LC-MS/MS를 이용하여 인체 혈장 중 ginsenoside Rg1의 신속하고 정확한 분석법을 개발하고 이 분석법에 대한 검증을 수행하였다. 혈장 분석을 위하여 internal standard인 digoxin을 첨가한 후 acetone과 methanol용액 (80:20)으로 전처리하고, 그 상층액을 진공농축 한 후, LC-MS/MS로 분석하였다. 최적 크로마토그래피 분석은 0.1% formic acid 첨가된 water와 methanol을 이동상으로 하여 Agilent Eclipse XDB-C18 column ($4.6{\times}150mm$, $5{\mu}m$)을 이용하여 0.9 mL/min의 유속으로 gradient mode로 수행하였다. 혈장 중 ginsenoside Rg1의 표준 검량선은 1~500 ng/mL의 농도 범위에서 우수한 직선성($r^2=0.9995$)을 보였으며, 일내, 일간 정밀성은 변동계수 7.53% 이하, 정확성은 98.28% 이상이었다. 결과적으로 본 분석법은 ginsenoside Rg1의 약동학 연구에 적용되기에 충분한 감도와 특이성, 직선성, 정밀성 및 정확성을 가지고 있음을 확인하였다.
포유동물에서 중요한 구조단백질인 콜라겐은 다양한 조직내 단백질 조성과 사슬간 복잡한 가교결합의 존재로 인해 그 구조가 복잡하고 다양하여, 직접적으로 분석할 적당한 방법이 없었다. 본 연구에서는 간단한 전처리만으로 다수의 생체분자 시료에 대해 정확한 분자량 측정이 가능한 매트릭스 보조 레이저 탈착/이온화 비행시간 질량분석법(MALDI-TOF MS)을 이용하여 콜라겐과 조각화된 콜라겐을 분석하고 이의 아미노산 서열을 사중극자-비행시간 직렬 질량분석법(Q-TOF MS/MS)으로 확인하여, 시료 중의 콜라겐의 종류에 대한 정보를 확인하여, MALDI-TOF 질량분석을 이용한 콜라겐 분석에서 콜라겐의 종류를 쉽게 예측할 수 있는 방법을 제시하고자 하였다. 쥐의 꼬리에서 분리한 콜라겐을 SDS-PAGE로 분리한 결과 10개의 band를 얻을 수 있었는데, 같은 시료를 MALDI-TOF MS로 확인하여 각 band의 정확한 분자량을 결정할 수 있었다. SDS-PACE상의 10개의 분리된 band에 대해 각각 tryptic digestion후 MALDI-TOF 질량분석을 수행한 결과 4개의 band에서 type I 콜라겐의 $\alpha_1$-chain내의 fragment인 Gly1056-Arg1073을 확인할 수 있었고, 5개의 band에서 type I 콜라겐의 $\alpha_2$-chain내의 fragment인 Gly985-Arg1002을 확인하였다. 잔재한 콜라겐의 가교결합으로 인해 예상되는 fragment중 둘만이 확인되었지만, 확인된 fragment를 통해 적어도 7개의 band에서는 type I콜라겐이 존재함을 확인할 수 있었다. 확인된 두 콜라겐 flagment의 아미노산 서열을 Q-TOF MS/MS로 분석한 결과 MALDI-TOF MS에서의 예측과 일치함을 확인할 수 있었으며, 이를 통해 확인된 두 fragment에 의한 peak을 지문으로 하여 MALDI-TOF MS측정시에 시료내의 type I 콜라겐의 존재를 쉽게 확인할 수 있음을 볼 수 있었다.
연구 목적: 본 실험은 MS275와 PLGA (poly lactic-co-glycolic acid) 의 복합체를 submicron 크기로 티타늄 디스크 표면에 코팅하여, 표면의 변화를 알아보고 생물학적으로 간엽 줄기세포 활성에 어떠한 영향을 미치는지 조사하기 위해 시행되었다. 연구 재료 및 방법:양극산화 디스크에 electrospray 코팅법을 이용하여PLGA를 분사한 것을 대조군으로 설정하고, MS275를 $0.5{\mu}M$, $1{\mu}M$, $1.5{\mu}M$ 농도별로 코팅한 것을 실험군으로 하였다. 티타늄 디스크 표면에 분사된 복합체가 submicron입자 크기로 이루어졌는지SEM을 통해 확인하였으며, MS275로 코팅한 디스크와 양극산화 디스크의 거칠기 차이를 확인하기 위해 AFM으로 관찰하였다. 디스크 위에 간엽줄기세포 배양 후 1, 4, 7일에 세포증식 양상을 SEM과 MTT 검사를 통해 확인하였다. 결과: AFM (atomic force microscope) 결과 대조군과 실험군에서 거칠기의 유의할만한 차이가 없었다(P>.05). MTT 결과 1, 4, 7일 시간이 지남에 따라 세포 증식이 활발해졌으며 세포배양 7일에 $0.5{\mu}M-1.5{\mu}M$ MS275 농도 안에서, MS275의 농도가 커짐에 따라 세포의 활성도가 높아짐이 유의할 수준으로 확인되었다(P<.05). 세포 부착을 SEM으로 확인한 결과, 세포의 부착 수는 시간이 갈수록 증가하고 부착 형태 역시 돌기가 크고 넓어지며, 표면과 긴밀함 접촉이 증가하였다. 결론: FE-SEM과 MTT 결과 MS275/PLGA 복합체로 표면 처리된 타이타늄 표면에서 세포가 초기에 (7일내) 빠르게 증식하였다. 또한 복합체 처리군의 농도가 증가할수록 높은 세포 성장 수치를 보였다.
This study is performed to estimate the prevalence of metabolic syndrome among male workers and to identify the relationships with many related factors including anthropometry, hematological index, serum lipid level, dietary-related behaviors and health-related behaviors. According to the age groups, the 20s are significantly higher in normal and risk groups than in the metabolic syndrome (MS) group, the 30s are significantly higher in MS group than the other groups. The levels of AST and ${\gamma}$-GTP both show significant differences in the order of MS group ($30.3{\pm}8.8U/l$, $91.1{\pm}40.2U/l$) > risk group ($25.7{\pm}8.1U/l$, $41.8{\pm}20.2U/l$) > normal group ($22.8{\pm}6.0U/l$, $26.6{\pm}10.7U/l$). For the frequency of breakfast consumption, the response of 'Every day' is significantly higher in MS group than normal and risk groups, but the response of 'Not at all' is significantly higher in normal group than MS and risk groups. The drinking amount is positively correlated with ${\gamma}$-GTP in normal group, and it is negatively correlated with the hematocrit level, but it is positively correlated with the systolic blood pressure in MS group. AST is positively correlated with glucose concentrations of the MS group. The ALT is positively correlated with waist circumferences and systolic blood pressure in the risk group. The results of this study show that breakfast frequency, education level, drinking amount, drinking frequency, exercise frequency, AST, ALT and ${\gamma}$-GTP levels are all important risk factors of MS. Therefore, it is very important to maintain a healthy life style for the prevention of MS incidence.
This paper presents the simulation environment that verifies whether a new microprocessor described with HDL is compatible with MS-DOS. The phrase 'compatible with MS-DOS' means that the microprocessor can execute MS-DOS without any modification of MS-DOS's binary code. The proposed verification environment consists of HDL simulator and user interface module. And the communications between them are performed by using sockets which UNIXprovide. The HDL simulator is equipped with several functions, which use PLI to emulate ROM-BIOS facilities. The ROM-BIOS emulation routine is described by using these functions. User interface module utilizes S/MOTIF and participates in emulating PC monitor and keyboard. The verification environment is tested by executing the MS-DOS commands (DIR, FORMAT, DATE, TIME etc.) with the HDL model of microprocessor, and the display of user interface module verifies that the environment works correctly. In this paper, the method of constructing the verification environment is presented, and the simulation results are summarized.
The monomer and dimer structures of the amyloid fragment Aβ(1-16) sequence formed in H2O were investigated using electrospray ionization mass spectrometry (MS) and tandem MS (MS/MS). Aβ16 monomers and dimers were indicated by signals representing multiple proton adduct forms, [monomer+zH]n+ (=Mz+, z = charge state) and [dimer+zH]z+ (=Dz+), in the MS spectrum. Fragment ions of monomers and dimers were observed using collision-induced dissociation MS/MS. Peptide bond dissociation was mostly observed in the D1-D7 and V11-K16 regions of the MS/MS spectra for the monomer (or dimer), regardless of the monomer (or dimer) charge state. Both covalent and non-covalent bond dissociation processes were indicated by the MS/MS results for the dimers. During the non-covalent bond dissociation process, the D3+ dimer complex was separated into two components: the M1+ and M2+ subunits. During the covalent bond dissociation of the D3+ dimer complex, the b and y fragment ions attached to the monomer, (M+b10-15)z+ and (M+y9-15)z+, were thought to originate from the dissociation of the M2+ monomer component of the (M1++M2+) complex. Two different D3+ complex geometries exist; two distinguished interaction geometries resulting from interactions between the M1+ monomer and two different regions of M2+ (the N-terminus and C-terminus) are proposed. Intricate fragmentation patterns were observed in the MS/MS spectrum of the D5+ complex. The complicated nature of the MS/MS spectrum is attributable to the coexistence of two D5+ configurations, (M1++M4+) and (M2+M3+), in the Aβ16 solution.
단순열성 유전자에 의한 GMS민 IR36ms에 가야벼, 남풍벼, 신광벼 및 수원 296 등 4개 한국 수도품종을 각각 4회 연속 Bulk로 교잡시킨 BC$_3$F$_2$에서 웅성불임 개체를 얻어서 여기에 각 반복친을 1회 더 Backcross시킨 BC$_4$F$_2$세대에서 웅성불임 개체들을 선별하였다. 여기에 각 반복친을 교잡시켜 4품종의 Msms 유전자형을 얻고 이를 다시 BC$_4$F$_2$에서 선발한 웅성불임 개체(msms)에 교잡시키므로서 가야벼ms, 남풍벼ms, 신광벼ms 및 수원 296ms를 육성하였다. 이들 4개 웅성불임 계통들의 주당수수, 수당영화수, 출수기 및 수장은 모품종과 차이가 있었으나 웅성불임 계통들의 간장은 모품종에 비하여 단축되었다. 동일한 웅성불임 유전자를 가진 GMS 계통도 반복친에 따라 자연교잡 정도의 현저한 차이가 있었다. 가야벼ms는 11.5%, 남풍벼 ms는 13.1%, 신광벼ms는 1.9% 그리고 수원 296ms는 12.7%의 자연교잡율을 나타내었다. 화분친으로부터 15~90cm 거리 내에서는 가야벼 mS 및 남풍벼ms의 자연교잡율의 거리에 따른 차가 인정되지 않았다.
Metabolic syndrome (MS) was defined as condition in which the subjects have two or more abnormalities among obesity, hyperlipidemia, hypertension and hyperglycemia. To develop a nutritional education program for MS, this study was performed to compare the dietary habits and nutrients intake of complex symptoms of MS with obesity or hyper-glycemia. The participants in this study were 84 normal adults,62 MS with obesity, 33 MS with hyperglycemia and 54 MS with obesity and hyperglycemia (OB + HG). A dietary survey was conducted using 24-hour recall method. Total cholesterol level of MS with obesity group was significantly higher than other groups. WHR and systolic blood pressure showed no significant difference among MS with obesity, hyperglycemia and OB+HG groups. Dietary intakes of energy, Fe, Vit A, Vit $B_2$ and Ca were less than $75\%$ of 7th Korean RDA in the all groups. Especially, dietary intakes of Vit $B_2$, Vit A and Ca were less than $50\%$ of RDA in MS with hyperglycemia and OB+HG groups. The other nutrient intakes of each group were also below the RDA level except for P, Vit C. It appeared that most of the nutrient intakes in MS with hyperglycemia and OB + HG groups were significantly lower than normal group. In MS with obesity group, each consumption of sweet, organ meat and soup was higher than other groups. Each consumption of garlic and onion in MS with obesity, hyperglycemia and OB + HG groups was lower than normal group. Also, each consumption of soup in MS with hyperglycemia and OB + HG groups was higher than normal group. Indices of nutritional quality (INQ) for Ca, Vit A and Vit $B_2$ were below 1 in all the groups. Food composition group score of MS with hyperglycemia group was significantly lower than normal and MS with obesity groups. Our results indicated that nutritional education program for MS with obesity or hyperglycemia should include specific strategies to modify unsound dietary habits and inappropriate food intake for health.
This study was carried out to investigatigate feed cost of com-manure silage and growth performance of Korean native goats which was fed com-manure silage. The average weight about 11.6 kg of twenty one Korean native male goats (4 months used to determine the effect of the feeding trial. The goats were individually reared in metabolism cages and fed diet daily of 2% of the body weight on the dry matter basis. The treatments were divided into whole crop com silage(CS silage), whole crop com ensiled with cage layer manure (CLM; Com-manure silage or MS silage) and whole crop com silage supplemented with urea at feeding time (US silage). The content of crude protein, lactic acid and the ratio of ammonia nitrogen to total nitrogen ($NH_3-N/Total$ N) in MS silage were increased from 7.7 to 14.9%, 5.7 to 7.5% and 8.2 to 16.6%, and the differences were significantly (p < 0.05) different in all observations. Total body weight gain of those goats for 90 days was 6.0 kg (66.7 g/day; MS silage 4.3 kg (47.8 g/day; US silage) and 3.9 kg (43.4 g/day; CS silage), and feed conversion of MS silage (5.98) for 90 days was increased by far the best in the other groups and decreased about 30% in proportion to CS silage. Feed cost per 1 kg MS silage (1,606 won) was the lowest (p < 0.05) in the body weight gain and cut down expenses than fed CS silage by 37% of feed cost.
An interspecific fusant strain, Streptomyces MS1 was obtained by protoplast fusion between S. peucetius subsp. caesius and S. platensis. We studied on the fermentation characteristics of the fusant strain. The fermentation products of the fusant MS1 was identical with S. peucetius, but its production of anthracycline was more stable than S. peucetius under various fermentation conditions in regard to acidogenesis of fermentation broth. The optimal medium composition for anthracycline production by fusant MS1 as follows: sucrose 2.0%, glucose 1.0%, soytone 0.7%, $CaCO_3$ 0.2%, $KH_2PO_4$ 0.013%, casamino acids 0.01%, $K_2SO_4$ 0.025%, $MaCl_2\;6H_2O$ 1.024%, 5M $CaCl_2\;5H_2O$ 0.4%, 1N NaOH 0.7%, 20% L-proline 1.5%. In this condition, the productivity of anthracycline was $80{\sim}100\;{\mu}g/ml$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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