In this study, nanofiltration was applied to the concentration of the 6-aminopenicillinic acid (6-APA) from bioconverted penicillin solution and also to its mother liquor. The 6-APA in the solution was concentrated from 0.211 mol/L to 0.746 mol/L by nanofiltration. The final maximum concentration was 3.6 times higher than the initial concentration an the recovery yield was 97% to 99% of the original 6-APA. The concentrated solution was crystallized with the yields of 88.9-90.2% and the purity of the crystallized product was about 98%. The concentration of 6-APA in the mother liquor after crystallization was 0.014 mol/L and thus was concentrated 20-30 fold by nanofiltration and crystallization. The recovery of 6-APA was over 98%. The salts contained in the mother liquor, such as NH$_4$Cl and KCl, could be removed by allowing them to permeate through the membrane.
The N-[1H-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-chloroquinoline-3-carboxy] succinimide was reacted with amoxicillin, ampicillin and 6-APA to give 6-[D-(-)-$\alpha$-{1H-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-chloroguinoline-3-carboxamido} p-hydroxyphanyl acetamido] penicillanic acid [1], 6-[D-(-)-$\alpha$-{1H-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-chloroquinoline-3-carboxamido} phenylacetamido] penicillanic acid [10] and 6-[1H-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-chloroquinoline-3-carboxamido] penicillanic acid [19]. The 1-alkyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-substituted quinoline-3-carboxylic acids were reacted with ethyl chloroformate for making mixed anhydride; these mixed anhydrides were reacted with amoxicillin, ampilcillin and 6-APA to give 6-[D-(-)-$\alpha$-{1-alkyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-substituted quinoline-3-carboxamido} p-hydroxyphenylacetamido] penicillanic acid [2-9], 6-[D-(1)-$\alpha$-{1-alkyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-substituted quinoline-3-carboxamido} phenylacetamidod penicillanic acid [11-18] and 6-[1-alkyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-7-substituted quinoline-3-carboxamido] penicillanic acid [20-27].
To evaluate the effect of reed population on the distribution and activities of microorganisms, vertical distribution of heterotrophic bacteria, degradation rate of cellulose, extracellular aminopeptidase activity (APA) and metabolic diversity based on GN2 Microlog plate were measured at two salt marsh stations in Hogok-ri, Namyang Bay, west coast of Korea. The number of heterotrophic bacteria at station 1 (reed population inhabited area) showed 2 to 6 times higher than that of station 2 (exposed area) with exception in the surface layer. Cellulose degradation rates in station 1 showed more than 50%. month-I and higher than that of station 2 (10.2 to 38.4%. $month^{-1}$). Yet the APA at two stations did not show difference except surface layer and suggested that APA might not be a significant factor in degrading marsh plant debris. Lipid class compounds, cell wall polymers and L-alanine were widely used by microorganisms. The number and activities of bacterial populations especially concerned in plant debris degradation seemed to be stimulated by the reed communities.
Preparation of optically pure (3R, 4R)-4-acetoxy-3-[(1R)-1-hydroxyethyl]azetidin-2-o ne derivatives, which can be employed as starting materials for synthesis of carbapenem and penem antibiotics, was established in high efficiency from 6-amino-penicillanic acid (6-APA). 6-APA was diazotized and brominated to give 6, 6-dibromopenicillanic acid and its methyl ester was metalated with methylmagnesium bromide and condensed with acetaldehyde. The product, methyl 6-bromo-6-(1-hydroxyethyl)penicillanate was reduced with Zn-$NH_4Cl-NH_4OH$-acetone efficiently to give methyl 6-(l-hydroxyethyl)-penicillanate, which was protected either with ${\beta},{\beta},{\beta}$ -trichloroethoxycarbonyl group or with t-butyldimethylsilyl group. The thiazolidine rings of these compounds were cleaved by treatment of mercury(II) acetate in acetic acid and permangante in acetone in sequence to afford the desired optically pure final products.
The objective of this study was to evaluate the sedative activity of four aporphine alkaloids (APA) and nine cyclopeptide alkaloids(CPA), which had been isolated from the seeds (sanjoin) of Zizyphus vulgaris var. spinosus, and the fruits and stem bark of Zizyphus jujuba var. inermis. The assessment of sedative activity was carried out, employing a hexobarbital-induced sleeping time method in mice. When the relative sedative potency of sanjoinine-A(CPA) was given as one unit, those of nuciferine (APA), lysicamine (APA), chlorpromazine (positive control), and sanjoinine -Ahl (an epimer of sanjoinine-A) were 13, 6.5, 5, and 3, respectively. The sedatvie activities of other CPAs were much lower than those of sanjoinine-A and -Ahl, and other APAs were not active. On heat treatment, nuciferine and lysicamine were degraded into some artifacts which exhibited no sedative activity, while sanjoinine-A was converted into sanjoinine-Ahl which showed more potent sedative activity. These results suggested that nuciferine and sanjoinine-A were major sedative components of native sanjoin, and that sanjoinine-A and its epimeric artifact, sanjoinineAhl were the active principles of roasted sanjoin. It provides a scientific basis for heat-processing (roasting) of this Oriental medicine.
6-APA의 생산에 사용할 Penicillin acylase를 생산하는 야생균주를 분리하여 생리화학적특성을 조사하여 Escherichia속을 동정하였다. Penicillin acylase 생산성이 가장 높은 균주를 선별하여 배양조건을 조사하고 균체를 생산하여 효소를 추출하여 효소의 반응특성을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 분리한 121주의 생리화학적 특성에 의해 47주가 Escherichia 속으로 동정되고 이들중 12주가 penicillin acylase 활성을 나타냈다. 2. 12주중 가장 강력한 P. acylase 활성을 나타낸 균주가 Escherichia No.11 이였다. 3. 이 균주의 효소생산조건은 탄소원은 0.3%-phenylacetic acid, 질소원은 1%-peptone과 1%-yeast extract, amino 산으로는 0.3%, L-glutamic acid가 영향을 주었다. 그리고 배지의 pH는 7.6~8.0, 배양온도는 34~38$^{\circ}C$, 배양시간은 18시간이 최적 생산조건 이였다. 4. 효소는 균체를 초음파에 의해 추출하여 원심 분리하여 상등액을 $0^{\circ}C$에서 보존하여 효소원으로 하였다. 5. 추출효소의 반응특성은 최적 반응온도는 38$^{\circ}C$, PH는 8.0이였고, 1% penicillin G를 기질로 37$^{\circ}C$에서 반응시켰을 때 4시간의 반응에서 이론식의 56%가 6-APA로 변화되었다.
Mitochondrial DNA(mt DNA) of Mammalian is the circular one which the 16.5K base pairs and show the maternal inheritance. Evolutional speed of nucleotide sequence is very fast. So that polymorphic analysis of mt DNA provide the useful informations to investigate the genetic relations of interspecies. Authors trials were focussed to compare with the polymorphic differences of mitochondrial DNA between Jindo and Japanese mongrel dogs. DNA was extracted from bloods of 21 head of Jindo dogs and 20 head of Japanese dogs and isolated using 10 kinds of restriction endonucleases(Apa I, BamH I, Bgl II, EcoR I, EcoR V, Hinc II. Hind III, Pst I, Sty I, Xba I) and then separated by the agarose gel electrophoresis. After sourthern blotting hybridization was completed using the mtDNA of Japanese mongrel dogs as a probe. Autoradiography was used to compare the polymorphism of mtDNA both dogs. The results obtained were as follows; 1. mt DNA of Jindo dog showed polymorphism resulting cleavage with four kinds of restriction endonuclease, Apa I, EcoR V, Hinc II, Sty I. While in the Japanese mongrel dogs observed the polymorphism in the five kinds of restriction endonuclease supplemented with EcoR I. 2. Compared with both dogs the frequency differences of DNA polymorphism were recognized in the specific restriction endonuclease Apa I. Consequently in the restriction endonuclease Apa I both dogs classified with three types as A, B, C however in the Jindo dogs frequency of C type was 71.5 percent but in Japanese mongrel dogs observed 45 percent in the A type. 3. DNA polymorphism obtained from the use of five kinds of restriction endonuclease were classified with seven types. In Jindo dogs frequency was highest in the type 6 as 71.4 percent but in the Japanese mongrel dogs showed 35 percent in the type 5. 4. Genetic distances calculated by NEI method showed 0.0089 in Jindo dogs and was 0.0094 in the Japanese mongrel dogs.
The aminoglycoside multiple-resistance determinant from Streptoalloteichus hindustanus was cloned into Streptomyces lividans and named nbrB. The 1.2-kb ApaI- BclI fragment encompassing nbrB was located within a 2.6-kb ApaI fragment by successive subcloning experiments. The complete DNA nucleotide sequence of 1.2-kb containing nbrB was determined. The sequence contains an open reading frame that putatively encodes a polypeptide of 281 amino acids with a predicted molecular weight of 30,992. The deduced amino acid sequence of nbrB shows identities of 85.1% to kgmB of S. tenebrarius, 59.6% to sgm of Micromonospora zionensis, and 57.7% to grm of M. rosea. The similarity of nbrB to kgmB suggests that nbrB encodes a 16S rRNA methylase similar to that encoded by kgmB and that both genes might be derived from a common ancestral gene.
Seong, Baik-Lin;Son, Hyeung-Jin;Mheen, Tae-Ick;Moon H. Han
한국미생물·생명공학회지
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제9권4호
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pp.197-205
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1981
Bacillus megaterium의 발효액으로 부터 페니실린 아미다제를 셀라이트에 흡착시켜 분리한 후 이 흡착효소를 아크릴아마이드에 포괄시켜 고정화하였다. 관형식 반응조에서의 이 고정화효소의 안정도는 포괄시키지 않은 흡착효소에 비해 크게 증가하였으며 최적 반응 pH는 8.7, 그리고 최적 안정도는 7.5~8.0이었고 최적온도는 5$0^{\circ}C$ 였다. Km과 6-APA, 페닐초산에 의한 저해상수는 각각 4.55mM, 36.5mM, 그리고 10.5mM이었다. Effectiveness factor값은 0.95로 내부확산 효과는 무시할 수 있었다. pH8.0의 조건에서 관형식 반응조 내에서의 효소역가의 반감기는 4$0^{\circ}C$에서 6.8일 그리고 3$0^{\circ}C$ 에서는 47일로 포괄하지 않은 흡착효소에 비해 안정도가 각각 6.8배와 12배로 증가하였다. 이 고정화 효소에 의한 회분식 및 연녹식반응조에서의 6-APA의 생산성을 논의하였다. 실험결과로 미루어 보아 특히 흡착효소를 고정화효소로 사용하는 경우에 포괄방법을 이용함으로써 효소반응조의 안정도를 크게 증가시킬 수 있음을 시사하였다.
A series of modified poly(acrylic acid)'s containing different levels of 6-aminopenicillanic acid (6-APA), 7-aminocephalosporanic acid (7-ACA) and 6-[D-(-)-$\alpha$-aminophenyl acetamido] penicillanic acid (ampicillin) as pendant groups were prepared. Antibiotic activities of the newly prepared drugs were examined against the various gram-positive and gram-negative bacteria. It was found that ampicillin modified composition posses antibiotic activities against the gram-negative as well as the gram-positive bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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