The rapid increase and dissemination of carbapene mases, such as Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC), has become a major problem within the field of healthcare-related infection. There are few antibiotics to treat carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) infections, so the identification of resistant bacterial mechanisms is critical to initiate infection control and conduct epidemiological research. A rapid and effective method for detecting KPC-producing bacteria is needed to avoid therapeutic failures and introduce measures to prevent and control the dissemination of these multi-resistant bacteria. During the study period, 31 isolates (seven isolates of Acinetobacter spp., six isolates of Morganella morganii, five isolates of Pseudomonas aeruginosa, five isolates of Proteus mirabilis, one isolate of Proteus vulgaris, two isolates of Enterobacter cloacae, one isolate of Enterobacter aerogenes, one isolate of Klebsiella pneumoniae, one isolate of Klebsiella oxytoca, one isolate of Serratia marcescens and one isolate of Escherichia coli) were identified by the VITEK. Gram negative rod bacteria were the most frequently isolated from urine (35.5%), blood (19.4%), sputum (16.1%), pus (9.7%), ascitic fluid (9.7%), tracheal aspirates (6.5%) and bile juice (3.2%). Analysis using the PCR method identified the blaKPC gene in the K. oxytoca1 strain, but the blaIMP, blaVIM and blaOXA-48 genes are not amplified. In conclusion, diagnosis using the PCR method can accurately and quickly diagnose KPC, thus establishing quick preventive measures to prevent the spread of KPC in hospitals.
Ji, Gil Young;Song, Hyung Geun;Jo, Mi Young;Hong, Seung Bok;Shin, Kyeong Seob
Biomedical Science Letters
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v.22
no.2
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pp.29-36
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2016
Among the several agents causing carbapenem resistance of Acinetobacter baumannii, the most common cause is OXA-23 ${\beta}$-lactamase, which is known to hydrolyze carbapenem. To effectively control dissemination of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii (CRAB), development of both rapid and easy-to-use detection methods are required. The aim of this study is to develop a novel immunochromatographic assay (ICA) for rapid detection of OXA-23 ${\beta}$-lactamase. Of the seven monoclonal antibodies (mAbs) screened by ELISA, four mAbs (4G6, 4H6, 6G4, 9A4) exhibited high reactivity. Of these four specific antibodies, the combination of 6G4/4G6 showed the greatest reactivity and this combination of mAbs (6G4/4G6 mAbs) was used to develop the OXA-23 ${\beta}$-lactamase ICA. Of 102 A. baumannii isolates tested, the OXA-23 ${\beta}$-lactamase ICA results were consistent with PCR analysis except one false positive and one false negative isolate. The overall sensitivity and specificity were 98.36% and 97.56%, respectively. In conclusion, to the best of our knowledge, we have developed the first specific antibody set to detect OXA-23 ${\beta}$-lactamase using an ICA kit. This novel ICA can be used as a reliable and easy-to-use immunological assay for detection of OXA-23 ${\beta}$-lactamase producing CRAB in clinical laboratories.
Kim, Seong-Hwan;Choi, Ji-Hye;Park, Eun-Jin;Suh, In-Won;Son, Seung-Yeol
Korean Journal of Microbiology
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v.46
no.3
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pp.303-307
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2010
Acinetobacter baumannii 1625, a clinical isolate identified by Vitek and 16S rDNA sequence, showed an extended resistance to most ${\beta}$-lactams including imipenem, kanamycin, gentamicin, tobramycin, and cephalosporins of the third and fourth generations, and produced metallo-${\beta}$-lactamase (MBL) of IMP-1 type which is rare in Korea. The isolate contained a class 1 integron of about 2.5 kb in size and the integron included accA4 (aminoglycoside resistance gene), $bla_{IMP-1}$ (carbapenem resistance gene), and $bla_{OXA-2}$ (extended-spectrum ${\beta}$-lactam resistance gene) gene cassettes in order. The coexistence of IMP-1 type and OXA-2 type ${\beta}$-lactamase gene cassettes in an integron has not been reported in Korea. The transformed integron rendered the E. coli transformant resistant more than eight folds against imipenem, ampicilin, piperacillin, cefazolin, cefoperazone, and aztreonam comparing to the reference strain. This study clearly showed that the extended multi-drug resistance of A. baumannii 1625 was mainly due to the integron.
Aromatic hydrocarbon degrading bacteria were isolated from industrial waste by using an agar plate method. The isolate DY-1 was identified as Acinetobacter sp. and found to utilize phenanthrene as tis sole carbon source. THe bacteria were proved to produce salicylic acid as an intermediate from phenanthrene through naphthalene pathway, when the products in the culture were wxamined by thin-layer chromatography. THe $Phn^+$ genes were found to be involved in two plasmids of about 4 and 40kb which were lost and not detected in the DNA samples prepared from the mitomycin C-cured cells by a gel electrophoretic analysis.
Sulfur-oxidizing, ammonium-oxidizing, and nitrogen-oxidizing media were used to isolate bacteria to degrade malodor gas effectively in piggery manure or soil. Twelve different strains were isolated: Paenibacillus amylolyticus, Rhodococcus jostii, Rhodococcus qingshengii, Rhodococcus opacus, Alcaligenes faecalis, Alcaligenes faecalis, Kastia adipate, Kastia adipata, Microbacterium oxydans, Halomonas campisalis, Acinetobacter oleivorans, and Micrococcus luteus. By inoculating each strain in the piggery liquid manure by 1%, the pH in most strain treatments was maintained at 8.0. Total bacterial counts were maintained at 7.3~7.9 log CFU/ml until 15 days, and then they dropped dramatically down to 5.1~5.5 log CFU/ml. On the 30th day, the treatment group inoculated with Rhodococcus opacus SK2659 showed a relatively high level of ammonium nitrogen removal, which was 39% of that of the control group. When Rhodococcus opacus SK2659 was inoculated, H2S concentration after 100 days was 3.23% compared with the control (no inoculation), suggesting that Rhodococcus opacus SK2659 is an excellent strain for removing malodor gas. The gas production of the treatments was lower than that of the control. The total accumulated amount of gas production in most strain treatments was a quarter of the gas production compared to the control throughout the experimental periods. Acinetobacter oleivorans SK2675 showed the lowest level at 12.39% compared to the control in gas production. In conclusion, the use of mixture strains, such as Rhodococcus opacus SK2659 and Acinetobacter oleivorans SK2675 isolated in this study could increase the efficacy of malodor gas reduction in the biological treatment of piggery manure.
Among 46 Acinetobacter baumannii isolates collected in 2004, two imipenem-resistant isolates were obtained from clinical specimens taken from patients hospitalized in Busan, Republic of Korea. Two carbapenemase-producing isolates were further investigated to determine the mechanism of resistance. These isolates were analyzed by antibiotic susceptibility testing, microbiological tests of carbapenemase activity, determination of pI, transconjugation test, enterobacterial repetitive consensus (ERIC)-PCR, and DNA sequencing. Two cases of infection by A. baumannii producing the IMP-1 ${\beta}$-lactamase were detected. The isolates were characterized by a modified cloverleaf synergy test and EDTA-disk synergy test. Isoelectric focusing of crude bacterial extracts revealed nitrocefin-positive bands with a pI value of 9.0. PCR amplification and characterization of the amplicons by direct sequencing indicated that the isolates carried a $bla_{IMP-l}$ determinant. The isolates were characterized by a multidrug resistance phenotype, including penicillins, extended-spectrum cephalosporins, carbapenems, and aminoglycosides. These results indicate that the observed imipenem resistance of two Korean A. baumannii isolates was due to the spread of an IMP-1-producing clone. Our microbiological test of carbapenemase activity is simple to screen class B metallo-${\beta}$-lactamase-producing clinical isolates to determine their clinical impact and to prevent further spread. This study shows that the $bla_{IMP-l}$ resistance determinant, which is emerging in Korea, may become an emerging therapeutic problem, since clinicians are advised not to use extended-spectrum cephalosporins, imipenem, and aminoglycosides. This observation emphasizes the importance of having effective control measures in Asian hospitals, such as early detection of colonized patients, isolation procedures, and a judicious use of antibiotics.
Biswas, Tethi;Chatterjee, Debasmita;Barman, Sinchini;Chakraborty, Amrita;Halder, Nabanita;Banerjee, Srimoyee;Chaudhuri, Shaon Ray
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.47
no.4
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pp.585-595
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2019
Analysis of bacterial communities based on their 16S rDNA sequences revealed the predominance of Proteobacteria (Aeromonas sp., Acinetobacter sp. and Thaueraamino aromatica sp.) and uncultured bacterium in activated sludge from the effluent treatment plant (ETP) of Mother Dairy, Calcutta (India). Each isolate was used for bioremediation of dairy wastewater with simultaneous conversion of nitrogenous pollutants into ammonia. A consortium developed using seven of these isolates and three Bacillus strains from different environmental origins could reduce 93% nitrate with simultaneous production of ammonia (626 ㎍/100 ml) within 20 h in non-aerated, immobilized conditions as compared to 82% nitrate reduction producing 2.4 ㎍/100 ml ammonia in 96 h with extensive aeration in a conventional ETP. The treated ammonia-rich effluent could be used instead of freshwater and fertilizer during cultivation of mung bean with 1.6-fold increase in grain yield. The ETP with the surrounding agricultural land makes this process a zero liquid discharge technology for using the biofertilizer generated. In addition, the process requires minimal energy supporting sustained environmental health. This method is thus proposed as an alternative approach for small-scale dairy ETPs.
Some bacteria with different mechanisms for hydrocarbon degradation were isolated from oil-contaminated soils in Korea. Isolate Acinetobacter calcoaceticus SL1 showed biosurfactant- producing activity in oil-spreading test, and it exhibited a good emulsifying activity of 43.6 and 54.5% for diesel oil and n-hexane, respectively. It also has high cell surface hydrophobicity which can make it easily attaches to hydrocarbons and degrade them. It degraded 100% of 1,000 mg/L of n-octadecane and naphthalene, respectively in 3 days, 72.3% of 1,000 mg/L diesel oil in 7 days and 78.0% of 10,000 mg/L diesel oil in oil-contaminated soil during 28 days. Isolated strains Bacillus amyloliquefaciens S10 and B. subtilis GO9 can produce biosurfactant and formed 6.34 and 2.5 cm diameter of clear zones, respectively in oil-spreading test. Surface tension of their culture supernatant reduced from 74.6 to 34.4 and 33.3 mN/m, respectively during incubation, and critical micelle concentrations of culture supernatants were 2.0 and 5.9%, respectively. Consortium of A. calcoaceticus SL1 and B. amyloliquefaciens S10 degraded 77.8% of 10,000 mg/L diesel oil in 3 days, which indicated more efficient oil degradation than that by A. calcoaceticus SL1 alone. If these bacteria were applied together as a consortium to oil-contaminated sites, they may show a high removal rate of petroleum hydrocarbons.
Objectives: Semecarpus anacardium Linn. is a plant well-known for its antimicrobial, antidiabetic and anti-arthritic properties in the Ayurvedic and Siddha system of medicine. This has prompted the screening of this plant for antibacterial activity. The main aims of this study were to isolate compounds from the plant's seeds and to evaluate their antibacterial effects on clinical bacterial test strains. Methods: The n-butanolic concentrate of the seed extract was subjected to thin layer chromatography (TLC) and repeated silica gel column chromatography followed by elution with various solvents. The compound was identified based on observed spectral (IR, $^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR and high-resolution mass spectrometry) data. The well diffusion method was employed to evaluate the antibacterial activities of the isolated acyclic isoprenoid compound (final concentration: $5-15{\mu}g/mL$) on four test bacterial strains, namely, Staphylococcus aureus (MTCC 96), Bacillus cereus (MTCC 430), Escherichia coli (MTCC 1689) and Acinetobacter baumannii (MTCC 9829). Results: Extensive spectroscopic studies showed the structure of the isolated compound to be an acyclic isoprenoid ($C_{21}H_{32}O$). Moreover, the isoprenoid showed a remarkable inhibition of bacterial growth at a concentration of $15{\mu}g/mL$ compared to the two other doses tested (5 and $10{\mu}g/mL$) and to tetracycline, a commercially available antibiotic that was used as a reference drug. Conclusion: The isolation of an antimicrobial compound from Semecarpus anacardium seeds validates the use of this plant in the treatment of infections. The isolated compound found to be active in this study could be useful for the development of new antimicrobial drugs.
Kim, Young-Man;Kim, Do-Kyun;Kim, Nam-Hee;Byun, Tae-Hwan;Kim, Ah-Ra;Lee, Eun-Woo;Kwon, Hyun-Ju;Kim, Byung-Woo
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.43
no.1
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pp.33-38
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2010
Emerging of antibiotic resistance of pathogenic bacteria is now a very serious problem in the clinics to treat the diseases, which have been easy to cure by antibiotic treatments before. Unfortunately, antibiotics developed till now are not effective any more against the resistant bacteria. Lots of efforts to discover new antibiotics having novel and unique structures and functions are really urgent and undergoing in the whole world. In this study, we tried to screen and isolate Same unique bacterial strains producing antibacterial substances from the sea water, which is the poor environment for bacteria 10 make their growing. Three bacterial strains among 916 strains isolated showed inhibition clear zone on the marine agar plate growing pathogenic bacteria including Acinetobacter baumannii, Edwardsiella tarda, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella enterica. One of them, which was identified as Bacillus sp. DH-9 from 16S rRNA gene analysis, showed especially considerable antibacterial activity against S. aureus which is notorious for methicillin resistant S. aureus (MRSA). The growth of S. aureus was totally inhibited when the supernatant of Bacillus sp. DH-9 culture was treated on.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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