the control group. The degree of platelet aggregation was lower, whereas PT and aPTT levels were longer in the fat group than in the control group. These findings have shown that fat diet may cause inflammatory response, diabetes, liver and renal dysfunction, and disturbances of fibrinolysis and coagulation system.
Kim, Min Hee;Lee, Jongsung;Jung, Sehyun;Kim, Joo Wan;Shin, Jae-Ho;Lee, Hae-Jeung
Journal of Ginseng Research
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제41권2호
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pp.120-126
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2017
Background: The present study investigated the effect of ginseng berry hot water extract (GBx) on blood flow via the regulation of lipid metabolites and blood coagulation in rats fed a high-fat diet (HFD). Methods: Sixty rats were divided into five groups in descending order of body weight. Except for the control group, the other four groups were fed a HFD containing 45% kcal from fat for 11 wk without GBx. GBx groups were then additionally treated by gastric gavage with GBx dissolved in distilled water at 50 (GBx 50) mg/kg, 100 (GBx 100) mg/kg, or 150 (GBx 150) mg/kg body weight for 6 wk along with the HFD. To investigate the effects of GBx on rats fed a HFD, biochemical metabolite, blood coagulation assay, and histological analysis were performed. Results: In the experiments to measure the serum levels of leptin and apolipoprotein B/A, GBx treatment attenuated the HFD-induced increases in these metabolites (p < 0.05). Adiponectin and apolipoprotein E levels in GBx-treated groups were significantly higher than the HFD group. Prothrombin time and activated partial thromboplastin time were increased in all GBx-treated groups. In the GBx-treated groups, the serum levels of thromboxane $A_2$ and serotonin were decreased and concentrations of serum fibrinogen degradation products were increased (p < 0.05). Moreover, histomorphometric dyslipidemia-related atherosclerotic changes were significantly improved by treatment with GBx. Conclusion: These results suggest the possibility that GBx can ameliorate blood flow by decreasing intima-media thickness via the regulation of blood coagulation factors related to lipid metabolites in rats fed a HFD.
내분비계 장애물질 중 용해도가 커 환경 중에 오염이 될 가능성이 큰 비스페놀-A(BPA)를 정수과정에서 비용 경제적으로 보다 효율적인 제거 방안을 도출하기 위해 표준정수처리과정 중 응집에 의한 BPA와 유기물에 대한 최적의 제거효율을 연구하였다. H강에서 채수한 상수원수에 BPA를 가하고 응집제로서 PAC와 PAHCS를 사용하여 응집제의 주입량, pH 및 교반정도에 따른 제거효율과 활성탄 흡착 응집에 의한 BPA와 유기물의 제거특성 및 그들의 상관관계를 살펴보았다. 그 결과 PAC 8.7 Al mg/L, PAHCS 6.8 Al mg/L의 적정량 주입시 BPA는 모두 20.4%의 최적의 처리효율을 나타내었으며, BPA의 제거특성은 $UV_{254}$, DOC에 비해 더 낮은 제거율을 보였으나, 비슷한 성향을 나타내었다. PAC에 의한 BPA는 pH 6.5, 교반시간 40분에서, PAHCS에서는 pH 7.0과 교반시간 30분에서 최대의 처리효율을 나타내었으며, $UV_{254}$, DOC와 비슷한 결과를 나타내었다. 응집제만 투입하였을 경우와 분말활성탄을 첨가한 경우를 비교한 결과, 탁도와 $KMnO_4$ 소비량은 활성탄 주입량에 관계없이 처리효율이 일정하였고, BPA와 $UV_{254}$, DOC는 주입량 증가시 처리효율이 증가하였고, 특히, BPA는 5 mg/L의 적은 활성탄 주입량으로도 제거율이 크게 증가하였다.
목이버섯으로부터 항혈전활성과 항혈소판응집활성을 지니는 물질을 추출하여 추출물의 혈행개선활성을 조사하였다. 건조 목이버섯을 0.1 N NaOH, methanol, ethanol 등의 용매를 사용하여 추출하여 각 추출물의 항혈전활성을 activated partial thromboplastin time, thrombin time과 prothrombin time 값으로 측정한 결과 methanol 용해성 분획이 각각 100, 124, 54 s로 조사한 분획 중에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 활성 분획을 DEAE-Sepharose CL6B ion exchange column chromatography와 Sephacryl 400-HR gel permeation column chromatography로 정제하였으며 활성물질은 분자량이 150 kDa 이상인 다당류이며 mannose가 주요 구성당으로 되어 있는 xyloglucomannan의 복합다당체인 것으로 확인되었다. 정제된 다당류의 항혈전활성은 thrombin 활성을 저해하기 때문인 것으로 해석되었다.
A novel inhibitory protein against blood coagulation factor Va (FVa) was purified from muscle protein of granulated ark (Tegillarca granosa, order Arcoida, marine bivalvia) by consecutive FPLC method using anion exchange and gel permeation chromatography. In the results of ESI-QTOF tandem mass analysis and database research, it was revealed that the purified T. granosa anticoagulant protein (TGAP) has 7.7 kDa of molecular mass and its partial sequence, HTHLQRAPHPNALGYHGK, has a high identity (64%) with serine/threonine kinase derived from Rhodopirellula baltica (order Planctomycetales, marine bacteria). TGAP could potently prolong thrombin time (TT), corresponding to inhibition of thrombin (FIIa) formation. Specific factor inhibitory assay showed that TGAP inhibits FVa among the major components of prothrombinase complex. In vitro assay for direct-binding affinity using surface plasmon resonance (SPR) spectrometer indicated that TGAP could be directly bound with FVa. In addition, the binding affinity of FVa to FII was decreased by addition of TGAP in dose-dependant manner ($IC_{50}$ value = 77.9 nM). These results illustrated that TGAP might interact with a heavy chain of FVa ($FVa_H$) bound to FII in prothrombin complex. The present study elucidated that non-cytotoxic T. granosa anticoagulant protein (TGAP) bound to FVa can prolong blood coagulation time by inhibiting conversion of FII to FIIa in blood coagulation cascade. In addition, TGAP did not significantly (P < 0.05) show fibrinolytic activity and cytotoxicity on venous endothelial cell line (ECV 304).
The plasmin activity of euglobulin fraction treated with earthworm extract(EWE) increased concentration dependently when EWE(0.5, 1.0 and 2.0 mg each) were added to normal plasma. It was shown that lumbrokinase in EWE may be moved to euglobulin fraction and activated plasminogen. Also anticoagulation and fibbrinolysis were studied when EWE(7.5, 30 and 120 mg/kg) were added to rat model. Prothrombin time (PT) were 19.7${\pm}$ 3.8, 22.5${\pm}$ 2.5 and 24.5${\pm}$ 5.0sec. activated partial thromboplastin time (APTT) were 25.7${\pm}$ 5.9, 28.7${\pm}$ 5.2 and 36.5${\pm}$ 19.1 sec. After 15 days, the production of D-dimer were 242.3${\pm}$ 47.4, 250.0${\pm}$ 11.9 and 205.8${\pm}$ 12.2mg/ml plasma, respectively. These data showed that EWE acted on the coagulation factor of intrinsic and extrinsic system.
Piperlonguminine (PL), an important component of Piper longum fruits, is known to exhibit anti-hyperlipidemic, antiplatelet and anti-melanogenic activities. Here, the anticoagulant activities of PL were examined by monitoring activated-partial-thromboplastin-time (aPTT), prothrombin-time (PT), and the activities of thrombin and activated factor X (FXa). The effects of PL on the expressions of plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1) and tissue-type plasminogen activator (t-PA) were also tested in tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) activated HUVECs. The results showed that PL prolonged aPTT and PT significantly and inhibited the activities of thrombin and FXa. PL inhibited the generation of thrombin and FXa in HUVECs. In accordance with these anticoagulant activities, PL prolonged in vivo bleeding time and inhibited TNF-${\alpha}$ induced PAI-1 production. Furthermore, PAI-1/t-PA ratio was significantly decreased by PL. Collectively, our results suggest that PL possesses antithrombotic activities and that the current study could provide bases for the development of new anticoagulant agents.
흑생강은 생강과 초본과 뿌리식물로 태국 및 라오스에서는 크라차이담으로 불리며, 뿌리는 향신료와 차로 이용되어 왔다. 말린 뿌리는 위장장애, 통풍, 이질, 알러지 치료 및 강장용으로 전통적으로 이용되어 왔으며, 최근에는 항비만, 항산화, 항염증, 혈전 용해 활성 등의 다양한 유용 생리활성이 보고되어 있다. 본 연구에서는 흑생강의 혈액순환 개선 활성을 확인하기 위해, 흑생강 지하부의 ethanol 추출물 및 열수 추출물을 조제하고 각각 이의 순차적 유기용매 분획물인 hexane 분획물, ethylacetate (EA) 분획물, butanol 분획물 및 물 잔류물을 조제하여 각각의 성분을 분석하였고, 혈전 생성과 관련된 항응고 활성, 혈소판 응집저해 활성 및 적혈구 용혈활성을 평가하였다. 그 결과, ethanol 추출물의 EA 분획물 5 mg/ml 농도에서 TT, PT, aPTT를 각각 1.22, 1.49 및 15배 이상 연장시켜 강력한 항응고 활성을 나타냄을 확인하였으며, ethanol 및 열수 추출물의 EA 분획물 모두에서 동량의 아스피린보다 강력한 혈소판 응집저해 활성을 확인하였다. 또한 상기 EA 분획물들은 0.5 mg/ml 농도까지 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 나타내지 않았다. 본 연구 결과는 흑생강의 혈전 생성 억제 활성에 대한 최초의 보고이며, 흑생강의 EA 분획물이 인간 적혈구 용혈활성 없이 강력한 항응고 및 혈소판 응집저해 활성을 나타내어 신규의 항혈전제로 이용 가능함을 제시하고 있다.
This study was designed to investigate the effects of Guizibokryungwhan Herbal-acupuncture on the intravascular coagulation. At first 36 mice were divided normal group(n=6) and experimental group(n=30). Normal group had no treatment and experimental group was induced intravascular coagulation by injected endotoxin 0.5mg/kg into the caudal vein. The experimental group was divided Sample-A(n=12), Sarnple- B(n=12) and control group(n=6). Control group was administrated normal saline. Sample-A was injected Guizibokryungwhan Herbal-acupuncture manufactured by extraction method and Sample-B was injected Guizibokryungwhan Herbal-acupuncture manufactured by water-alcohol method. Then Sample-A and Sample-B was injected high and low concentration. All treatments were done to Kwanwon acupuncture point once a day for 5 days s.c.. The results were following. 1. Compared with the control group, the platelet count was significantly increased in high-concentrated Sample-A and Sample-B group. 2. Compared with the control group, the concentration of fibrinogen was significantly increased in all experimental groups. 3. The prothrombin time was sjgnificantly shortened in high-concentrated Sample-A and Sample-B group as compared with the control group. 4. The activated partial thromboplastin time was significantly shortened in high-concentrated Sample-A group as compared with the control group. 5. The Guizibokryungwhan Herbal-acupuncture has a concentration-dependent effects on the intravascular coagulation.
We evaluated the newly developed plastic sodium citrate tubes for routine coagulation test by direct comparison with glass citrate theophylline adenosine dipyridamole (CTAD) tubes. Blood was drawn from 100 patients into glass CTAD tubes and plastic sodium citrate tubes. After collection, samples were centrifuged at 1500 ${\times}$g for 15 min at $22^{\circ}C$. Prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT), fibrinogen were measured by using the Coagrex-800 (IRC, Japan). We used comparison plot by linear regression model and difference plot graphs to compare the results of the independent measurements of PT, aPTT, fibrinogen between glass CTAD tubes and plastic sodium citrate tubes. On the comparison study between glass CTAD tubes and plastic sodium citrate tubes, the correlation coefficients (R) were 0.99 for PT, 0.97 for aPTT and 0.97 for fibrinogen. This results implicated good correlation of each parameter between two tubes. Although the difference plot graph analysis showed statistically significant differences between glass and plastic tubes for PT, aPTT and fibrinogen, the range of difference was acceptable according to the CLSI/NCCLS guideline. The plastic sodium citrate tubes showed good correlation with the glass CTAD tubes, so it can substitute glass citrate tube for routine coagulation tests.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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