We studied to improve the functional properties of soybean protein isolate by dimethylglutarylation and acetylation. Soybean protein isolate was acylated rapidly up to 80% modification and more of 80% modification was proceed slowly. Electrophoretic analysis showed that more changes in modified protein. Also, modification of soybean protein produced more ionizable tyrosines and exposed more hydrophobic groups, while modified protein exhibited a loss of reactive sulfhydryl groups. Spectrophoretic studies demonstrated that the shift was occurred at the UV 278nm and fluorescence 333nm, respectively, and the intensity decreased as the degree of modification was increased.
The effect of concentrate mixtures with crude protein (CP) levels 10%, 13%, 16%, and 19% and diets with roughage to concentrate ratios 80:20, 60:40, 40:60, and 20:80 (w/w) were determined on dry matter (DM) and organic matter (OM) digestibility, and fermentation metabolites using an in vitro fermentation technique. In vitro fermented attributes were measured after 4, 24, and 48 h of incubation respectively. The digestibility of DM and OM, and total volatile fatty acid (VFA) increased whereas pH decreased with the increased amount of concentrate in the diet (p<0.001), however CP levels of concentrate did not have any influence on these attributes. Gas production reduced with increased CP levels, while it increased with increasing concentrate levels. Ammonia nitrogen ($NH_3$-N) concentration and microbial CP production increased significantly (p<0.05) by increasing CP levels and with increasing concentrate levels in diet as well, however, no significant difference was found between 16% and 19% CP levels. Therefore, 16% CP in concentrate and increasing proportion of concentrate up to 80% in diet all had improved digestibility of DM and organic matter, and higher microbial protein production, with improved fermentation characteristics.
The effects of imipramine on A-type delayed rectifier $K^{+}$ currents and ATP-sensitive $K^{+}\;(K_{ATP)$ currents were studied in isolated murine proximal colonic myocytes using the whole-cell patch-clamp technique. Depolarizing test pulses between-80 mV and +30 mV with 10 mV increments from the holding potential of-80 mV activated voltage-dependent outward $K^{+}$ currents that peaked within 50 ms followed by slow decreasing sustained currents. Early peak currents were inhibited by the application of 4-aminopyridine, whereas sustained currents were inhibited by the application of TEA. The peak amplitude of A-type delayed rectifier $K^{+}$ currents was reduced by external application of imipramine. The half-inactivation potential and the half-recovery time of A-type delayed rectifier $K^{+}$ currents were not changed by imipramine. With 0.1 mM ATP and 140 mM $K^{+}$ in the pipette and 90 mM $K^{+}$ in the bath solution and a holding potential of -80 mV, pinacidil activated inward currents; this effect was blocked by glibenclamide. Imipramine also inhibited $K_{ATP}$ currents. The inhibitory effects of imipramine in A-type delayed rectifier $K^{+}$ currents and $K_{ATP}$ currents were not changed by guanosine 5-O-(2-thiodiphosphate) ($GDP{\beta}S$) and chelerythrine, a protein kinase C inhibitor. These results suggest that imipramine inhibits A-type delayed rectifier $K^{+}$ currents and $K_{ATP}$ currents in a manner independent of G-protein and protein kinase C.
Ku70/80 heterodimer is a central element in the nonhomologous end joining (NHEJ) DNA repair pathway, Ku80 playing a key role in regulating the multiple functions of Ku proteins. It has been found that the Ku80 protein located at telomeres is a major contributor to radiosensitivity in some telomerase positive human cancer cells. However, in ALT human osteosarcoma cells, the precise function in radiosensitivity and telomere maintenance is still unknown. The aim of this study was to investigate the effects of Ku80 depletion in the U2OS ALT cell line cell line. Suppression of Ku80 expression was performed using a vector-based shRNA and stable Ku80 knockdown in cells was verified by Western blotting. U2OS cells treated with shRNA-Ku80 showed lower radiobiological parameters (D0, Dq and SF2) in clonogenic assays. Furthermore, shRNA-Ku80 vector transfected cells displayed shortening of the telomere length and showed less expression of TRF2 protein. These results demonstrated that down-regulation of Ku80 can sensitize ALT cells U2OS to radiation, and this radiosensitization is related to telomere length shortening.
To extract insoluble proteins from sesame meal residue by microorganism, the sesame meal residue was treated with crude enzyme solution of Bacillus sp. CW-1121. The foaming capacity of salt soluble protein was quite lower than that of water soluble protein and the foaming stability of salt soluble protein decreased abruptly in 10 min., while it sustained for 30 min in case of water soluble protein. Emulsion capacities of all the protein fractions showed minimum value near isoelectric point of protein and salt soluble protein had lower emulsion capacities than that of water soluble protein. The emulsion stability of the protein was relatively stable for 30 min at $80^{\circ}C$. Oil and water absorption capacities of salt soluble protein were higher than those of water soluble protein.
This study was aimed at investigating the differences in chemical composition of antler according to growing days (80 d and 90 d after casting) and sections (upper, middle, base) in elk. Antlers of six bulls (aged 3 years) cutted on day 80 and 90 after casting were used in this trial and compared chemical composition such as crude protein, crude fat, crude ash, calcium, magnesium, amino acids, lipids, and fatty acids. The contents of crude protein and ether extract were higher in antlers cutted on day 80 than in antlers cutted on day 90, but that of crude ash was higher in antlers cutted on day 90. Significantly difference was observed in crude protein content between growing days in middle part of antler (p<0.05). Calcium and magnesium contents were higher on 90 d than 80 d, but there was no significant difference between growing days of antler. Based on the growing period of antler, there were significant differences (p<0.05) in aspartic acid, threonine, valine, leucine, phenylalanine and lysine, and essential amino acids content was higher in antlers cutted on day 80. Total lipid, neutral lipid, and phospholipid contents were higher in antlers cutted on day 80 than in those cutted on day 90, sphingo-phospholipid content was higher than glycerophospholipid content and values was higher in antlers cutted on day 80 than in those cutted on day 90. For total fatty acids, unsaturated fatty acids composition, there was no significant difference between growing periods of antlers, but values was higher on day 80 than on day 90. Essential fatty acids contents were lower in antler cutted on day 90 than antlers cutted on day 80 and higher for upper part than lower part.
A near-infrared reflectance spectroscopy (NIRS) prediction model was set to establish a rapid analysis system of wheat germplasm and provide statistical information on the characteristics of protein contents. The variability index value (VIV) of calibration resources was 0.80, the average protein content was 13.2%, and the content range was from 7.0% to 13.2%. After measuring the near-infrared spectra of calibration resources, the NIRS prediction model was developed through a regression analysis between protein content and spectra data, and then optimized by excluding outliers. The standard error of calibration, R2, and the slope of the optimized model were 0.132, 0.997, and 1.000 respectively, and those of external validation results were 0.994, 0.191, and 1.013, respectively. Based on these results, a developed NIRS model could be applied to the rapid analysis of protein in wheat. The distribution of NIRS protein content of 6,794 resources were analyzed using a normal distribution analysis. The VIV was 0.79, the average protein was 12.1%, and the content range of resources accounting for 42.1% and 68% of the total accessions were 10-13% and 9.5-14.6%, respectively. The composition of total resources was classified into breeding line (3,128), landrace (2,705), and variety (961). The VIV in breeding line was 0.80, the protein average was 11.8%, and the contents of 68% of total resources ranged from 9.2% to 14.5%. The VIV in landrace was 0.76, the protein average was 12.1%, and the content range of resources of 68% of total accessions was 9.8-14.4%. The VIV in variety was 0.80, the protein average was 12.8%, and the accessions representing 68% of total resources ranged from 10.2% to 15.4%. These results should be helpful to the related experts of wheat breeding.
Protein carboxyl Ο-methylation is a kind of enzymatic reaction producing carboxyl methylester catalyzed by protein carboxyl Ο-methyltransferases at the carboxyl group of amino acid residues in polypeptide. Since the finding of carboxyl methylesterl many studies have been focused on the under-standing of biological functions in eukaryotes but still not clear except for roles in Ras attachment to membrane and protein repair. In this study, we investigated the protein carboxyl methylation in porcine liver and testis in respect of identification and characterization of carboxyl methylesters and natural proteinous substrates using pH stability of the esters and electrophoresis under acidic and basic conditions. We detected several kinds of methyl esters, 3 kinds each in cytosolic fractions from liver and testis. Under the treatment of strong acid and base, the ratio between base-stable substrates and unstable ones in liver (4 : 6) was different from the ratio obtained in testis (6 : 4). The methyl accepting capacities were affected by enzymatic proteolysis between the range of 55 to 65% in liver and of 35 to 45% in testis. Separation of the methylated proteins by acidic electrophoresis in the presence of urea and SDS revealed distinctively natural substrates of 26, 33 and 80 kD in the cytosol from liver and of 14, 25, 32 and 86 kD from testis. Most of the labelling, however were lost following electrophoresis under moderate alkaline condition, except for molecules of newly detected 7 and 17 kD in livers and 15, 29, 40 and 80 kD in testis. From these results, it was proposed that protein carboxyl Ο-methylation in each organs may be catalyzed by different classes of protein carboxyl Ο-methyltransferases. In addition, it is suggested that the protein carboxyl methylation in liver and testis may have different patterns in respect of natural substrates.
Park, Snag-Bong;Kim, Jeong-Wha;Kim, Soohyun;Park, Nam-Sook;Jin, Byung-Rae;Hwang, Jae-Sam;Seong, Su-Il;Lee, Bong-Hee;Park, Eunju
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
/
v.6
no.1
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pp.33-44
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2003
The arylphorin was purified from the pupal haemolymph of the Chinese oak silkmoth, Antheraea pernyi, and characterized physiologically and biochemically, The protein was purified by a simple preparative polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and subsequent diffusive elution. The preparation was shown to be homogeneous by 7.5% native-PAGE. The native molecular weight of arylphorin was 450 kDa with a 80 kDa single subunit, suggesting hexamer, The protein contained high amounts (18.3%) of aromatic amino acids, phenylalanine (9.7%) and tyrosine (8.6%). Therefore, the protein was identified as a kind of a storage protein referred to as an arylphorin. The protein was stained by Schiff's reagent, suggesting a glycoprotein. The protein contained 4.9% (w/w) sugar and mannose and N-acetylglucosamine were major components. Also, degradation of the protein was begun by heat treatment at 90 for 20 minutes. These results showed that the A. pernyi arylphorin in the study is hexamer associated with the six subunits consisting of a 80kDa single subunit, and is different from that of Kajiura et al. (1998) in the subunit composition.
The aim of this study was to manufacture functional high protein fermented beverage, using whey protein concentrate (WPC) and Lactobacillus plantarum DK211 isolated from kimchi, and to evaluate the physicochemical, functional, and sensory properties of the resulting product. The fermented whey beverage (FWB) was formulated with whey protein concentrate 80 (WPC 80), skim milk powder, and sucrose; and fermented with Lactobacillus plantarum DK211 as single, or mixed with Lactococcus lactis R704, a commercial starter culture. The pH, titratable acidity, and viable cell counts during fermentation and storage were evaluated. It was found that the mixed culture showed faster acid development than the single culture. The resulting FWB had high protein (9%) and low fat content (0.2%). Increased viscosity, and antioxidant and antimicrobial activity were observed after fermentation. A viable cell count of 109 CFU/mL in FWB was achieved within 10 h fermentation, and it remained throughout storage at 15℃ for 28 d. Sensory analysis was also conducted, and compared to that of a commercial protein drink. The sensory scores of FWB were similar to those of the commercial protein drink in most attributes, except sourness. The sourness was highly related with the high lactic acid content produced during fermentation. The results showed that WPC and vegetable origin lactic acid bacteria isolated from kimchi might be used for the development of a high protein fermented beverage, with improved functionality and organoleptic properties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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