• 제목/요약/키워드: 55-kDa protein

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면역이적법에 의한 한국 어린이의 폐포자충에 대한 항체반응 양상 (Serologic response of normal Korean children to Pneumocystis carrinii as observed by immunoblot)

  • 문형남;홍성태;이순형
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제33권2호
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    • pp.101-106
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    • 1995
  • 정상 한국 어린이의 폐포자충(hewowstiscwinii)에 대한 항체보유 양상을 파악하기 위하여 횐쥐 폐포자충의 조항원을 전기영동(SDS-PAGE)하고 면역이적(Western blot)을 시행하여 각 항원 분획에 반응하는 정상 한국 어린이 혈청에서의 IgG 항체 반응을 관찰하였다 전기영동으로 분리한 수용성 항원의 단백질 분획은 20-200 kDa 범위에서 20개 정도가 관찰되었다. 이들 분획 중에서 신생아의 혈청 15개와 정상 어린이 혈청 130개 합계 145개를 면역이적법으로 검사한 결과 40-55와 116 kDa 분획과 반응하였으나 미국 양성 표준혈청이 반응한 100 kDa 분획과는 반응하지 않았다 이 중에서 40-55와 116 kDa 하나 또는 두 분획에 대한 항체 양성률은 총 40.0%이었 고. 성별 구분이 가능한 남자 50명과 여자 48명에서 각각 56%와 33.3%의 양성률을 얻었다. 이 결과로 우리 나라에서 정상 어린이가 흰쥐 폐포자충 조항원 중 40-55와 116 kDa 분획과 반응하는 항체를 혈청 내에 가지고 있음을 확인하였다.

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인체 유구낭미충증 환자에서 수거한 낭미충 낭액의 성분 단백질의 양상 (Component proteins in cystic fluid of Taenia sodium metacestodes collected surgically from neurocysticercosis patients)

  • Yoon Kong;Shin-Yong Kang;Seung-Yull Cho
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제28권2호
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    • pp.101-108
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    • 1990
  • 포도낭미충증을 포함한 유구낭미충증 환자의 신경외과적 수술 과정에서 수거한 낭미충 낭액의 성분 단백질을 비교 검토하였다. 7.5% gel에서 Disc-PAGE와 reducing condition의 10~15% gel에 SDS-PAGE를 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 7.5% gel에서 실시한 Disc-PAGE 소견상 제주도와 Ecuador에서 수집한 돼지의 유구낭미충 낭액은 U, A, B, C, E, S의 6개 band로 구성되어 있었고 그 중 band C가 주 구성 성분이었다. 그리고 인체에서 수집한 낭액 은 band C가 주 구성 성분이었고 경우에 따라 band E가 주 구성 성분으로 관찰되고 있었다. 정상 뇌척수액은 band C, E 위치에서 ${\gamma}-globulin$과 albumin이 보이고 있었다. 2. 10~15% gel에서 실시한 SDS-PAGE상 제주도 낭액은 최소 25개 이상의 subunit로 구성되어 있었고 그 중 95, 64, 48, 39, 34, 24, 15, 10및 7 kDa band가 주 구성 성분이었다. 그리고 Ecuador감염 돼지의 유구낭미충 낭액은 전체적으로 비슷했으나 48, 39, 34, 24 kDa band가 의미한 반면 21, 17 kDa가 진하게 염색되었다. 인체 뇌낭미충증 환자에서 수집한 낭액들은 15~21개 정도의 band가 보이고 있었다. 그 중 94, 64, 15, 10 그리고 7 kDa band는 모든 낭액에 공통적으로 포함되어 있었다. 한편, 정상 뇌척수액의 SDS-PAGE에서는 77, 66 (albumin), 55 (heavy chain of ${\gamma}-globulin$), 22.5 (light chain of ${\gamma}-globulin$) 그리고 17 kDa band가 보였다. 환자의 낭액은 77, 66, 55, 22.5 kDa에서 진하게 염색되는 경우가 있었다. 이상의 결과로 인채 유구낭미충증에서 수집한 낭액에도 15, 10, 7kDa의 subunit로 구성된 150kDa의 band C protein이 주 성분으로 구성되어 있으며 수술장에서 수집하는 과정에서 뇌척수액이 섞이는 경우가 많음을 알 수 있었다.

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Lactobacillus acidophilus 30SC의 고온충격에 의한 반응

  • 문용일;한수민;오세종
    • 한국축산식품학회:학술대회논문집
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    • 한국축산식품학회 2004년도 제34차 추계 국제 학술대회
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    • pp.375-379
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    • 2004
  • Probiotic 활성이 높은 L. acidophilus 30SC의 생존성을 증진시키기 위한 기초자료를 얻고자, 열처리 동안 새로이 발현되는 단백질을 일차원 및 이차원 전기영동을 이용하여 확인하였으며, 세포 모양을 주사전자현미경을 사용하여 관찰하였다. $55^{\circ}C$의 heat shock에는 L. acidphilus 30SC의 사멸이 있는 것으로 나타났다. 나머지 처리구는 $37^{\circ}C$에서 계속 배양한 것과 별다른 차이를 나타내지 않았다. $45^{\circ}C$로 heat shock을 준 경우 $37^{\circ}C$에서 배양한 것과 거의 동일하였다. $55^{\circ}C$에서 15분 heat shock을 준 경우 약 22kDa와 25kDa의 단백질들이 새로이 발현된 것으로 나타났으나, 24 kDa와 27kDa로 추정되는 단백질의 발현정도는 낮았음을 확인하였다. 이차원 전기영동을 실시한 결과, $37^{\circ}C$와 비교할 때 $55^{\circ}C$로 heat shock을 준 경우 새로이 5개의 protein spot을 발견할 수 있었다. 그러나 6개의 단백질 spot은 $55^{\circ}C$ heat shock에서 소실된 것으로 확인되어 추가적인 단백질의 분석이 필요한 것으로 생각되었다.

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LiCl에 의해 유도되는 phosphoprotein이 embryonic zebrafish (Danio rerio)의 pigmentation에 미치는 영향 (Involvement of a LiCl-Induced Phosphoprotein in Pigmentation of the Embryonic Zebrafish (Danio rerio))

  • 진은정
    • 생명과학회지
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    • 제18권9호
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    • pp.1219-1224
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    • 2008
  • Neural crest는 신경계의 발생과정에서 생긴 특정화된 외배엽으로서 말초신경계(peripheral nervous system)의 모든 sensory cells과 fibers, 자율신경계의 대부분의 peripheral cells, unipolar spinal ganglion cell, cranial sensory ganglia, peripheral nerve의 neurolemmal sheath cells, ganglia의 capsule cells, sympathetic ganglia, chromaffin cells, pigment cell 등이 분화한다. Fish의 경우는 melanin을 가지고 있는 melanophores, yellow pigment를 가지고 있는 xanthopores, reflecting platelets를 가지고 있는 iridophores등 3가지의 pigment-producing cell을 가지고 있다. 다양한 pigement들의 deposition, distribution에 의해 Fish와 amphibian에서 볼 수 있는 수많은 color와 pattern이 만들어지게 된다. Embryonic neural crest가 patterning을 연구하기에 아주 좋은 모델임에도 불구하고, choromatophores의 cell-signaling mechanism에 관한 연구는 거의 없는 실정이다. 본 연구에서는 melanosomes의 melanocyt로의 이동기작과 이들의 dentiritic processe를 밝히기 밝히기 위해 phosphorylaion assay와 투과형 전자 현미경(transmission electron microscope)등을 이용한 다양한 실험들을 토대로, Lithium에 의해 유도되는 morphological alteration에 IP cell signaling pathway에 의해 조절되는 단백질의 하나인 55-kDa단백질의 인산화가 중요한 역할을 함을 밝혔다.

Light-regulated Translation of Chloroplast Reaction Center Protein D1 mRNA in Chlamydomonas reinhardtii

  • Kim, Jungmook
    • 한국식물학회:학술대회논문집
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    • 한국식물학회 1999년도 제13회 식물생명공학심포지움 New Approaches to Understand Gene Function in Plants and Application to Plant Biotechnology
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    • pp.57-62
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    • 1999
  • Light-regulated translation of chloroplast mRNAs requires nuclear-encoded trans-acting factors that interact with the 5' untranslated region (UTR) of these mRNAs. A set of four proteins (60, 55, 47, and 38 kDa) that bind to the 5'-UTR of the psbA mRNA had been identified in C. reinhardtii. 47 kDa protein (RB47) was found to encode a chloroplast poly (A)-binding protein (cPABP) that specifically binds to the 5'-UTR of the psbA mRNA, and essential for translation of this mRNA, cDNA encoding 60 kDa protein (RB60) was isolated, and the amino acid sequence of the encoded protein was highly homologous to plants and mammalian protein disulfide isomerases (PDI), normally found in the endoplasmic reticulum (ER). Immunoblot analysis of C. reinhardtii proteins showed that anti-PDI recognized a distinct protein of 56 kDa in whole cell extract, whereas anti-rRB60 detected a 60 kDa protein. The ER-PDI was not retained on heparin-agarose resin whereas RB60 was retained. In vitro translation products of the RB60 cDNA can be transported into C. reinhardtii chloroplast in vitro. Immunoblot analysis of isolated pea chloroplasts indicated that higher plant also possess a RB60 homolog. In vitro RNA-binding studies showed that RB60 modulates the binding of cPABP to the 5'-UTR of the psbA mRNA by reversibly changing the redox status of cPABP using redox potential or ADP-dependent phosphorylation. Site-directed mutagenesis of -CGHC- catalytic site in thioredoxin-like domain of RB60 is an unique PDI located in the chloroplast of C. reinhardtii, and suggest that the chloroplast PDI may have evolved to utilize the redox-regulated thioredoxin like domain as a mechanism for regulating the light-activated translation of the psbA mRNA.

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북한산국립공원의 식생개관

  • 임양재
    • 한국식물학회:학술대회논문집
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    • 한국식물학회 1985년도 워크샵 및 심포지엄 북한산국립공원의 식생
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    • pp.7-18
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    • 1985
  • Light-regulated translation of chloroplast mRNAs requires nuclear-encoded trans-acting factors that interact with the 5' untranslated region (UTR) of these mRNAs. A set of four proteins (60, 55, 47, and 38 kDa) that bind to the 5'-UTR of the psbA mRNA had been identified in C. reinhardtii. 47 kDa protein (RB47) was found to encode a chloroplast poly (A)-binding protein (cPABP) that specifically binds to the 5'-UTR of the psbA mRNA, and essential for translation of this mRNA, cDNA encoding 60 kDa protein (RB60) was isolated, and the amino acid sequence of the encoded protein was highly homologous to plants and mammalian protein disulfide isomerases (PDI), normally found in the endoplasmic reticulum (ER). Immunoblot analysis of C. reinhardtii proteins showed that anti-PDI recognized a distinct protein of 56 kDa in whole cell extract, whereas anti-rRB60 detected a 60 kDa protein. The ER-PDI was not retained on heparin-agarose resin whereas RB60 was retained. In vitro translation products of the RB60 cDNA can be transported into C. reinhardtii chloroplast in vitro. Immunoblot analysis of isolated pea chloroplasts indicated that higher plant also possess a RB60 homolog. In vitro RNA-binding studies showed that RB60 modulates the binding of cPABP to the 5'-UTR of the psbA mRNA by reversibly changing the redox status of cPABP using redox potential or ADP-dependent phosphorylation. Site-directed mutagenesis of -CGHC- catalytic site in thioredoxin-like domain of RB60 is an unique PDI located in the chloroplast of C. reinhardtii, and suggest that the chloroplast PDI may have evolved to utilize the redox-regulated thioredoxin like domain as a mechanism for regulating the light-activated translation of the psbA mRNA.

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국내산 및 제초제 내성 콩의 단백질 조성 분석 (Protein Composition of Domestic and Glyphosate-Tolerant Soybean)

  • 위춘화;석대은;양윤형;오상희;김형진;윤원기;김환묵;김미리
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제35권4호
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    • pp.470-475
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    • 2006
  • 국내산 콩 품종 3종과 미국산 콩 2종(non-GMO 및 GMO glyphosate-tolerant HS2906)에 대하여 단백질함량과 분포의 차이를 아미노산 분석, 총 질소량, PAGE/densitometry법에 의 해 분석하였다. 아미노산 구성과 총 질소량에서 품종간 유의적인 차이는 없었다. 한편 단백질 추출에서 SDS/buffer 추출법이 더 효과적이었다. 총 단백질함량(380.2-423.9 mg/g)과 단백질 분포는 품종간 유사하였으나. 상세 PACE(12.5% normal gel) 결과 재래종 콩(WS82)에 비해 제초제 저항성 GMO콩(HS2906)에서 beta conglycinin(55kDa) 양이 낮게 나타났으며, 25 kDa 단백질의 경우 미국산 콩에서는 관찰되지 못한 반면에 국내산 콩 품종에서는 뚜렷하게 관찰되었으며, ${\beta}$-conglycinin은 미국산 제초제 저항성 GMO콩과 국내산 황금콩에서 상대적으로 낮은 것으로 관찰되었다. 이와 같은 결과는 normal PAGE/densitometry 분석법은 콩시료 분석에 유용하게 활용될 수 있음을 보여주었다.

Heat Shock Stress에 의한 Lactobacillus acidophilus 30SC의 생리적 특성 (Physiological Properties of Lactobacillus acidophilus 30SC Exposed to Heat Shock Stress)

  • 문용일;한수민;박동준;지연태;김광현;오세종
    • 한국축산식품학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.350-356
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    • 2005
  • Probiotics로서의 활성이 높은 Lactobacillus acidophilus 30SC의 생존성을 증진시키기 위한 기초 자료를 얻고자, heat shock stress를 가한 후 생균수를 측정하고, 생존율의 변화를 통해 고온 처리에 의한 고온 및 냉동 내성의 증진 효과를 평가하였다. 또한 열처리 동안 새로이 발현되는 단백질을 1차원 및 2차원 전기영동을 이용하여 확인하였으며, 주사전자현미경을 사용하여 세포 모양을 관찰하였다. L. acidophilus 30SC는 $55^{\circ}C$의 heat shock stress를 받았을 때 생존 균수가 감소하는 것으로 나타났다. 나머지 처리구는 $37^{\circ}C$에서 계속 배양한 것과 별다른 차이를 나타내지 않았다. 특히 $45^{\circ}C$로 heat shock stress를 준 경우 $37^{\circ}C$에서 배양한 것과 거의 동일하였다. L. acidophilus 30SC에 $45^{\circ}C$로 heat shock stress를 가한 뒤 추가로 55 및 $60^{\circ}C$에 노출시켰을 때 가장 높은 생존율을 나타냈고, 치사 수준인 $55^{\circ}C$의 heat shock stress를 받은 후 $55^{\circ}C$$60^{\circ}C$에 노출되었을 때 생존율이 급격히 감소하는 경향을 보였다. L. acidophilus 30SC에 $55^{\circ}C$로 15분 Heat shock stress를 준 경우 약 22와 25 kDa의 단백질들이 새로이 발현된 것으로 나타났으나, 24와 27 kDa로 추정되는 단백질의 발현 정도는 낮았음을 확인하였다. 2차원 전기영동을 실시한 결과, $37^{\circ}C$에서 배양한 대조구와 비교할 때 $55^{\circ}C$로 heat shock stress를 준 경우 새로이 5개의 protein spot을 발견할 수 있었다. 주사전자현미경으로 세포의 형태를 관찰한 결과 heat shock stress를 준 경우에는 세포의 길이가 신장되는 경향을 나타내었다.

Characterization of the Gene for the Light-Harvesting Peridinin-Chlorophyll-Protein of Alexandrium tamarense

  • LEE SOON-YOUL;KANG SUNG-HO;JIN EONSEON
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제15권5호
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    • pp.1094-1099
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    • 2005
  • Photosynthetic dinoflagellates contain a water-soluble, light-harvesting antenna called the peridinin-chlorophyll-protein (PCP) complex, which has an apoprotein with no sequence similarity to other known proteins. There are two forms of PCP apoproteins; the 15-kDa short form and the 32- to 35­kDa long form. The present study describes the PCP protein and its cDNA from Alexandrium tamarense. A cDNA library was constructed from mRNA isolated from A. tamarense. The complete PCP cDNA was generated by reverse-transcription coupled to polymerase chain reaction (RT-PCR), together with rapid-amplification of cDNA ends (RACE). The A. tamarense PCP cDNA encoded a 55-amino acid signal peptide and a 313-amino acid mature protein with a calculated mass of 32 kDa, which corresponded to that of the long form of PCP. Phylogenetic analysis indicated that the sequence of A. tamarense PCP did not cluster with the short-form PCPs, to which it was only about $55\%$ identical, but which were $79-83\%$ identical to other long-form PCPs. The deduced amino acid sequence of A. tamarense PCP contains an internal duplication, which suggests the possibility that long-form PCPs arose by gene duplication or by the fusion of genes encoding the short form. The abundance of PCP mRNA changed substantially in response to different light conditions, indicating the possible existence of a photo-acclimation response in A. tamarense.

Identification and Characterization of Male Specific Protein in the Hemolymph of Galleria mellonella L.

  • Lee, Haeng-Yeun;Lee, Yong-Ho;Yun, Chi-Young;Kim, Hak-Ryul
    • Animal cells and systems
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    • 제1권1호
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    • pp.71-75
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    • 1997
  • Male specific protein (MSP) was identified and purified from the hemolymph of Galleria melloneffa L. by electrophoresis and anion exchange chromatography. MSP has a native molecular weight of 55 kDa as determined by gel filtration chromatography and consists of a single unit with the apparent molecular weight of 27 kDa and has the pl of approximately 5.8. MSP is present in the hemolymph from day 8 pupae throughout the male adult. MSP was also found in pupal fat body, adult fat body, and adult testis.

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