Viroids are about 250-400 base pair of short single strand RNA fragments have been associated with economically important plant diseases. Due to the lack of protein expression capacity associated with replication, it is very difficult to diagnosis viroid diseases in serological methods. For detecting viroid at plants, molecular-based techniques such as agarose gel electrophoresis, polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), DNA-hybridization, blotting analysis and conventional RT-PCR are reliable. Real-time RT-PCR methods that grafted on RT-PCR methods with improved confirmation methods have been also utilized. However, they are still labor-intensive, time-consuming, and require personnel with expertise. Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP) method is a nucleic acid amplification method under the isothermal condition. The LAMP methodology has been reported to be simple, rapid, sensitive and field applicable in detecting a variety of pathogens. The results of LAMP method can be colorized by adding a visible material such as SYBR green I, Evagreen, Calcein, Berberine and Hydroxy naphthol blue (HNB) with simple equipment or naked eyes. The combination of LAMP method and nucleic pathogens, viroids, can be used to realize simple diagnosis platform for the genetic point-of care testing system. The aim at this review is to summary viroid-caused diseases and the simple visible approach for diagnosing viroids using Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP) method.
Park, Man Ki;Park, Jeong Hill;Kim, Bao-Yuan;Kim, Jong Moon;Liem, Kyung-Jin;Han, Byung Hoon
Analytical Science and Technology
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v.6
no.3
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pp.255-259
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1993
${\beta}$-Carboline alkaloids of Polygala tenuifolia (Polygalaceae), an expectorant, tonic and sedative drude drug, were determined by HPLC. The alkaloids were separated by RP-18 column with gradient elution of 0.01M potassium phosphate buffer(pH=3.5) and acetonitrile and detected at UV 254nm. Two methods for the preparation of alkaloid fraction were compared. One was solvent extraction method using acid and base, and the other was solid phase extraction with ion exchange resin (Amberlyst 15). A more refined HPLC chromatogram was obtained using the solid phase extraction method. The alkaloidal contents in P. tenuifolia determined by this method were : harman $2.8{\times}10^{-3}%$, norharman $1.7{\times}10^{-3}%$, 1-carbomethoxy-${\beta}$-carboline $1.3{\times}10^{-3}%$, 1-carboethoxy-${\beta}$-carboline $1.4{\times}10^{-3}%$ and perlolyrine $3.3{\times}10^{-3}%$, respectively.
Basic leucine zipper (bZIP) protein is a regulatory transcription factor that plays crucial roles in growth, development and stress response of plant. In this study, we isolated a PagbZIP1 gene that belonged to Group SE3 of bZIP from Populus alba ${\times}$ P. glandulosa, and investigated its expressional characteristics. The PagbZIP1 is 844 base pairs long and encodes a putative 144-amino-acid protein with an expected molecular mass of 16.6 kDa. The PagbZIP1 has two conserved domains including the basic and leucine zipper portions. Southern blot analysis revealed that two copies of the gene are presented in the poplar genome. PagbZIP1 was specifically expressed in the root and suspension cells. Moreover, the expression of PagbZIP1 was induced by drought, salt, cold and ABA. Therefore, our results indicated that PagbZIP1 might be expressed in response to abiotic stress through the ABA-mediated signaling pathway in poplar.
The CryIIA gene encoding the insecticidal crystal protein of Bacillus thuringiens!s subsp. kurstalri HD-l has been cloned in Escherichia col!, and its nucleotide sequences were determined completely. 5kb Hindlli fragment harboring CryIIA gene was screened in the large ca. 225kb plasmid DNA by southern blot. HindlIT digested 5kb fragment was ligated into pUC19 and transformed in E. coli. The 4kb BamHI-HindlIT fragment containing the CryIIA gene was subcloned and named pSKIIA. DNA sequence analysis demonstrates that pSKIIA is the gene of an operon which is comprised of Lhree open reading frames (designated orn, orf2 and or£3). The CrylIA gene is composed of 3,952bp-long BamHI-Hindill DNA restriction fragment. The orf3 code for a polypeptide of 633 amino acid residues. The protoxin protein has a predicted molecular weight of 70,780. The E. coli derived protoxin gene product is biologICally active against three species of Lepidopteran (Plu.lelia maculipennis, He/iolhis assulta, Spodoptera litura) and a species of Dip Leran( Culex pipines) larvae in bioassay.
Ion-exchange porous glasses were prepared by heat treatment and subsequently hydro thermalor acid leaching treatment $10Li_2O$.$(90-x)B_2O_3$.$xSiO_2$ base glasses containing various amount of $Al_2O_3$ or $MoO_3$. It was investigated how the phase separation and the cation exchange capacity(CEC) were affected by the addition of $Al_2O_3$ or $MoO_3$. The optimum condition of phase separation in these glasses was about 48$0^{\circ}C$ for 10 hrs. The degree of phase separation was rapidly suppressed by the addition of $Al_2O_3$ up to 10 mol% and thereafter suppression effect was decreased. The maximum value of CEC, about 252meq/100g, was observed with the $1OLi_2O$.$45B_2O_3$.$45SiO_2+7.5Al_2O_3$ porous glass prepared by hydrothermal treatment and its mean pore radius was about 16.3A. The addition of $MoO_3$ accelerated phase separation and leaching rate. Looking at the remakable increment of pore diameter and pore volume of these porous glasses by the addition of $MoO_3$, the effect of $MoO_3$ may be ascribed to the lowering of silica concentration in the borate phase and to the forming of water-soluble complex with silica during the leaching treatment.
The Haman mineralized area is located within the Cretaceous Gyeongsang Basin along the southeastern part of the Korean peninsula. Almost all occurrences in the Haman area are representative of copper-bearing polymetallic hydrothermal vein-type mineralization. Within the area are a number of fissure-filling hydrothermal veins which contain tourmaline, quartz and carbonates with Fe-oxide, base-metal sulfide and sulfosalt minerals. The Gunbuk, Jeilgunbuk and Haman mines are each located on such veins. The ore and gangue mineral paragenesis can be divided into three distinct stages: Stage I, tourmaline + quartz + Fe-Cu ore mineralization; Stage II, quartz + sulfides + sulfosalts + carbonates; Stage III, barren calcite. Equilibrium thermodynamic data combined with mineral paragenesis indicate that copper minerals precipitated mainly within a temperature range of $350^{\circ}C$ to $250^{\circ}C$. During early mineralization at $350^{\circ}C$, significant amounts of copper ($10^3$ to $10^2\;ppm$) could be dissolved in weakly acid NaCl solutions. For late mineralization at $250^{\circ}C$, about $10^0$ to $10^{-1}\;ppm$ copper could be dissolved. Equilibrium thermodynamic interpretation indicates that the copper in the Haman-Gunbuk systems could have been transported as a chloride complex and the copper precipitation occurred as a result of cooling accompanied by changes in the geochemical environments ($fs_2$, $fo_2$, pH, etc.) resulting in decrease of solubility of copper chloride complexes.
The AMY2B gene, encoding human pancreatic ${\alpha}$-amylase isozyme (HPA II), was expressed in Pichia pastoris, and the effects of chloride ions on HPA II activity toward starch substrates were investigated. As seen with chloride ion-dependent ${\alpha}$-amylases-including HPA I, the isozyme of HPA II-chloride ions increased enzyme activity and shifted the optimal pH to an alkaline pH. The activity enhancement by chloride was more significant at pH 8 than that at pH 6, suggesting that the protonation state of the general acid/base catalyst of HPA II was important for the hydrolysis of starches at an alkaline pH because of the increase in its $pK_a$ by chloride ions. The turnover values for cereal starches as the substrates markedly increased in the presence of chloride by up to 7.2-fold, whereas that for soluble starch increased by only 1.7-fold. Chloride inhibited substrate hydrolysis at high substrate concentrations, with $K_i$ values ranging from 6 to 15 mg/mL.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.19
no.8
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pp.176-182
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2018
One of the most important factor of esthetic prosthesis is the color of the teeth. Zirconia is produced in the process of design, milling, coloring, drying, and sintering. The effect of the drying degree of zirconia colorant on the color tone is examined. For the experiment, a total of 45 zirconia specimens(15 for each) were fabricated by using cad/cam system. The zirconia specimens(L block(LAZOR), Z block(Zircos-E block posterior), A block(AlphaZ)) were then subjected to zirconia sintering in accordance with the manufacturer's instructions, using a chemical coloring agent to Non-drying(0sec), intermediate (10sec), and completely dried (10min) temperature holding times. The color tone was measured using a spectrophotometer. The results were analyzed with a One-way analysis of variance and the Tukey post-hoc test (${\alpha}=.05$) The $L^*$ values of L, A specimens, $a^*$ values of A specimens, and $b^*$ values of Z specimens were not statistically different according to the degree of drying (p>0.05), While the $L^*$ value of Z specimen, $a^*$ value of L, Z specimen, $b^*$ values of L, A specimens were statistically different according to the degree of drying(p <0.05). In conclusion, the drying of zirconia colourants improves zirconia brightness and increases the optical properties of the enamel.
Kim, Ki-Chan;Lee, Seung-Don;Han, Ju-Hee;Sohng, Jae-Kyung;Liou, Kwang-Kyoung
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.11a
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pp.749-754
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2000
PCR primers were designed based on consensus sequences of dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase, one of the enzymes involved in the biosynthesis of deoxysugar. The PCR product (360 bp) was obtained from Thermus caldophilus GK24. Colony hybridization was carried out to the cosmid library constructed from T. caldophilus GK24 genomic DNA by the PCR product DNA fragment. We isolated a cosmid clone (pSMTC-1) that was subcloned to call pKCB series plasmid (BamHI fragments), partially sequenced and analyzed. pKCB80 (4.2 kb-BamHI DNA fragment) of them showed ORFs that was orfA, orfB, orfC and orfD. The orfABCD gene cluster is the deosysugar biosynthetic gene ; orfA (glucose-1-phosphate thymidylytransferase), orfB (dTDP-D-glucose 4,6-dehydratase), orfC (dTDP-4-keto-L-rhamnose reductase) and orfD (dTDP-4-keto-6-deoxy-D-glucose 3,5-epimerase). The gene cluster that was related in biosynthesis of dTDP-L-rhamnose was also identified by computer analysis, and we proposed that the biosynthetic pathway of deoxysugar analyzed from DNA sequencing of pKCB80 is from D-glucose-1-phosphate, dTDP-D-glucose, dTDP-4-keto-6-deoxy-D-glucose via dTDP-4-keto-L-rhamnose to dTDP-L-rhamnose.
Jo, JaeMin;Kim, SeungKi;Min, Bora;Jung, HyunJin;Han, Yeojung;Kim, JinWoo
Korean Chemical Engineering Research
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v.55
no.3
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pp.358-362
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2017
In this study, the optimization of extraction parameters (solvent, temperature, time, solvent concentration) for the maximization of polyphenol extraction was performed to produce value-added food and cosmetic additives using a byproduct of coffee extraction process (coffee residue). All of the extraction parameters evaluated in this experiment had significant effects on polyphenol extraction and the results showed the effect of NaOH concentration on the polyphenol production was most significant among tested parameters. Especially, hot water extraction using acid or base was effective rather than hot-water extraction and the addition of 0.1 mol of NaOH increased 1.5 times extraction concentration compared with hot-water extraction using distilled water. It was found that hot-water extraction with NaOH was more effective than hot-water extraction, and 36.5 mg GAE/g DM was obtained under optimum condition of $100^{\circ}C$, 2 mol of NaOH and 30 min. This result was 2.9 times higher than that of 12.5 mg GAE/g DM obtained from the hot-water extraction before optimization. Thus, coffee residue could be used for food and cosmetic industry as a high-value additive such as antioxidant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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