Background: Medicinal plants, especially examples rich in polyphenolic compounds, have been suggested to be chemopreventive on account of antioxidative properties. Punica granatum (PG) (pomegranate) is a well known fruit in this context, but its cytotoxicity in cancer cells has not been extensively studied. Here, we investigated the antiproliferative properties of a peel extract of PG from Iran in different human cancer cells. Materials and Methods: A methanolic extract of pomegranate peel (PPE) was prepared. Total phenolic content(TPC) and total flavonoid conetnt (TFC) were determined by colorimetric assays. Antioxidant activity was determined by DPPH radical scavenging activity. The cytotoxicity of different doses of PPE (0, 5, 20, 100, 250, 500, $1000{\mu}g/ml$) was evaluated by MTT assays with A549 (lung non small cell cancer), MCF-7 (breast adenocarcinoma), SKOV3 (ovarian cancer), and PC-3 (prostate adenocarcinoma) cells. Results: Significant (P<0.01) or very significant (P<0.0001) differences were observed in comparison with negative controls at all tested doses (5-$1000{\mu}g/ml$). In all studied cancer cells, PPE reduced the cell viability to values below 40%, even at the lowest doses. In all cases, IC50 was determined at doses below $5{\mu}g/ml$. In this regard, MCF-7 breast adenocarcinoma cells were the most responsive cells to antiprolifreative effects of PPE with a maximum mean growth inhibition of 81.0% vs. 69.4%, 79.3% and 77.5% in SKOV3, PC-3 and A549 cells, respectively. Conclusions: Low doses of PPE exert potent anti-proliferative effects in different human cancer cells and it seems that MCF-7 breast adenocarcinoma cells are the most cells and SKOV3 ovarian cancer cells the least responsive in this regard. However, the mechanisms of action need to be addressed.
The object of this study was to evaluate the effect of uterine epithelial cells on development of Korean native cattle(KNC) oocytes fertilized in vitro. Qocytes were collected from ovaries of slaughtered Korean Native Cows and matured in TCM199 with granulosa cells supplemented with 10% FBS, 5$\mu$g/ml FSH, 10 JU/ml hCG, and 1$\mu$g/ml estradiol-17$\beta$ for 24 hrs. For co-culture of in vitro development of fertilized ova, oviductal epithelial cells (l$\times$l0˚cells /ml) obtained from slaughtered cow and uterine epithelial cells(1$\times$10˚cells /ml) flushed from the superovulated holstein on Day 7 were incubated in 39$^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 95% air. Frozen-thawed KNC sperm was capacitated with BO(Brackett & Oliphant, 1975) medium supplemented with 10mM, 5mM-caffein. Matured oocytes were inseminated for 20 hrs. And then fertilized oocytes were washed with culture medium and transferred to oviductal epithelial cells for in vitro development and three days later a portion of embryos were transferred to uterine epithelial cells. Stastical methods of developmental rates on KNC-IVF oocytes was ANOVA-test. Developmental rates of KNC-IVF oocytes was significant higher(P<0.01) when co-cul-tured with uterine epithelial cells(25.2%) than oviductal epithelial cells. Blatocyst cul-tured for 7 to 9 days were frozen by automatic freezer with 1.4M glycerol-PBS. Survival rates of blastocyst was 40.0%. Fourteen frozen-thawed blastocysts were transferred to five holstein heifers on day 7 after natural estrus. Three recipients were observed twin and one recipient was single by ultra-sound systems on days 45 after embryo transfer.
본 연구는 다양한 항암성분을 함유한 Celeriac Extract의 암세포 증식에 미치는 영향을 살펴보기 위하여 실시되었다. 실험에 사용한 암 세포주는 5종으로 폐암세포 A549, 전립샘암세포 DU-145, 자궁암세포 HeLa, 유방암세포 MCF-7, 간암세포 SNU-182 로 모두 인체 유래 암 세포주를 사용하였으며 Celeriac Extract 10ug/mL, 100ug/mL, 1000ug/mL 에 대한 암세포의 증식 억제는 CCK-8 방법을 이용하여 측정하였다. 암세포 증식 억제를 살펴본 결과 Celeriac Extract 1000ug/mL는 폐암세포 A549, 전립샘암세포 DU-145, 자궁암세포 HeLa, 간암세포 SNU-182에서 유의한 증식 억제를 보였으며 농도 의존성을 나타냈다. 그러나 유방암세포 MCF-7 에서는 농도 의존적인 감소만 보였다. 결론적으로, 다양한 인간유래 암 세포주를 이용한 Celeriac Extract의 세포 증식 억제기전들은 암 예방효과 및 치료제 개발의 잠재력을 제공한다고 볼 수 있다.
Son, Ji Yoon;Renchinkhand, Gereltuya;Bae, Hyoung Churl;Paik, Seung-Hee;Lee, Jo Yoon;Nam, Myoung Soo
농업과학연구
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제45권4호
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pp.769-777
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2018
The fermentation of Panax ginseng yields many compounds including ginsenosides that have various biological functions. The objective of this study was to investigate the modulation of nitric oxide (NO), Interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ in Raw 264.7 cells treated with ginseng fermented by Penibacillus MBT213. Nitric oxide production in the Raw 264.7 cells treated for 24 hours with fermented ginseng at 3, 7, and 14 days after the treatment decreased to 74, 43, and 36%, respectively, compared with the positive control. The production of IL-6 was inhibited in all the cells treated with fermented ginseng at 3, 7, and 14 days after the treatment except for the positive control. The $TNF-{\alpha}$ production in the Raw 264.7 cells treated with fermented ginseng for 6 hours at 3, 7, and 14 days after the treatment was about 40,000, 85,000 and 65,000 pg/mL, respectively. Moreover, the $TNF-{\alpha}$ production in the Raw 264.7 cells treated with fermented ginseng for 24 hours at 7 and 14 days after the treatment was about 160,000 and 180,000 pg/mL, respectively. However, $TNF-{\alpha}$ production was inhibited in the Raw 264.7 cells at 6 and 12 hours after the treatment with fermented ginseng. herefore, it was confirmed that the immunological activity of the Raw 264.7 macrophages was affected by the treatment with fermented ginseng. It was concluded that ginseng fermented by Paenibacillus MBT213 possesses a potential anti-inflammatory activity and could be used as an ingredient in functional foods and pharmaceutical products.
The present study assessed the effect of calmodulin antagonists trifluoperazine and W-7 against the cytotoxicity of $MPP^+$ and 6-bydroxydoparnine (6-OHDA) in relation to the mitochondrial dysfunction and cell death in PC12 cells. Trifluoperazine (an inhibitor of the mitochondrial permeability transition and calmodulin antagonist) and W-7 (a specific calmodulin antagonist) significantly attenuated the $MPP^+-induced$ cell viability loss in PC12 cells with a maximum inhibition at $0.5{\sim}1{\mu}M$; beyond these concentrations the inhibitory effect declined. Both compounds at this concentration range did not cause cell death significantly. In contrast to $MPP^+$, the trifluoperazine and W-7 did not depress the cytotoxic effect of 6-OHDA. Addition of trifluoperazine and W-7 inhibited the cytosolic accumulation of cytochrome c and caspase-3 activation in PC12 cells treated with $MPP^+$ and attenuated the formation of reactive oxygen species and the depletion of GSH, whereas both compounds did not reduce the effect of 6-OHDA. The results show that trifluoperazine and W-7 may attenuate the cytotoxicity of $MPP^+$ by inhibition of the mitochondrial permeability transition and calmodulin. Meanwhile, the cytotoxic effect of 6-OHDA seems to be mediated by the actions, which are different from $MPP^+$.
B7-H3 is a newly discovered member of the B7/CD28 superfamily which functions as an important T-cell immune molecule. It has been reported recently that B7-H3 is highly expressed in many cancer cells, the data indicating that it may be a regulation factor contributing to tumor-resistance. In our study, we used bioinformatics to identify differentially expressed genes between colonic cancer cells and normal colonic cells, aiming to analyze mechanisms and identify sub-pathways closely related to progression, with the final aim of finding small molecule drugs which might interfere this progression. We found that ajmaline is one related factor which may enhance self-immunity in colon carcinoma therapy and B7-H3 plays important roles with regard to immunoreactions of colonic cancer cells. All the results indicate that H7-B3 is a favorable prognostic biomarker for colon carcinomas, providing novel information regarding likely targets for intervention.
Interactions between microbes and epithelial cells in the gastrointestinal tract are closely associated with regulation of intestinal mucosal immune responses. Recent studies have highlighted the modulation of mucosal immunity by microbe-derived molecules such as ATP and short-chain fatty acids. In this study, we undertook to characterize the expression of the ATP-gated $P2X_7$ receptor ($P2X_7R$) on M cells and its role in gastrointestinal mucosal immune regulation because it was poorly characterized in Peyer's patches, although purinergic signaling via $P2X_7R$ and luminal ATP have been considered to play an important role in the gastrointestinal tract. Here, we present the first report on the expression of $P2X_7R$ on M cells and characterize the role of $P2X_7R$ in immune enhancement by ATP or LL-37.
We investigated the anti-inflammatory effects of shiitake mushroom and kelp (SMK) mixture extracts in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated murine RAW 264.7 cells. Treatment of RAW 264.7 cells with LPS significantly increased NO (nitric oxide) production, pro-inflammatory cytokines (tumor necrosis factor (TNF)-α, interferon (IFN)-γ, interleukin (IL)-6, and IL-1β), and inflammation-related genes (COX-2 and inducible nitric oxide synthase (iNOS)). In cytotoxicity testing using RAW 264.7 cells, SMK mixture extracts in the range of 1-16 ㎍/mL did not inhibit cell proliferation. However, SMK mixture extracts significantly inhibited NO production in a dose-dependent manner (p<0.05). SMK treatment significantly decreased TNF-α, IL-6, IFN-γ, and IL-1β levels compared to the LPS group, and similarly, pro-inflammatory cytokine mRNA levels also decreased. SMK mixture extracts reduced the mRNA expression of COX-2 and iNOS in RAW 264.7 cells compared to LPS (p<0.05). The above results show that SMK mixture extracts suppressed the inflammatory response induced by LPS. In particular, the extracts were shown to regulate the inflammatory response by suppressing the expression of inflammatory cytokines and inflammation-related enzymes.
Objectives : This study was conducted to investigate the effects Innotus obliquus on the cytokine expression in Raw 264.7 cells. Methods : In Raw 264.7 cells stimulated with lipopolysaccaride(LPS) to Mimic inflammation, Innotus obliquus ethanol extract inhibited nitric oxide production in a dose-dependent manner and abrogated inducible nitric oxide sythase(iNOS) and cyclooxigenase (COX-2). The levels of cytokines were analyzed by sandwich immuno assays. Results and Conclusions : Results provided evidence that Innotus obliquus inhibited the production of IL-b, and IL-6 in Raw 264.7 cells activated with lipopolysaccharide (LPS). These finding suggested that Innotus obliquus can produce anti-inflammatory effect, which may playa role in adjunctive therapy in Gram-negative bacterial infections.
Intrinsic or acquired resistance to chemotherapeutic drugs is one of the major obstacles to effective cancer treatment. Hypoxia is widespread in solid tumors as a consequence of decreased blood flow in the tumor-derived neovasculature. The recent finding of a link between hypoxia and chemoresistance prompted us to investigate whether hypoxia induces doxorubicin resistance in human MCF-7 breast cancer cells. Low oxygen concentration decreased the doxorubicin sensitivity in MCF-7 cells. The expression of p-glycoprotein, a major MDR-related transporter, and those of apoptosis-related proteins (anti-apoptotic Bcl-2, Bcl-XL and pro-apoptotic Bax) were not altered by hypoxia in MCF-7 cells. Intracellular uptake of doxorubicin was significantly decreased under hypoxic conditions. Decreased cellular uptake of doxorubicin under hypoxia may contribute to causing doxorubicin resistance in these cells. The use of agents that can modulate the doxorubicin uptake for adjuvant therapy may contribute to improving the therapeutic efficacy of doxorubicin in breast cancer patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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