LEE , DAE-HEE;JUN, WOO-JIN;YOON, JEONG-WEON;CHO, HONG-YON;HONG, BUM-SHIK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권6호
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pp.1310-1317
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2004
The extracellular production of 5-aminolevulinic acid (ALA) by recombinant E. coli BL21 harboring a fusion gene hemA was investigated in a fermenter. For this purpose, the effects of various physiological factors, such as isopropylthio$\beta$-D-galactopyranoside (IPTG) concentrations and the time of induction, on enzyme activity were studied. Optimum concentrations of glycine and succinic acid were found to be 30 mM and 90 mM, respectively. When the cells were permitted to grow for 2 h prior to the addition of 0.1 mM IPTG, the activity of ALA synthase was higher than when IPTG was initially added. A 36-fold increase in the activity was observed with only 0.1 mM IPTG added. The pH of the medium also influenced the ALA synthase activity with the maximal activity occurring at pH 6.5. In recombinant E. coli extracts, the repeated addition of glycine and D-glucose increased the production of ALA and the inhibited intracellular ALA dehydratase activity, with up to 32 mM ALA being produced in the cultivation.
A novel neuropeptide was isolated from the skin of the snakehead Channa argus using the dorsal retractor muscle (DRM) of a starfish Asterina pectinifera as a bioassay system. The amino acid sequence of the purified peptide was analyzed using automated sequencing and MALDI-TOF mass spectrophotometry. The primary structure of the purified peptide was determined to be Pro-Ala-Leu-Ala-Leu. To investigate the complete primary structure of this peptide, Pro- Ala-Leu-Ala-Leu-OH and Pro-Ala-Leu-Ala-Leu-NH2 were synthesized. The chemical and pharmacological properties of the synthetic peptides were compared with those of the native peptide. Both the native peptide and synthetic Pro-Ala- Leu-Ala-Leu-OH had identical behaviors on the reverse-phase and cation-exchange HPLC chromatograms. Synthetic Pro-Ala-Leu-Ala-Leu-OH showed contractile activity on the DRM, and the threshold concentration of this peptide was approximately $10^{-8}$ M. The maximal contractile effect ($E_{max}$) of this peptide was $294{\pm}45.4$% at $10^{-5}$ M.
The author observed the positional relationship of maxillary cuspid to ala-lacrimal duct line in the 594 Koreans(329 male, 265 female) who had relatively normal teeth arrangement, aged 16 to 70. The relationship of ala-lacrimal duct line to the distal angie of maxilly cuspid of the subjects were classified as follows; Type A : Ala-lacrimal duct line was lotated more medially than the distal angle of maxillary cuspid. Type B : Ala-lacrimal duct line coincided with the distal angle of maxillary cuspid. Type C: Ala-lacrimal duct line was located more distally than the distal angle of maxillary cuspid. The occlusal relationship of the maxillary first molar to the mandibular first molar of the subjects were classified as follows; Group I : Group of neutrocclusion relationship. Group II : Group of distocclusion relationship. Group III : Group of mesiocclusion relationship. The obtained results were as follows; 1) The positional relationship of maxillary cuspid to ala-lacrimal duct line were as follows; (Male) Type A: $68.5%{\pm}1.58m%$, Type B: $22.5%{\pm}2.30m%$, Type C: $9.1%{\pm}\1.58m%$ (Female) Type A : $64.5%{\pm}2.94m%$, Type B: $26.5%{\pm}2.71m%$, TypeC: $8.9%{\pm}1.73m%$ 2) Ala-lacrimal duct line located more distally in group II and group III than group I at the point of the positional relationship of upper and lower first molar. 3) Average distance and standard deviation in type A were as follows; (Male) Right: $2.17mm.{\pm}1.01mm.$ Left: $2.27mm.{\pm}1.02mm.$ (Female) Right: $2.06mm.{\pm}0.70mm.$ Left: $2.24mm.{\pm}0.80mm.$ 4) Average distance and standard deviation in type C were as follows; (Male), Right: $1.47mm.{\pm}0.85mm.$ Left: $1.52mm.{\pm}0.97mm.$ (Female) Right: $1.04mm.{\pm}0.44mm.$ Left: $1.26mm.{\pm}0.89mm.$ The results of 3) and 4) had no significant difference between the male and female.
Kang, Kyeong-Rok;Kim, Jae-Sung;Kim, Tae-Hyeon;Seo, Jeong-Yeon;Lim, HyangI;Park, Jong-Hyun;Yang, Kwang Yeol;Yu, Sun-Kyoung;Kim, Heung-Joong;Kim, Chun Sung;Chun, Hong Sung;Lee, Dong-Seol;Park, Joo-Cheol;Kim, Do Kyung
International Journal of Oral Biology
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제46권1호
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pp.15-22
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2021
Alpha-lipoic acid (ALA) is a naturally occurring antioxidant and has been previously used to treat diabetes and cardiovascular disease. However, the autophagy effects of ALA against oxidative stress-induced dopaminergic neuronal cell injury remain unclear. The aim of this study was to investigate the role of ALA in autophagy and apoptosis against oxidative stress in the SH-SY5Y human dopaminergic neuronal cell line. We examined SH-SY5Y phenotypes using the 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay (cell viability/proliferation), 4′,6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride nuclear staining, Live/Dead cell assay, cellular reactive oxygen species (ROS) assay, immunoblotting, and immunocytochemistry. Our data showed ALA attenuated hydrogen peroxide (H2O2)-induced ROS generation and cell death. ALA effectively suppressed Bax up-regulation and Bcl-2 and Bcl-xL down-regulation. Furthermore, ALA increased the expression of the antioxidant enzyme, heme oxygenase-1. Moreover, the expression of Beclin-1 and LC-3 autophagy biomarkers was decreased by ALA in our cell model. Combined, these data suggest ALA protects human dopaminergic neuronal cells against H2O2-induced cell injury by inhibiting autophagy and apoptosis.
Lee, Ah Young;Choi, Ji Myung;Lee, Myoung Hee;Lee, Jaemin;Lee, Sanghyun;Cho, Eun Ju
Nutrition Research and Practice
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제12권2호
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pp.93-100
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2018
BACKGROUND/OBJECTIVE: Oxidative stress plays a key role in neuronal cell damage, which is associated with neurodegenerative disease. The aim of present study was to investigate the neuroprotective effects of perilla oil (PO) and its active component, alpha-linolenic acid (ALA), against hydrogen peroxide $(H_2O_2)$-induced oxidative stress in SH-SY5Y neuronal cells. MATERIALS/METHODS: The SH-SY5Y human neuroblastoma cells exposed to $250{\mu}M$$H_2O_2$ for 24 h were treated with different concentrations of PO (25, 125, 250 and $500{\mu}g/mL$) and its major fatty acid, ALA (1, 2.5, 5 and $25{\mu}g/mL$). We examined the effects of PO and ALA on $H_2O_2$-induced cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) release, and nuclear condensation. Moreover, we determined whether PO and ALA regulated the apoptosis-related protein expressions, such as cleaved-poly ADP ribose polymerase (PARP), cleaved caspase-9 and -3, BCL-2 and BAX. RESULTS: Treatment of $H_2O_2$ resulted in decreased cell viability, increased LDH release, and increase in the nuclei condensation as indicated by Hoechst 33342 staining. However, PO and ALA treatment significantly attenuated the neuronal cell death, indicating that PO and ALA potently blocked the $H_2O_2$-induced neuronal apoptosis. Furthermore, cleaved-PARP, cleaved caspase-9 and -3 activations were significantly decreased in the presence of PO and ALA, and the $H_2O_2$-induced up-regulated BAX/BCL-2 ratio was blocked after treatment with PO and ALA. CONCLUSIONS: PO and its main fatty acid, ALA, exerted the protective activity from neuronal oxidative stress induced by $H_2O_2$. They regulated apoptotic pathway in neuronal cell death by alleviation of BAX/BCL-2 ratio, and down-regulation of cleaved-PARP and cleaved caspase-9 and -3. Although further studies are required to verify the protective mechanisms of PO and ALA from neuronal damage, PO and ALA are the promising agent against oxidative stress-induced apoptotic neuronal cell death.
Rhodopseudomonas sp. KCTC1437균주를 이용하여 Polyhydroxyalkanoate (PHA)와 5-aminolevulinic acid (ALA)를 생산하기 위한 배양조건과 이들 생합성 조건의 상호관련성에 대하여 조사하였다. PHA생합성을 위한 탄소원으로는 acetic acid가 가장 효과적이었으나, succinic acid를 보조 탄소원으로 사용하였을 때의 세포건체량은 2.5g/ι, PHA함량은 건체량의 73%로서 주 탄소원만을 사용할 때에 비하여 크게 증가하였다. 조사된 탄소원으로부터 생합성된 PHA는 모두 polyhydroxybutyrate 단일중합체 이었으나, valeric acid로부터는 3-hydroxybutyrate와 3-hydroxyvalerate로 구성된 공중합체가 생산되었다. ALA의 생합성을 위하여서는 환원제 인 sodium thioglycolate를 첨가하여 혐기적 조건을 만들고, 탄소원인 acetic acid와 propionic acid 이외에 전구물질인 levulinic acid, succinic acid와 glycine을 반복적으로 공급해주었을 때 가장 좋았으며, 약 400 mg/ι의 ALA를 생산할 수 있었다. 그러나 ALA 생합성의 필수물질인 glycine, levulinic acid와 환원제는 세포생장과 PHA의 생합성을 저해하는 것으로 나타났다. 이러한 실험 결과, Rhodopseudomonas sp. KCTC1437균주로부터 PHA와 ALA를 동시에 생산할 수 있으나, 두 가지 유용산물을 효율적으로 생합성하기 위한 각각의 배양조건이 상호 배타적임을 확인하였다.
Aminolevulinic acid(ALA) was shown to be synthesized via active pathways of either C4 or C5 ALA biosynthesis in cells of a photosynthetic bacterium, Rhodocyclus gelatinosus KUP-74, where the C5 pathway was appeared to be preferntially expressed in the cells. It was strongly suggested that L-glutamine might be utilized more effectively than L-glutamate to synthesize ALA via C5 pathway in this bacterium from the fact of relationship between the cellular uptake rates of glutamate and its Gamma-derivaties and corresponded ALA productivities in vitro and in vivo.
Kang Min-Seok;Kim Dong-Myung;Kim Jeong Sook;Jeong Jin-Hyun
Archives of Pharmacal Research
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제28권10호
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pp.1111-1113
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2005
5-Aminolevulinic acid and its derivatives, which are known to affect the early diagnosis and treatment of cancer, have been synthesized. Simple methods for the synthesis of 5-aminole-vulinic acid (ALA), a precursor of porphyrins, have been developed in our laboratory for use in studies on the biosynthesis of porphyrins.
In these days, fluorescent materials such as ICG or 5-ALA is used for the brain surgery. The patients who underwent brain tumor surgery has been increased during last 30 years and the survivorship rate increased 22∼33% in 5 years. Recently, the Fluorescence induction surgery is developed for more safety and improved the resection rate for the glioma in the neurosurgery field. In this study, we proposed fluorescence area detection method for ICG and 5-ALA fluorescence induced surgery using acquired images from image processing. Accuracy was 99.21% from ICG images, and 99.51% from 5-ALA images. Matthews correlation coefficient was 88.67% from ICG images, and 90.49% from 5-ALA images.
공기가 제거된 0.5 M HCl 과 0.5 M NaCl 용액에서 일어나는 알루미늄의 부식에 대하여 알라닌(Ala), 히스티딘(His) 과 메티오닌(Met)의 부식억제 효과를 조사하였다. HCl에 용해된 Ala, His, Met의 경우 모두 환원반응 속도가 감소되어 부식이 억제 되었으며, 부식억제 효율은 Met$10^{-4\;}M$ 보다 묽은 용액에서 Langmuir 흡착 등온식이 적용되었으나 $10^{-4\;}M$ 보다 진한 용액에서는 흡착된 분자 사이의 상호작용에 의하여 Temkin의 대수함수 등온식이 적용되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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