Kim, Sang-Bum;Chang, Min-Ho;Han, Sang-Hyun;Oh, Hong-Shik
Korean Journal of Environmental Biology
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v.30
no.3
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pp.157-163
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2012
Oxidative stress has been reported to be one of causes of neuritis. This study examined antioxidative activities of methanol extracts of six amphibian species known to be medicinal animals (Rana catesbeiana, R. coreana, R. rugosa, R. dybowskii, R. nigromaculata, and Hyla japonica) and investigated their effects of inhibiting nitric oxide (NO) production and cytotoxicity on the murine macrophage RAW264.7 cells. As inflammation is closely associated with reactive oxygen species, assays on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, xanthine oxidase inhibitory activity, superoxide anion radical scavenging activity and NO scavenging activity of the extracts of the six species were performed to investigate their antioxidative activity. The results obtained were as follows; All extracts showed antioxidative activity, and the activity of R. dybowskii was the highest in comparison among those. Anti-inflammatory effects of the extracts were also examined, the five extracts except that of R. rugosa did not show cytotoxicity for RAW264.7 cells at the maximal concentration ($1,000{\mu}g\;mL^{-1}$). Selectivity index, meaning NO scavenging activity compared to cytotoxicity, showed the highest level in the extract of R. dybowskii. These results will be very useful basic data for future studies on prevention and treatment of human diseases to understand the biological roles of amphibian extracts throughout the antioxidative or anti-inflammatory pathways.
Effect of cadmium on the early amphibian development was analyzed through FETAX (Frog Embryo Teratogenesis Assay: Xenopus). Embryos manifested concentration-dependent mortality and realformations; shortage of anterior-posterior axis gut realformation, ocular anomalies, bent notochord, misshapen dorsal fin, and derreal blisters. The treatment with 1.5ppm cadmium solution caused 100% mortality and concentration of lppm did not kill the embryos that caused 100% anomaly. The teratogenic index (TI = LC50 /EC50) was 2.8 indicating that $CdCl_2$ is teratogenic for Xenopus laevis. Embryos that were pulsetreated with at early to late blastula stage (St. 3-9) and mid to late blastula stage (St. 6-10) showed relatively strong resistance to cadmium, but the embryos treated at gastrula stage (St. 10-13) showed high mortality. And the embryos treated at tailbud stage (after St. 25) showed highest mortality of any other early stages. Effects of temperature were studied through pulse- treatment during gastrula stage at $20^{\circ}C$ and $30^{\circ}C$. The embryos treated with 7.5ppm at $30^{\circ}C$ and 15ppm at $20^{\circ}C$ caused 100% mortality respectively, indicating that higher temperature had more severe toxic effect. One of the most peculiar effect of cadmium at gastrulation was distortion of the tail. The probable cause of toxic effect of Cd was discussed.
For the study on the sex ratio in natural populations of the different localities, the amphibian species were collected as the materials at the seven localities in Korea, and were obtained the following results. The sex ratios of each amphibian species suggest that each has it's own specific sex rations the following list. Rana nigromaculata H. : 109-39, Rana rugosa SCH. : 67.44, Rana temporaria coreana O. : 158.45, Hyla arborea japonica G. : 137.70. In Rana nigromaculata H. the average sex ratio was 109.39 as the above list, and its was reached statistically significant level according to the different localiies. The sex ratio was generally higher in the eastern area than that in the western area in this country. The sex ratio of the adult frogs of Rana nigromaculata H. was 135.18 , and it has a statistically significant level by each locality but the sex ratio of the younger frogs of the same species was 100.97 which was a little lower than that in the adult, and it was not laid at a significant level according to the localities. There is no doubt that the difference of sex ratios according to the localities was mainly due to the different ratios of the adult frogs which were effected on the constitution of sex by environmental factors in each locality.
To assess the genetic diversity and population structure of Korean K. borealis, allozyme analysis was performed. The average genetic variability of Korean K. borealis populations was %P=13.2, Ho=0.048, and He=0.045. This value was the lowest in comparison with other Korean amphibian species studied. Also, the value was much lower than that of a reference population from Chinese K. borealis (%P=50, Ho=0.125, He=0.172). Wright's F-statistics showed that Korean K. borealis has distinctly low level of gene flow among regional populations (F$_{ST}$=0.339, Nm=0.487) in comparison with other Korean amphibian species studied. However, the average level of genetic divergence among Korean K. borealis populations was moderate (Nei's D=0.020). Therefore, it appeared that low levels of genetic diversity (He=0.045) and gene flow (Nm=0.487) among regional populations ave probably due to the results of decreasing population size and patchy distribution of this species in Korea.
Park, Jaejin;Grajal-Puche, Alejandro;Roh, Nam-Ho;Park, Il-Kook;Ra, Nam-Yong;Park, Daesik
Journal of Ecology and Environment
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v.45
no.1
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pp.10-16
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2021
Background: Ranavirus is an emerging infectious disease which has been linked to mass mortality events in various amphibian species. In this study, we document the first mass mortality event of an adult population of Dybowski's brown frogs (Rana dybowskii), in 2017, within a mountain valley in South Korea. Results: We confirmed the presence of ranavirus from all collected frogs (n = 22) via PCR and obtained the 500 bp major capsid protein (MCP) sequence from 13 individuals. The identified MCP sequence highly resembled Frog virus 3 (FV3) and was the same haplotype of a previously identified viral sequence collected from Huanren brown frog (R. huanrenensis) tadpoles in South Korea. Human habitat alteration, by recent erosion control works, may be partially responsible for this mass mortality event. Conclusion: We document the first mass mortality event in a wild Korean population of R. dybowskii. We also suggest, to determine if ranavirus infection is a threat to amphibians, government officials and researchers should develop continuous, country-wide, ranavirus monitoring programs of Korean amphibian populations.
There are many ongoing studies of infectious diseases as the major factor responsible for global declining of the amphibian population. Although some point out the amphibian rearing facilities like frog farms as one of the important sources of harboring and spreading amphibian infectious pathogens in the wild, there have been few related studies in South Korea. In this study, we investigated the bacterial and fungal colonies on the skin and in the internal organs of frogs and tadpoles collected inside and outside of Dybowski's brown frog farms in Inje, Goesan, and Gongju to compare the difference according to the region and between inside and outside the farm. We also intended to classify the bacteria collected from the tadpoles into species by analyzing 16s rDNA gene sequences. The result showed that the number of bacterial colonies found in the skin and gut of frogs and the number of fungal colonies found in the skin and liver of frogs collected in Goesan was significantly greater than those in the frogs in Inje. However, there was no difference between the frogs collected inside and outside of farms in both regions. In the case of tadpoles, the number of fungal colonies in the tadpoles collected from Gongju was greater than that in the tadpoles collected from Inje. The comparison of inside and outside frog farms showed that there were more bacterial colonies on the skin of the tadpoles collected from inside than outside the frog farm in Inje and more bacterial colonies in the organs of the tadpoles collected from outside than inside the farm in Gongju. The frogs with higher condition factor (body weight/snout-vent length*100) showed fewer bacterial colonies on the skin and fewer fungal colonies in the heart, but there were no significant relationships in tadpoles. We identified the total of 15 genera and four phyla of bacteria, but the difference according to regions and between inside and outside farm was not evident. The result of this study indicates that the different conditions according to the locality of farm and between inside and outside farm cause the difference in the population sizes of bacterial and fungal colonies and that it can affect the overall health condition of Dybowski's brown frogs in the farm. Moreover, the result suggests that effective disease control in the facility is greatly necessary to ensure successful operation of amphibian rearing facility and to prevent the possible spread of diseases from the facility to the wild.
Journal of the Korean Society of Environmental Restoration Technology
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v.20
no.6
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pp.1-19
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2017
This study set out to identify problems with amphibian habitation by the wetland types and improve their habitation environment in urban forest wetlands, thus creating a habitat for amphibians. Study site include forest swamps in Jatjul Park as well as Yeoji neighborhood Park in Guro-gu, and in Choansan neighborhood Park in Dobong-gu. The forest swamp in Jatjul Park gets its water from Mt. Maebong and it is a former escalated farmland-turned wetland. The swamp area is $2,500m^2$, a forest zone and a landscape planting site are 83.27% and 6.70% each. Target species Seoul pond frogs are inseparable from rice fields because they live in a short radius of and lay eggs in or near paddy fields, and Rana nigromaculata have similarities with Rana plancyi chosenica in choosing their habitats. There was need for paths that would lead to other paths so amphibians would spread to other parts of the forest and for measures to secure open water. Modifying a variety of routes for water, human and animals along with building a buffer to keep the core habitation zones were required. The forest swamp in Yeonji neighborhood Park used to be a water reservoir on the foot of Mt. Gunji. The swamp area is $1,980m^2$, a forest zone and farmland account for 80.61% and 4.88% each. Non-point pollutants from upstream along run into the subject forest marsh, bare ground on the around swamp and steep stone embankments obstructed amphibians. Target species was Bufo gargarizans that live in forests and edges of hills and spawn in deep water. The forest swamp in Choansan neighborhood Park gets its water from Mt. Choan and it is close to its water source that it is a mountain stream forest wetland. The basin and the swamp are $35,240m^2$ and $250m^2$ in size respectively. A forest zone accounts for 90.20%, high stone embankments laid in refurbishing the valley obstruct amphibians and there is water shortage in times of droughts. Target species were Rana coreana, Rana dybowskii and Hynobius leechii that live in mountain valleys, streams and wetlands and lay eggs in forest marshes and rocks in valleys. Looking into the three swamps of amphibian habitation, I came to conclusions that those wetlands were suitable for their amphibians but man-made facilities blocked their corridors leading to other corridors and even killed off target species in some parts of those swamps by destroying those parts. Amphibians live in water, on ground and underground at different stages of life. Hence, we should take this fact into consideration when planning their habitats and design core habitation zones, buffers zone and use zones accordingly. Buffer zones ought to be between core habitation zones and surrounding trees. Aiming at protecting core habitation zones, buffers should be in harmony with habitation zones. Use zones should be minimized in size and not in direct contact with core habitation zones.
[ $17\;{\alpha}-hydroxylase/17,20-lyase(P450_{C17})$ ] is the key enzyme mediating the conversion of progesterone to $17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$, ultimately to androstenedione during steroidogenesis. R. dybowskii's ovarian $P450_{C17}$ cDNA was cloned to understand the regulatory mechanism of ovarian steroidogenic pathway at the molecular level in amphibian. A 2.5kb cDNA clone encoding a single open-reading frame with a 519 deduced amino acid was isolated with the screening of ovarian cDNA library. This sequence contained the three highly conserved domains as seen in $P450_{C17}$ of other species. The comparison of amino acid sequence of Rana $P450_{C17}$ with other animal's $P450_{C17}$ showed relatively high identity with 76% in Xenopus, 63% in chicken, 60% in rainbow trout, and 45% in human. Phylogenic analysis also indicated that Rana $P450_{C17}$ gene was evolutionary well conserved among vertebrate. Northern analysis indicated that the two different sizes of $P450_{C17}$ transcripts with approximately 2.5 and 3.6kb were detected in ovary tissue, but not in other tissues. The expression vector of Rana $P450_{C17}$ clearly showed the $17\;{\alpha}-hydroxylase$ activity converting the exogenous progesterone into $17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$ in the nonsteroidogenic COS-1 cells. Therefore, Rana $P450_{C17}$ cDNA is very useful to investigate the molecular mechanism of the ovarian steroidogenesis in amphibian.
The wound healing is very complex biological processing including inflammatory, reepithelialization and matrix construction. According to the biological systematic category, the ability of the healing is very different. Generally healing ability of the lower animal group has been known more excellent compared to its higher group. Therefore, lower animals have been used as the experimental model to explore the mechanism of the wound healing or repair. To verify histochemical characteristics of the wound healing, we have used skin of the frog (Bombina orientalis) as known common amphibian. At day 1, 10, and 16, the mucous substance was very actively synthesized and strong positive by PAS and Alcian blue (pH 2.5). Day 10 after wounding, margin of the wound was gradually strong positive by PTAH staining for detection of collagen synthesis. At 3 to 6 hour and day 23 to 27, we have found the cell division was active through the MG-P staining, in which the concentration and division of DNA in nucleus was green to deep blue color.
This paper describes a neural network modelling of a vertebrate retina using a discrete-time and discrete-space approach based on neuro-anatomical data, and the computer simulations of the model which approximate the frog/amphibian negro-physiological data. It then compares them and describes how such a model can be beneficially used for confirming the hypothesis of a given neural system and further predict yet unknown experimental data.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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