본 연구에서는 이미 항산화 효과로 알려져 있는 대두와 약성이 탁월한 약콩에서 AChE 활성 억제효과와 Free radical scavenger 효과를 노화로 인한 질병 예방효과에 대한 기초자료를 제공하고자 수행하였다. 1. 대두 열탕 추출물의 경우 저농도인 1, 0.1 mg/$m\ell$에서는AChE의 활성 억제 효과가 메탄을 추출물보다 높았다. (P<0.001) 2. 대두, 약콩 메탄올 추출물에서는 고농도인 5 mg/$m\ell$에서 각 시료의 효과가 62.0$\pm$2.43%, 65.0$\pm$3.29%로 비슷했으나 저농도인 0.1 mg/$m\ell$에서는 약콩의 경우 25.5$\pm$0.94%로 약콩이 대두에 비해 유의적인 AChE 억제효과를 나타냈다. (p<0.001) 3. 시간에 따른 Free radical scavenger효과는 비타민 C의 경우 시간에 따라 비슷한 효과를 보였으나 대두와 약콩은 incubating 시간에 따라 free radical 억제효과가 증가해 높은 항산화 효과를 볼 수 있었다. 4. 대두, 약콩 메탄올 추출물에서는 약콩이 고농도인 5mg/$m\ell$에서 약4배 정도의 효과를 보였으며 Free radical scavenger의 50%효과를 나타내는 $IC_{50}$/에서는 약 10배 정도로 높은 Free radical scavenger 효과를 나타내 약콩이 대두에 비해 유의적으로 높은 효과를 나타내었다. 결론적으로, 대두와 약콩의 추출물은 AChE 활성억제효과에 있어서 좋은 효과를 나타내며 또한 노화의 원인과 질병의 원인이 되는 free radical을 억제하는 효과를 가지고 있어 노인성 치매를 비롯하여 파킨슨씨병, 뇌허혈 및 뇌졸중과 같은 각종 노인성 질환예방에 도움이 될 것으로 보인다.
어미쥐에 있어서 임신기와 수유 기간동안의 저단백 식이와 단백질 회복이 새끼쥐의 성장과 발달 즉, 세포 크기와 세포수, 뇌의 지질 함량과 신경 전달 물질에 미치는 영향을 검토하기 위하여 임신 2주째부터 정상식이(20% casein diet)와 저단백식이(11.7% casein diet)를 급여한 어미쥐에 의해 사육된 새끼쥐를 비교하였는데 그 결과는 다음과 같다. 1) 각군을 생후 21일째 희생시켰을때 체중 및 각 기관의 무게는 저단백식이군이 정상군에 비하여 유의하게 낮았으며(p<0.01), 임신기의 저단백식이군을 수유기에 정상식이를 급여하였을때 정상군 수준으로 회복되었다. 한편 체중에 대한 각 장기의 무게비를 나타내었을 때는 저단백식이군이 정상군에 비하여 높은 경향을 나타내었다. 2) 간의 DNA, RNA 함량 및 단백질 함량은 임신, 수유기의 저단백식이군이 정상군에 비하여 유의하게 낮았다(p<0.01). 한편, 임신기의 식이부족군(L-L군, L-L군)의 간의 체중에 대한 무게비가 임신기의 정상식이군(C-C군, C-L군)에 비해 증가하였으며 liver weight/DNA는 R-R군이 높았으며(p<0.01), C-C군, C-L군, L-C군은 비슷한 경향을 보였다. 3) 근육의 DNA, RNA 함량 역시 임신, 수유기의 저단백식이군이 정상군에 비하여 유의하게 낮았다(p<0.01). 한편 뇌의 체중에 대한 무게비와 brain weight/DNA는 저단백식이군이 정상군에 비하여 증가하였다. 5) 뇌의 총지질 함량은 정상 식이군보다 저단백 식이군이 낮았으며(p<0.01) 수유기 저단백식이에 의한 영향이 컸다. 한편 뇌의 콜레스테롤 함량은 임신기의 저단백식이군이 낮은 경향을 보였다(p<0.01). 한편 뇌의 acetylcholinesterase activity는 암컷의 경우에는 임신기 또는 수유기 또는 임신기와 수유기의 저단백식이에 의하여 영향을 받아 정상식이군(C-C군)에 비하여 낮았다(p<0.01). 본 실험의 결과는 어미쥐에 있어 임신, 수유기의 저단백식이는 새끼쥐의 성장 발달 즉 세포의 수, 세포크기, 단백질 함량, 뇌의 지질 함량 및 acetylcholinesterase activity에 영향을 미침을 나타낸다.
이산화염소는 병원미생물에 대한 소독제로 사용되고 있다. 최근 저곡해충에 대한 이산화염소의 산화적 스트레스에 의한 살충력이 확인되었다. 그러나 이산화염소의 산화적 스트레스에 의한 대상 곤충의 체내 분자 종말점에 대해서는 알려지지 않았다. 본 연구는 화랑곡나방(Plodia interpunctella)의 아세틸콜린에스터레이즈가 이산화염소의 분자표적으로 가정하고 노출에 따른 이 효소의 활성을 분석하였다. 아세틸콜린에스터레이즈 활성은 화랑곡나방 발육 시기에 따라 상이했다. 화랑곡나방 5령 유충에서 치사를 일으킬 수 있는 이산화염소 농도 처리는 아세틸콜린에스터레이즈 활성을 뚜렷하게 증가시켰다. 또한 훈증제 형태의 이산화염소 처리에서도 아세틸콜린에스터레이즈 활성 증가가 유발되었다. 화랑곡 나방 5령 유충은 음성주광성을 보이는 데, 이산화염소 처리는 이 선천성 행동을 교란하였다. 이러한 결과는 아세틸콜린에스터레이즈가 이산화염소 처리에 따른 산화적 스트레스의 분자표적 가운데 하나라는 것을 제시하고 있다.
원지의 뿌리는 기억력을 향상시키는 동양의 전통 약재로 널리 알려져 있다. 그러나 그 작용기전은 아직까지 해명되지 않았다. 본 연구에서는 항산화 효과 뿐만 아니라 신경 세포 에서 파생된 PC12 세포의 acetylcholinesterase(AchE) 활성과 연관된 인지능에 대한 원지열수추출물(PRHWE)의 효과를 in vitro 및 살아 있는 세포에서 조사하였다. 먼저 MTT assay을 이용한 세포생존에 대한 연구에서 PRHWE는 0.1% 이하의 농도에서 세포독성이 없는 것으로 나타났다. PRHWE는 DPPH radical, hydrogen peroxide 및 superoxide의 소거활성과 환원력이 농도에 비례하여 증가시킨다는 것이 관찰되었다. 특히 PRHWE는 hydroxyl radical에 의하여 유발되는 DNA의 산화에 대한 보호효과를 나타내었다. 부가적으로 그것은 신경성세포에서 nitric oxide의 생성을 억제하였다. 더욱이 AchE 활성은 PRHWE의 농도에 비례하여 감소하였다. 뿐만 아니라, PRHWE는 PC12 세포에서 SOD-1과 NOS-2 발현수준을 증가 시킨다는 것이 발견되었다. 더욱이 reporter gene assay를 이용한 실험에서 p53과 NF-${\kappa}B$의 전사활성이 PRHWE의 존재 하에서 감소했다. 그러므로 이러한 결과들은 PRHWE가 신경성세포에서 항산화 활성 및 신경 세포 보호 효과가 있다는 것을 증명하였고, 이는 PRHWE가 사람의 건강을 위한 치료제로 큰 잠재성을 가지고 있다는 것을 시사한다.
Nguyen Hong Nga;Hwang Dae Youn;Kim Young Kyu;Yoon Do Young;Kim Jae Hwa;Lee Moon Soon;Lee Myung Koo;Yun Yeo Pyo;Oh Ki Wan;Hong Jin Tae
Archives of Pharmacal Research
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제28권9호
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pp.1073-1078
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2005
A presenilin 2 mutation is believed to be involved in the development of Alzheimer's disease. In addition, transgenic mice with a presenilin 2 mutation have been reported to have learning and memory impairments. In this study, exposing PC12 cells expressing mutant presenilin 2 to $50{\mu}M\;A{\beta}_{25-35},\;30mM$ L-glutamate and $50{\mu}M\;H_2O_2$ caused a significant increase in acetylcholine esterase activity. An in vivo study revealed high levels of this enzyme activity in the mutant presenilin 2 transgenic brains compared with the wild type presenilin 2 transgenic and non-transgenic samples. These results suggest that a mutant presenilin 2-induced neurodegeneration in Alzheimer's disease might be involved in the increase in acetylcholinesterase activity. These findings might help in the development of an appropriate therapeutic intervention targeting mutant presenilin 2-induced Alzheimer's disease.
Objectives: Boswellic acid (BA), a compound isolated from the gum-resin of Boswellia carterii, is a pentacyclic terpenoid that is active against many inflammatory diseases, including cancer, arthritis, chronic colitis, ulcerative colitis, Crohn's disease, and memory impairment, but the mechanism is poorly understood. This study investigated the effects of boswellic acid on spatial learning and memory impairment induced by trimethyltin (TMT) in Wistar rats. Methods: Forty male Wistar rats were randomly divided into 5 groups: Normal group, TMT-administrated rats (8.0 mg/kg, Intraperitoneally, i.p.) and TMT + BA (40, 80 and 160 mg/kg, i.p.)-administrated rats. BA was used daily for 21 days. To evaluate the cognitive improving of BA, we performed the Morris water maze test. Moreover, to investigate the neuroprotective effect of BA, we determined the acetylcholinesterase (AchE) activity, the malondialdehyde (MDA) level as a marker of lipid peroxidation, and the glutathione (GSH) content in the cerebral cortex. Results: Treatment with TMT impaired learning and memory, and treatment with BA at a dose of 160 mg/kg produced a significant improvement in learning and memory abilities in the water maze tasks. Consistent with behavioral data, the activity of AChE was significantly increased in the TMT-injected rats compared to the control group (P < 0.01) whereas all groups treated with BA presented a more significant inhibitory effect against AChE than the TMT-injected animals. In addition, TMT reduced the GSH content and increased the MDA level in the cerebral cortex as compared to the control group) P < 0.01). On the other hand, treatment with BA at 160 mg/kg slightly increased the GSH content and reduced the MDA level in comparison to the TMT-administered group (P < 0.01). Conclusion: The above results suggest that the effect of BA in improving the cognitive function may be mediated through its antioxidant activity.
Objectives The aim of this study was to investigate the effects of Cannabis Fructus on exercise capacity and cognitive function in chronic hypoperfusion induced vascular dementia rat model. Methods Vascular dementia rat models were induced by chronic cerebral hypoperfusion through bilateral common carotid arteries occlusion (BCCAO). All rats were randomly divided into 4 groups: normal group; control group; CF I group (feeding Cannabis Fructus 100 mg/kg); CF II group (feeding Cannabis Fructus 300 mg/kg). In order to study the effects of oral administration of Cannabis Fructus on vascular dementia rat models, corner turn test, hole board test, radial arm maze test, passive avoidance test were taken and Acetylcholine (ACh) activity, Acetylcholinesterase (AChE) activity, serum of Vascular endothelial growth factor (VEGF) protein level were measured. Also histological findings of the liver, kidney, brain and the change of Tau immunoreactive neurons in hippocampus were observed. Results CF I and CF II showed significant improvement in corner turn test, hole board test, radial arm maze test, passive avoidance test, Acetylcholine (ACh) activity, Acetylcholinesterase (AChE) activity, the serum of Vascular endothelial growth factor (VEGF) protein level and the change of Tau immunoreactive neurons in hippocampus. CF I showed more significant effect than CF II in these tests. However in histological observations of the liver and kidney both CF I and CF II showed glomerular injury and hepatotoxicity. Conclusions These results suggest that Cannabis Fructus was helpful in improving exercise capacity and cognitive function on Chronic hypoperfusion induced Vascular Dementia rats. However Cannabis Fructus affects the liver and kidney, therefore suggest that this is an area for further study.
백삼과 홍삼추출물 투여가 scopolamine으로 기억을 손상시킨 실험동물의 학습수행 개선과 뇌조직의 AChE 억제 및 ACh 함량을 평가하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 백삼과 홍삼추출물(200 mg/kg, p.o.) 투여는 scopolamine (2 mg/kg, i.p.)으로 유발된 기억손상 동물모델의 Morris water maze 시험에서 tacrine 투여군과 대조군처럼 인지훈련이 반복될수록 escape latency 시간이 현저히 감소하였다. probe test에서도 scopolamine 투여군보다 유의적으로 감소하여 인삼추출물이 장기기억(Long-term memory)과 working memory의 개선에 효과가 있음을 확인하였다. 2. Y-maze test를 통한 실험동물의 자발적 변동행동력은 실험군간 차이가 없었으며, 총 출입회수도 차이가 없어 인삼추출물은 실험동물의 일반적 운동성에 영향을 주지 않았다. 3. 해마조직의 AChE 활성은 인삼추출물 군에서 감소하는 경향을 보였으나 유의적 차이는 없었다. 대뇌피질과 혈청 AChE 활성은 홍삼추출물 투여군에서 유의적으로 감소하였다. 4. 인삼추출물 투여군의 뇌조직 ACh 함량은 대뇌피질과 해마조직에서 scopolamine 투여군보다 증가하는 경향을 보였으나 그룹간의 유의적인 차이는 없었다. 5. 이를 통하여 볼 때 인삼추출물 특히 홍삼추출물은 장기기억 활성촉진, AChE 억제, ACh 활성촉진으로 콜린성 신경계를 자극하여 기억 및 학습증진에 매우 효과적으로 작용하는 항치매 물질로 사료된다.
흑삼의 속성제조와 ginsenoside $Rg_3$ 함량을 극대화하고자 흑삼 제조시 포도주스에 24시간 침지한 후 $120^{\circ}C$에서 30분간 3회 반복 증숙하여 흑삼을 제조한 후 HPLC 방법을 이용하여 ginsenosides를 분석하였다. 포도주스에 침지하여 제조한 흑삼의 ginsenoside $Rg_3$ 함량은 10.91 mg/g으로 구증구포 방법으로 제조한 흑삼보다 약 2배 가량 함량이 증가되었다. 총 사포닌 함량은 14.97 mg/g으로 전통적인 구증구포 방식으로 제조한 흑삼 (12.79 mg)보다 그 함량이 높았다. 흑삼의 단회투여 (200 mg/kg, p.o.)에 의한 뇌조직 AChE 활성은 투여 24시간 후에 유의적으로 억제되는 효과를 보여주었다. 따라서 본 연구에 적용한 새로운 제조방법은 ginsenoside $Rg_3$를 강화하는 흑삼의 속성제조에 효과적인 방법으로 판단된다. 또한, AChE 활성억제를 통해 흑삼이 뇌기능 개선에 대한 잠재적인 효능을 가지고 있는 것으로 사료된다.
피라졸 계통의 유기인계 살충제인 flupyrazofos(O,O-diethyl O-1-phenyl-3-trifluoromethylpyrazo-5-yl phosphorothioate)의 합성공정에서 생산된 원제 1(95.4%), 원제 2(97.6%) 그리고 정제품(99.2%)에 대한 불순물 조성과 함량을 조사하였으며, 이들 원제 및 정제품을 이용하여 in vitro와 in vivo 상에서 acetylcholinesterase (AChE) 활성 저해 정도를 비교 검정하였다. 실험결과 불순물의 조성은 O,O,O-triethylthio-phosphoric acid (TEA), 1-phenyl-3-trifluoromethyl-5-ethoxy pyrazole(PTMEP), O,O-diethyl O-1-phenyl-3-trifluoromethylpyrazo-5-yl phosphoric acid ester(flupyrazofos oxon), O,S-diethyl O-1-phenyl-3-trifluoromethylpyrazo-5-yl phosphorothionate (S-ethyl flupyrazofos)이었으며, 이들 불순물들의 함량이 원제 중에서 전반적으로 높았다. In vitro 상에서 AChE 저해는 불순물들이 많은 원제 1에서 가장 빠르게 저해되었으며, 생쥐 뇌 AChE (in vivo)에 대한 $I_{50}$ 값은 원제 1과 2가 정제품 보다 40% 이상 높았다. 이는 정제품에 비하여 원제 중에 더 많이 함유된 flupyrazofos oxen과 S-methyl flupyrazofos에 의한 영향일 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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