For identification of four sibling species of the Anopheles hyrcanus complex found in Korea, the 5.8 rDNA-ITS2-28S rDNA region of each species was sequenced and the species-specific primers wee designed The amplified PCR products obtained from each species were analyzed by agarose gel electrophoresis. The result showed a single species- specific band, I.e. 559bp, 432bp, 322bp and 192bp for An. sinensis, An. sp., An. lesteri and An. pullus, respectively. In conclusion, the species-specific PCR primers designed from ITS2 variable regions functioned successfully and specifically, and can be applied as a useful tool for identifying species of the Anopheles hyrcanus complex found in Korea.
한 쌍의 R16-1과 R23-2R primer를 이용한 PCR에 의해 증폭된 16S와 23S rDNA 사이의 rDNA spacer 부위의 다형성들이 Pseudomonas avenae, P. glumae, P. fuscovaginae, P. syringae pv. syrngae, Xanthomonas oryzae pv. oryzae, X. oryzae, Xanthomonas herbicola 등 벼 종자전염성 51개 균주의 구분을 위하여 적용되었다. 증폭산물은 820∼950bp의 크기였으며, 각각의 종에 특이적이었고 구분이 가능하였다. Pseudomonas species의 증폭산물은 P. avenae는 950bp, P. glumae는 850bp, P. fuscovaginae는 770pb 및 P. syringae pv. syringae는 1,240, 1,100 및 820bp로 특이적이었다. P. avenae와 P. glumae의 국내균주들은 다형성에 있어 종내 변이는 없었다. X. oryzae pv. oryzae의 860bp와 X. oryzae pv. oryzicola의 890, 440 및 370bp의 이차산물에서 Xanthomonas species의 종내에서 균주에 관련없이 단일화된 다형성을 보였다. CXO 211을 제외한 모든 국내 균주는 a형에 속한 반면 하나의 국내 균주를 포함하여 4개 균주는 b형이었다. E. herbicola의 spacer 부위 증폭은 여러 개의 band를 보였으며, 증폭상은 각각 동일하였고, strain간의 종내 변이는 없었다. 본 실험 결과에 의하여 16S와 23S rDNAdp R16-1과 R23-2R primer를 이용하여 PCR 증폭된 spacer 다형성의 구별은 종자전염성 세균의 신속한 구별에 이용될 수 있을것이다.
A pollen analytical study of sediment sequences collected from Yongneup moor (sampling point: $38^{\circ}$12'57.4" N, $120^{\circ}$7'30.2" E) was conducted to understand the vegetation history in the mountainous region of the central Korean peninsula. Carbon dating was carried out to measure five successive samples obtained from the bottom at a depth of 180 cm to the surface. The Yongneup moor sediment revealed four main local pollen zones; that is, four past vegetation phases as follows: Local pollen zone I: Quercus-Pinus zone; estimated age, 5,900-4,800 calibrated years (cal) before present (BP); vegetation type, cool-temperate central/montane deciduous broad-leaved forest. Local pollen zone II: Pinus-Abies-Quercus zone; estimated age, 4,800-3,400 cal BP; vegetation type, cool-temperate northern/alti-montane mixed coniferous and deciduous broad-leaved forest. Local pollen zone III: Quercus-Pinus-Abies zone; estimated age, 3,400-400 cal BP; vegetation type: cool-temperate central/montane deciduous broad-leaved forest. Local pollen zone IV: Pinus-Quercus zone; estimated age, 400-present cal BP; vegetation type, cool-temperate central/montane mixed deciduous broad-leaved and coniferous forest. It was confirmed that subalpine coniferous forests had expanded to the mountainous region of the central Korean peninsula during the period from 4,800-3,400 cal BP and thereafter deciduous forests dominated by Q. mongolica were established. Notably, secondary forests dominated by P. densiflora developed in the lower part of the mountainous region of the central Korean peninsula about 400 cal BP due to human interference.
Inorganic geochemical and mineralogical analyses from the trench sediments of the Hwayang wetland were carried out to verify the wet/dry conditions during 6000 - 5000 yr BP and abnormal event of 6300 yr BP of Korean west coast. Lithostratigraphy, mineralogy and major element concentrations of the sediments of the trench indicate that during 6000 - 5000 yr BP, a wet/dry conditions might be repeated at an interval of 200 years. Carbonate minerals precipitated with the decrease of water depth in the lake or wetland after about 6000 yr BP. On the other hand, the sediments coarser in mean grain size and larger in standard deviation were corresponded with periods of 6300 yr BP and 6230 yr BP. Especially, such a feature of grain size distribution of 6300 yr BP appears in other wetlands situated in the west coast, e.g., Hwangsan wetland and Cheollipo coastal wetland. During the period, the coarse sediments seem to have been delivered by a high energy like storming.
MicroRNAs (miRNAs) are emerging as critical regulators in carcinogenesis and tumor progression. Recently, miR-99a has been reported as a tumor suppressor gene in various human cancers, but its functions in the context of anaplastic thyroid cancer (ATC) remain unknown. In this study, we reported that miR-99a was commonly downregulated in ATC tissue specimens and cell lines with important functional consequences. Overexpression of miR-99a not only dramatically reduced ATC cell viability by inducing cell apoptosis and accumulation of cells at G1 phase, but also inhibited tumorigenicity in vivo. We then screened and identified a novel miR-99a target, mammalian target of rapamycin (mTOR), and it was further confirmed by luciferase assay. Up-regulation of miR-99a would markedly reduce the expression of mTOR and its downstream phosphorylated proteins (p-4E-BP1 and p-S6K1). Similar to restoring miR-99a expression, mTOR down-regulation suppressed cell viability and increased cell apoptosis, whereas restoration of mTOR expression significantly reversed the miR-99a antitumor activity and the inhibition of mTOR/p-4E-BP1/p-S6K1 signal pathway profile. In clinical specimens and cell lines, mTOR was commonly overexpressed and its protein levels were statistically inversely correlated with miR-99a expression. Taken together, our results demonstrated for the first time that miR-99a functions as a tumor suppressor and plays an important role in inhibiting the tumorigenesis through targeting the mTOR/p-4E-BP1/p-S6K1 pathway in ATC cells. Given these, miR-99a may serve as a novel prognostic/diagnostic and therapeutic target for treating ATC.
Lee, Hong Seock;Lee, Min Soo;Han, Deock-Jeong;Lee, Heon-Jeong
Korean Journal of Biological Psychiatry
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v.7
no.2
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pp.152-158
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2000
Background : No association between schizophrenia and dopamine D4 receptor polymorphisms have been reported. Despite these results, it is premature to exclude the association. It has been suggested that the susceptibility to develop schizophrenia could result from variation at a number loci which may interact or coact with each other. Therefore, we investigated a possible association of combinations of exon III 48bp polymorphism[D4E3] and exon I 12bp polymorphism of the DRD4 gene [D4E1] with schizophrenia. Methods : 207 unrelated Korean schizophrenic patients and 191 healthy controls were recruited. DRD4 genotype was established using the polymerase chain reaction. Statistical analysis consisted of ${\chi}^2$ tests for Hardy-Weinberg proportions and genotypic and allelic frequencies in the patients and control groups. Results : There were no statistically significant differences in the each polymorphisms between schizophrenics and controls. And all genotype frequencies were within Hardy-Weinberg expectations. When the combinations of the polymorphism in schizophrenia and controls were compared, however, there were significant differences at $A1A2^*2/4$ in the distributions of the combinations of D4E1 and D4E3(p<0.01). Conclusions : These findings suggest that the certain combination of D4E1 and D4E3($A1A2^*2/4$) has the protective role to a susceptibility for schizophrenia.
Erwinia pyrifoliae is a Gram-negative bacterium causing black shoot blight in apple and Asian pear trees. E. pyrifoliae strain EpK1/15 was isolated in 2014 from an apple twig from the Pocheon, Gyeonggi-do, South Korea. In this study, we report the draft genome sequence of E. pyrifoliae EpK1/15 using PacBio RS II platform. The draft genome is comprised of a circular chromosome with 4,027,225 bp and 53.4% G + C content and a plasmid with 48,456 bp and 50.3% G + C content. The draft genome includes 3,798 protein-coding genes, 22 rRNA genes, 77 tRNA genes, 13 non-coding RNA genes, and 231 pseudo genes.
Background: Chronic bovine mastitis is linked to biofilm-producing Staphylococcus aureus (bp-Sa) or Staphylococcus coagulase-negative (bp-Scn). Objectives: Bp-Sa and bp-Scn were treated with intramammary preparations of either enrofloxacin HCl·2H2O-dimethyl-sulfoxide-chitosan (enro-C/DMSO/chitosan) or enro-C alone. Their potential to inhibit and degrade biofilm formation in vitro was also assessed. Methods: Milk samples were obtained from the affected quarters in a herd. Phenotypical and genotypical identifications as biofilm-producing Staphylococcus species were carried out. Enro-C/DMSO/chitosan and enro-C alone were assessed to determine their in vitro efficacy in interfering with biofilm formation and their bactericidal effects. A prolonged eight-day treatment with a twice-daily intramammary insertion of 10 mL of enro-C/DMSO/chitosan or enro-C alone was set to evaluate the clinical and bacteriological cures on day 10 in 15 cows per group and the biofilm-inhibiting ability. Results: Fifty-seven percent of the isolates were identified as Staphylococcus spp., of which 50% were bp-Sa, 46% bp-Scn, and 4% Staphylococcus pseudintermedius. One hundred percent of the S. aureus isolated and 77% of Staphylococcus coagulase-negative were biofilm producers. In both groups, the icaA and icaD biofilm-producing genes were identified. The experimental preparation could inhibit biofilm formation, degrade mature biofilms, and have well-defined microbicidal effects on planktonic and biofilm bacteria. The respective clinical and bacteriological cure rates were 100% and 80% for enro-C/DMSO/chitosan and 41.7% and 25% for enro-C alone. Conclusions: Enro-C/DMSO/chitosan eliminates bp-Sa and bp-Scn from cases of chronic bovine mastitis.
For screening of autoregulator receptor gene from Streptomyces longwoodensis, PCR was performed with primers of receptor gene designed on the basis of amino acid sequences of autoregulator receptor proteins with known function. PCR products were subcloned into the BamHIsite of pUC19 and transformed into the E. coli $DH5{\alpha}$. The isolated plasmid from transformant contained the fragment of 100 bp, which was detected on $2\%$ gel after BamHI treatment. The insert, 100 bp PCR product, was confirmed as the expected internal segment of gene encoding autoregulator receptor protein by sequencing. Southern and colony hybridizations with the 100 bp fragment as a probe allowed to select a genomic clone of S. longwoodensis, pSLT harboring a 4.4 kb SphI fragment. Nucleotide sequencing analyses revealed a 651 bp open reading frame(ORF) were isolated protein showing moderate homology ($35{\sim}46\%$) with the ${\Gamma}$-butyrolactone autoregulator receptors from Streptomyces sp., and this ORF was named sltR The sltR/pET-17b plasmid was constructed to overexpress the recombinant SltR protein (rSltR) in E. coli BL21 (DE3)/pLysS, and the rSltR protein was purified to homogeneity by DEAE-Sephacel column chromatography, and DEAE-5PW chromatography (HPLC). The molecular mass of the purified rSltR protein was 55 kDa by HPLC gel-filtration chromatography and 28 kDa by SDS-PAGE, indicating that the rSltR protein is present as a dimer. A binding assay with tritium-labeled autoregulators revealed that the rSltR has clear binding activity with a A-factor type autoregulator as the most effective ligand.
Background: Tobacco consumption is one of the leading causes of oral submucous fibrosis, oral cancer and even premature death. The present study was designed to compare the biochemical parameters and non-enzymatic antioxidant status and the lipid peroxidation products in pan masala tobacco users as compared with age-matched non-user controls. Methods: Pan masala and tobacco users of age $33.2{\pm}9.94$ years and age-matched controls ($31.2{\pm}4.73$ years) were enrolled for the study. Plasma levels of vitamin E, vitamin C, albumin, bilirubin, uric acid, glucose, urea, creatinine, aspartate amino transferase (AST), alanine amino transferase (ALT) were measured by standard methods. Serum malondialdehyde (MDA) levels were estimated as a measure of lipid peroxidation. Results: In the pan masala tobacco users, as compared to the controls, the level of vitamin C ($68.5{\pm}5.9$ vs $97.9{\pm}9.03{\mu}mol/L$, $p{\leq}0.05$) vitamin E ($18.4{\pm}5.3$ vs $97.9{\pm}9.03{\mu}mol/L$, $p{\leq}0.001$), albumin ($37.5{\pm}7.01$ vs $44.3{\pm}9.99g/L$, $p{\leq}0.001$), and malondialdehyde ($10.8{\pm}1.29$ vs $1.72{\pm}1.15nmol/ml$, $p{\leq}0.001$) were found to be significantly altered. Malondialdehyde was significantly correlated with vitamin E (r=1.00, p<0.001) and vitamin C (r=1.00, p<0.001) in pan masala tobacco users. Serum levels of AST ($31.0{\pm}16.77$ IU) and ALT ($36.7{\pm}31.3$ IU) in the pan masala tobacco users were significantly raised as compared to the controls (AST, $25.2{\pm}9.51$ IU, p=0.038; ALT, $26.2{\pm}17.9$ IU, p=0.038). Conclusion: These findings suggest that pan masala tobacco users are in a state of oxidative stress promoting cellular damage. Non-enzymatic antioxidants are depleted in pan masala tobacco users with subsequent alteration in the biochemical parameters. Supplementation of antioxidants may prevent oxidative damage in pan masala tobacco users.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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