The effect of phenol on the change of bacterial community in the effluent water from a wastewater treatment plant was analyzed by PCR and terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). The fragments of 16S rDNA were amplified by PCR with bacterial primers, where one of the primers was biotinylated at the 5'-end. After digestion with restriction enzymes, HaeIII and AluI, the biotinylated terminal restriction tragments (T-RFs) of the digested products were selectively isolated by using streptavidin paramagnetic particles. The single-stranded DNA of T-RFs was separated by electrophoresis on a polyacrylamide gel and detected by silver staining technique. When 10 standard strains were analyzed by our method, each strain had a unique T-RF which corresponded to the calculated size from the known sequences of RDP database. The T-RFLP fingerprint generated from the effluent water was very complex, and the predominant T-RFs corresponded to members of the genus Acinetobacter, Bacillus and Pseudomonas. In addition, the perturbation of bacterial community was observed when phenol was added to the sample at the final concentration of 250 $l^{-1}$. The number of T-RFs increased and the major bacterial population could be assigned to the genus Acinetobacter, Comamonas, Cytophaga and Pseudomonas. A intense band assigned to the putative genera of Acinetobacter and Cytophaga was eluted, amplified, and sequenced. The nucleotide sequence of the T-RF showed close relationship with the sequence of Acinetobacter junii.
Shin, Yong Kook;Oh, Nam Su;Lee, Hyun Ah;Nam, Myoung Soo
Journal of Life Science
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v.25
no.2
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pp.174-179
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2015
The presence of psychrotrophic bacteria downgrades the quality of dairy products. This study evaluated the effect of lipolytic psychrotrophic bacteria on the chemical properties of Gouda cheese made from raw milk experimentally inoculated with a psychrotrophic bacterium (Acinetobacter genomospecies 10). Raw milk experimentally inoculated with Acinetobacter genomospecies 10 and refrigerated at $4^{\circ}C$ for 3 or 6 days produced a 6-week ripened Gouda cheese with a significant decrease in total solids (p<0.05) or an increased fat content (p<0.05), respectively. Raw milk inoculated with Acinetobacter genomospecies 10 and refrigerated for 3 days had higher (p<0.05) SCFFA (1.35 times), MCFFA (1.42 times), and LCFFA (1.44 times) than the control 6-week ripened Gouda cheese. The cheese manufactured from the inoculated and refrigerated raw milk had higher (p<0.05) total free fatty acids (1.68 times) compared with the control. Raw milk inoculated with Acinetobacter genomospecies 10 and refrigerated for 6 days had increased SCFFA (1.45 times), MCFFA (1.28 times), and LCFFA (1.38 times) compared with the control 6-weeks ripened Gouda cheese. The 6-week ripened Gouda cheese manufactured from this inoculated milk had higher (p<0.05) total free fatty acids (1.34 times) compared with the control. The results indicated that the production of excessive free fatty acids in dairy products by psychrotrophic bacteria can be critical in predisposing dairy products to off-flavors and in turn degrading their quality.
The purpose of this work was to investigate the characterization and sequence of catechol 1,2-dioxygenase (Cl,2O) purified from Acinetobacter sp. KS-1 which was grown on benzoate as a sole carbon source. Cl,2O demonstrated its enzyme activity to catechol and 4-methylcatechol. The optimum temperature of Cl,2O was $35^{\circ}C$, and the optimal pH was in the range from pH 7.5 to 9.0. $Ag^{+}$, $Hg^{+}$, and $Cu^{2+}$ showed inhibitory effect on the activity of Cl,2O. Molecular weight of the enzyme was determined to approximately 36 kDa by SDS-PAGE and 7-terminal amino acid sequence of Cl,2O was analyzed as $^{1}MNYQQIDALVKQMNVDTAKG^{20}$and exhibited 95% sequence homology with that of Cl,2O from Acinetobacter radioresistens In addition, trypsin digestion and peptide mapping were performed for internal sequencing analysis. Molecular weights of three digested peptide fragments were analyzed as 966.3 Da, 1933.8 Da and 2081.7 Da by MALDI-TOF, which were matched with each internal sequences $^{1}SQSDFNLRR^{9}\, ^{1}HGNRPSHVHYFNSAPGYR^{18}\, ^{1}TIEGPLYVAGAPESVGFAR^{19}$) of. A. radioresistens. PCR product was amplified with the degenerated primers derived from N-terminal and each internal amino acid sequences.
Shin, Yong Kook;Lee, Hyun Ah;Oh, Nam Su;Nam, Myoung Soo
Korean Journal of Agricultural Science
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v.40
no.1
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pp.27-34
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2013
To investigate the distribution of psychrotrophic bacteria, raw milk was collected from farms in nine different regions located around Kyunggi province in South Korea at four different seasons. Psychrotrophic counts were higher in winter than in other seasons as $3.0{\times}10^4$ CFU/mL (p<0.05). Among nine regions, the population in raw milk sampled from B region was in significantly greater numbers and those from C and D province were in significantly lower numbers than any other regions, $2.4{\times}10^5$ CFU/mL and $8.7{\times}10^3$ CFU/mL, respectively (p<0.05). In addition, among 706 bacterial isolates, the predominant class was Gamma-proteobacteria (81.02%) and genus was Pseudomonas (32.34%), especially Pseudomonas fluorescens (39.46%). Compared to the regional predominance, Acinetobacter johnsonii in A region, Pseudomonas fluorescens in B region, Enterobacter amnigenus in C region, Psychrobacter maritimus in D region, Acinetobacter johnsonii in E region, Acinetobacter haemolyticus in F region, Pseudomonas fluorescens in G region, Acinetobacter jounsonii in H region, and Pseudomonas mucidolens in I region were found.
Park, In-Il;Kim, Ick-Keun;Koo, Hyun-Cheol;Han, Jae-Pil;Kim, Young-Mook;Lee, Myung-Goo;Jung, Ki-Suck
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.61
no.1
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pp.13-19
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2006
Background: Acinetobacter baumannii has emerged as an important nosocomial pathogen worldwide. The incidence of these infections has recently begun to increase. The mortality rate associated with these infections is high (bacteremia; 52%, pneumonia: 23%~73%) and multidrug resistance has been reported. For the effective control of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii(MDR-AB), the impact of these organisms in clinical practice should be determined. This study compared the clinical characteristics, mortality and morbidity of Acinetobacter nosocomial pneumonia between MDR strain and non-MDR strain. Methods: From Jan. 1, 2002 to Nov. 1. 2004, 47 adult patients with Acinetobacter nosocomial pneumonia in Chuncheon Sacred Heart Hospital were recruited and analyzed retrospectively. MDR-AB was defined as showing in vitro resistance to all commercially available antibiotics against A. baumannii. Results: There were 47 patients with Acinetobacter nosocomial pneumonia. MDR-AB and non MDR-AB was the cause of the pneumonia in 17 and 30 patients, respectively. Mean age of the former was $69{\pm}11$ years old and the latter was $70{\pm}13$ years old. The mean APCHE II score, ICU days and mortality were not different between the two groups ($16.1{\pm}5.4$ vs. $14.9{\pm}4.8$, P=0.43, $25.1{\pm}13.6$ vs. $39.1{\pm}31.0$, P=0.2, 58.8% vs. 40%, P=0.21). Conclusion: There are no significant differences in mortality and morbidity between MDR and non-MDR Acinetobacter baumannii. The mortality of the two groups is surprisingly high, therefore proper infection control practices are essential.
Two kinds of crude oil-degrading microorganisms from soil and one kind from sea were isolated and named strain Al32, strain F722 and strain OM1, respectively. These microorganism were identified Acinetobacter sp., Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter calcoaceticus, respectively. The optimum cultivation temperature of Acinetobacter sp. A132 and P. aeruginosa F722 was $35^{\circ}C$ and optimum growth pH was 8 and 9, respectively. The growth was the highest at 2.0% (w/v) substrate concentration when crude oil was only carbon source. The growth of A. calcoaceticus OM1 isolated from sea was the highest at 3.0% (w/v) of crude oil. In inspection of crude oil degradability, strain Al32 showed 5.49 g/L.day with Eleuthera (OMAN), 2.0% (w/v). P. aeruginosa F722 showed 1.19 g/L g/L.day with L-Zakum (AFRICA). In case of kerosene $nC_9\simnC_{20}$ and diesel $nC_9\simnC_{28}$, A. calcoaceticus OM1 was degraded 95% and 75%, respectively, for 7 days culture, and P. aeruginosa F722 was 80% after 10 days.
To remove phosphate accumulated in the soil and water, Acinetobacter lwoffi PO8 possessing a high ability to accumulate phosphate was isolated from a active sludge. Bacterium was cultured in the liquid medium containing $150\;{\mu}g/mL$ of phosphate at $30^{\circ}C$ in different culture conditions to examine intracellular phosphate uptake. The initial pH in the range of $7.5{\sim}8.5$ was effective on the growth and phosphate uptake of the strain. Glycerol and arabinose used as a carbon sources showed 93 and 91% the phsphate uptake, respectively. Among the nitrogen sources, ammonium salt such as $NH_4NO_3$ and $(NH_4)_2SO_4$ was effectively utilized on the phosphate uptake compared with amino compounds. The rate of phosphate uptake of $NH_4NO_3$, and $(NH_4)_2SO_4$, was 95 and 96%, respectively The growth and Phosphate uptake ability in the strain were significantly promoted when metal ions were added in the medium; $Co^{2+}$, however, was not utilized by the strain. The capacity of phosphate uptake was enhanced to $10{\sim}20%$ when arginine, methionine, or lysine was added. Using $^{32}P$ to examine the uptake Pattern of intracellular phosphate, experiment result showed that polyphosphate was largely found in the fraction of intracellular inorganic phosphate of Acinetobacter lwoffi PO8.
The Actinomycete strain KH29 is antagonistic to the multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Based on the diaminopimelic acid (DAP) type, and the morphological and physiological characteristics observed through the use of scanning electron microscopy (SEM), KH29 was confirmed as belonging to the genus Streptomyces. By way of its noted 16S rDNA nucleotide sequences, KH29 was found to have a relationship with Streptomyces cinnamonensis. The production of an antibiotic from this strain was found to be most favorable when cultured with glucose, polypeptone, and yeast extract (PY) medium for 6 days at $27^{\circ}C$. The antibiotic produced was identified, through comparisons with reported spectral data including MS and NMR as a cyclo(L-tryptophanyl-L-tryptophanyl). Cyclo(L-Trp-L-Trp), from the PY cultures of KH29, was seen to be highly effective against 41 of 49 multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Furthermore, cyclo(L-Trp-L-Trp) had antimicrobial activity against Bacillus subtilis, Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus niger, and Candida albicans, However, it was ineffective against Streptomyces murinus.
To better understand the ecology of tetrade forming organisms (TFOs) floating in a large amount of dairy wastewater treatment plant (WWTP) effluent (sequencing batch reactor [SBR]) during the inefficient phosphorus (P) removal process of an enhanced biological P removal system, the TFOs from the effluent of a full scale WWTP were separated and attempts made to culture the TFOs in presence/absence of oxygen. The intact TFOs only grew aerobically in the form of unicellular short-rods. Furthermore, to identify the intact TFOs and unicellular short-rods the DNAs of both were extracted, analyzed using their denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE)-profiles and then sequenced. The TFOs and unicellular short-rods exhibited the same banding pattern in their DGGE-profiles, and those sequencing data resulted in their identification as Acinetobacter sp. The intact TFOs appeared in clumps and packages of tetrade cells, and were identified as Acinetobacter sp., which are known as strict aerobes and efficient P-removers. The thick layer of extracellular polymeric substance surrounding Acinetobacter sp. may inhibit phosphate uptake, and the cell morphology of TFOs might subsequently be connected with their survival strategy under the anaerobic regime of the SBR system.
Han, Sang Hoon;Na, Dong Jib;Yoo, Young Wook;Kim, Dong Gyu;Moon, You Ri;Moon, Kyoung Min;Lee, Yang Deok;Cho, Yong Seon;Han, Min Soo;Yoon, Hee Jung
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.63
no.3
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pp.273-277
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2007
70세 남자가 내원 7일전 발생한 우측 흉부 통증, 고열 및 가래를 동반한 기침으로 입원하였다. 백혈구와 CRP(C reactive protein)의 상승, 흉부 방사선 소견상 우하엽에 폐렴을 시사하는 소견이 관찰되어 지역 사회 획득성 폐렴에 준한 경험적 항생제를 투여하였다. 처음 두 번의 연속적인 가래 배양 검사에서 항생제 감수성이 있는 Acinetobacter baumannii균이 동정 되었으며 항생제 치료 후 임상 증상 및 방사선 소견이 점차 호전되었다. Acinetobacter baumannii는 중환자실에서 주로 발생하는 병원 획득성 폐렴의 주요 균으로 알려져 있으며 지역 사회 획득성 폐렴의 흔한 원인균은 아니다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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