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면역학적 방법을 이용한 자유생활아메바의 분류학적 접근 (Immunological approach for classification of free-living amoeba in Korea)

  • 신호준;김종환;임경일
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제30권4호
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    • pp.289-298
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    • 1992
  • Acanthnmoeba sp. YM-4의 영양형은 사상의 침상위족을 내어 전형적인 각canthamoeba 속의 특징이 관찰되었으며, 포낭(씨스트)은 외벽이 등근혐이었고 내벽이 단순한 구형이거나 다소 불규칙한 2개의 세포벽을 갖고 있었다. SDS-PAGE 결과, Acanthamoeha sp. Yhf-4는 약 16개의 주요 단백질 분획이 관찰되었는데, 2차원 전기영동 결과와 함께 Acanthamoeba sp. YM-4의 단백질 분획은 A. culbertsoni와 거의 같은 양상이 관찰되었다. Acanthamoeba sp. YM-4로 면역시킨 마우스의 비장세포와 myeloma 세포를 융합한 결과, 항체를 분비하는 17개 clone을 얻을 수 있었다. 생성된 단세포를 항체 중 isotyping을 실시하였는데 실험에 사용된 McAY 6, McAY 7, McAY 8, McAY 13, McAY 16 단세포군은 IgGl 항체를, McAY 10, McAY 11 단세포군은 19M 항체를 분비하였다. 생성된 단세포군 항체는 대부분이 아메바의 세포막에 있는 항원과 반응하였으며, EITB 실험결과, McAY 7 단세포군 항체는 43 kD에서 반응대가 관찰되었고, McAY 10 단세포군 항체는 55 kD과 105 kD에서 반응대가 관찰되었다. ELISA 방법을 이용한 단세포를 항체들과 여러 아메바 간의 교차반응실험 결과, McAY 7 단세포군 항체는 Acanthamoeba sp. YM-4에만 반응하였고, McAY 6과 McAY 10은 A. culbertsoni와도 반응하였다. 또한 McAY 11은 모든 아매바와 교차반응을 보였다.

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육우의 혈액단백질 및 효소의 유전적 변이체 (Genetic Variants of the Blood Proteins and Enzymes in Beef Cattle)

  • 상병찬;류승희;상병돈
    • 농업과학연구
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    • 제22권1호
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    • pp.69-81
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    • 1995
  • 본 연구는 축산기술연구소 대관령지원에서 사육하고 있는 Hereford, Angus 및 Charolais 육우품종에서 혈액을 채취하여 이들의 혈액내에 존재하는 transferrin(Tf), post-transferrin-2(pTf-2), albumin(Alb), post-albumin(pAlb), ceruloplasrmin(Cp), amylase-I(Am-I) 및 hemoglobin(Hb)의 혈액단백질 및 효소좌위의 유전적다형을 분석하여 이들 집단의 유전적 변이체를 조사하고자 PAGE(polyacrylamide gel electrophoresis)와 STAGE(starch gel electrophoresis)방법으로 분석하였던바 그 결과는 다음과 같다. 1. Tf좌위는 A, $D_1$, $D_2$ 및 E와 pTf-2좌위는 F와 S의 공우성 대립유전자의 지배를 받는 것으로 생각되며, 유전자형의 빈도에 있어서는 Hereford 종에서는 Tf $D_1D_2$와 pTf-2 SS 형이 각각 25 및 90%이었고, Angus종에서는 Tf $AD_1$와 pTf-2 FF형이 각각 25와 100%이었으며, Sharolais종에서는 Tf $D_1D_1$와 pTf-2 FS형이 각각 50%로 높은 빈도를 보였다. 유전자빈도에 있어서는 Hereford종에서 Tf E와 pTf-2 S 빈도가 각각 0.400과 0.900이었고, Sharolais종에서는 Tf $D_1$과 pTf-2 S가 각각 0.678 및 0.607로 높은 빈도를 보였다. 2. Alb좌위는 A, 그리고 pAlb좌위는 F와 S의 대립유전자의 지배를 받는것으로 사료되며, 유전자형 빈도에 있어서는 Hereford, Angus와 Sharolais종에서 각각 pAlb SS, FF 및 SS가 각각 70, 90 및 57.15%로 높은 빈도를 나타냈으며, pAlb의 유전자 빈도에 있어서는 Hereford와 Sharolais종에서 pAlb S가 각각 0.825와 0.750이었고, Angus종에서는 pAlb F가 0.900으로 높은 빈도를 보였다. 3. Cp 좌위는 F 및 S와 Am-I 좌위는 B와 C의 대립유전자의 지배를 받는 것으로 생각되며, 유전자형 빈도에 있어서는 Herford종에서는 Cp FF와 Am-I BB형의 빈도가 각각 100 및 85%이었고, Angus종에서는 Cp FF와 Am-I CC형이 각각 45 및 85%이였으며, Sharolais종에서는 Cp FF와 Am-I BC형이 각각 50 및 64.29%로 높은 빈도를 보였다. 유전자 빈도에서 있어서는 Herford, Angus와 Sharolais 종에서 Cp F가 각각 0.800, .875 및 0.680이었고 Hereford종에서 Am-I A가 0.800이었으며, Angus와 Sharolais종에서 Am-I C가 각각 0.875 및 0.680이었다. 4. Hb좌위 는 Hereford종과 Angus종에서는 Hb A, Sharol ais종에서는 Hb A와 B의 대립유선자가 검출 되었으며, Sharolais종에서 유전자형 빈도는 Hb AA 및 AB가 각각 57.14 및 42.88%이었고, 유전자빈도에 있아서는 Hb A와 B가 각각 0.785 및 0.215이었다.

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Herpes simplex 2형 바이러스에 대한 단클론항체 생산과 항원 분석 (The Production and Characterization of a Monoclonal Antibody to Herpes simplex Virus Type 2)

  • 최경은;이형환;조명환
    • 미생물학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.97-104
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    • 1997
  • 인간을 비롯하여 여러 동물의 생식기와 구강. 안구 점막에 수포성, 괴양성 병변을 일으키는 Herpes simplex 2형 바이러스(HSV-2)에 대한 단클론항체를 하이브리도마 기술을 이용해 생사하였다. 생산된 단클론항체 C-2는 western blotting에서 134, 86 그리고 43 kDa의 분자량을 갖는 항원을 인식하였다. C-2의 isotype은 IgM이었다. SDS-PAGE를 이용하여 HSV-2에 감염되어 원형의 다핵 거세포를 형성한 vero 세포주를 인식하였으며, 이는 HSV-2 항원이 숙주세포에서 발현되고 있음을 알 수 있다. 이 결과는 HSV-2 백신개발의 목표항원이 되는 항원검출과 HSV-2 감염 진단법 개발에 기초가 될 수 있을 것이다.

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Thermotoga maritima로부터 고온성 β-glucosidase (BgIB)의 클로닝과 필수아미노산 잔기의 확인 (Cloning and Identification of Essential Residues for Thermostable β-glucosidase (BgIB) from Thermotoga maritima)

  • 홍수영;조계만;김용희;홍선주;조수정;조용운;김훈;윤한대
    • 생명과학회지
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    • 제16권7호
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    • pp.1148-1157
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    • 2006
  • 초고온성 세균인 Thermotoga maritima로부터 ${\beta}-glucosidase$ 유전자를 클로닝한 후 대장균 숙주에서 발현시켰다. 이 효소는 salicin, arbutin, $_pNPG$과 같은 탄소원의 ${\beta}$-글루코시드 결합을 가수분해하였다. 721개의 아미노산을 암호화하는 2,166 bp의 DNA 염기서열로된 유전자이였다. 다른 ${\beta}-glucosidase$ 효소들과 단백질 유사성을 비교한 결과 glycosyl hydrolase family 3에 속하였으며 MUG-nondenaturing PAGE와 SDS-PAGE에 의해 확인된 단백질의 크기는 약 81 kDa이었다. 효소활성은 pH 7.0, $80^{\circ}C$에서 가장 높은 활성을 나타냈으며 이 효소의 아미노산 서열에 있는 두 개의 아미노산 잔기 (232번 글루탐산과 242번 아스파르트산 잔기)를 알라닌으로 치환시켜 활성이 없어지는 것으로 보아 이 두 잔기가 효소활성에 중요한 역할을 하는 것으로 추정된다.

Microbacterium sp. A-210이 생성하는 Levan fructotransferase의 정제 및 생물학적 특성에 관한 연구 (Purification and Biological Characterization of Wild-type and Mutants of a Levan Fructotransferase from Microbacterium sp. AL-210)

  • 황은영;정미숙;차재호;장세복
    • 생명과학회지
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    • 제19권9호
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    • pp.1218-1225
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    • 2009
  • DFA (Difructose anhydride)는 특유의 구조적인 안정성 때문에 당뇨병 환자를 위한 당원으로써 적합하다는 연구가 보고 되어 있다. DFA에는 4가지 type이 있는데 inulin에 의한 DFA I DFA III DFAV가 있고 levan에 의한 DFA IV가 있는 것으로 알려져 있다. 특히 DFA IV는 당뇨병 환자를 위한 당원 뿐 만 아니라 rat을 이용한 연구에서 칼슘의 흡수를 도와 준다는 보고가 있었다. 이러한 DFAIV를 생성하는 데 쓰이는 Microbacterium sp. AL-210에서 유래한 LFTase (Levan fructotransferase)의 wild-type과 mutants (D63A, D195N, N85S)의 구조적 특성을 밝히기 위해 정제하였다. LFTase의 wild-type과 mutants들을 대량 발현시킨 후 흡착 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피 그리고 젤 여과 크로마토그래피를 이용하여 고순도로 분리 정제하였으며 이를 SDS-PAGE를 통하여 확인하였다. 분리 정제된 단백질을 JNET 이차 구조 예측 프로그램, solubility 측정, CD (원 편광 이색성 분광편광계), fluorescence spectroscopy (형광분석법), DSC (시차주사열량계)를 이용하여 분석하였다. 또한 다중 정렬과 2차 구조 예측 프로그램을 이용하여 wild-type의 2차 구조를 분석하였다. Solubility 측정에서 가장 적합한 온도는 $55^{\circ}C$, 최상의 pH는 7.5로 나타났다. CD 분석에서 wild-type과 비교한 결과 다른 mutant에 비해 N85S의 $\alpha$-helix가 많이 감소한 것과 $\beta$ strand와 random coil이 증가한 것을 확인하였다. 또한 DSC 분석을 통해 wild-type이 다른 mutants에 비해 안정적인 구조를 지닌 것을 확인하였다. 형광분석에서 N85S가 wild-type과 가장 유사하게 나타났으며 D63A와 D195N은 wild-type에 비해 높은 강도를 나타내었다. 또한 wild-type의 sequence를 Exo-inulinase from Aspegillus awamori, a plant fructan 1-exohydrolase from Cichorium intybus 그리고 invertase from Thermotogo maritime (Tm)의 sequence와 다중 정렬한 결과 Exo-inulinase와 높은 identity를 보였다.

단립종(短粒種)벼의 박층흡습방정식(薄層吸濕方程式) (Thin-layer Rewetting Equation for Short Grain Rough Rice)

  • 정춘식;금동혁;박승제
    • Journal of Biosystems Engineering
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    • 제12권2호
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    • pp.38-43
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    • 1987
  • An experimental study was conducted to develop a thin-layer rewetting equation of short grain rough rice of Akihikari variety. Four thin-layer rewetting equations were experimentally determined from $25^{\circ}C$ to $45^{\circ}C$ and 70%RH to 85%RH conditions. Diffusion, Henderson, Page, and Thompson equations widely used as thin-layer drying equations were selected. Experimental data were fitted to these equations using linear regression analysis except diffusion equation. The diffusivity in the diffusion equation was determined by optimization method. Four equations were highly significant. In order to compare the goodness of fit of each equation, the error mean square of each equawas calculated. The diffusion model was not a very good model because the error mean square was very large. The other three models showed the same level or error mean square and could predict satisfactorily the rewetting rate or short grain rough rice.

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Agrobacterium sp. ATCC31750에 대한 beta-l,3-glucan 합성 대사경로의 주요 단백질 검출 (Identification of Key beta-1,3-glucan Synthesis Enzymes in Agrobacterium sp. ATCC31750)

  • 김려화;이중헌
    • KSBB Journal
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    • 제19권5호
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    • pp.406-409
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    • 2004
  • Matrix Assisted Laser Desorption ionization Time of Flight (MALDI-TOF) was used for enzymes identification related to B -1,3-glucan synthesis. Agrobacterium sp. ATCC31750 was cultivated with two stage Continuous Stirrer Tank Reactor (CSTR) and the cells were harvested and their protein profiles were analysed by two dimensional electrophoresis. The specific enzyme spot was treated with trypsin and ana lysed by MALDI-TOF to get peptide molecular weight. The peptide molecular weights were matched with Agrobacterium tumefacience's Data Base from the matrix science site, then could identify the avaliable key enzymes. In this study, we identified key metabolite of synthesis of beta-1,3-glucan, such as glucose-6-phosphate isomerase, phosphoglucomutase, B-1,3-glucan synthase and glucokinase, and we also identified uracil phosphoribocyl transferase and Ribosome recycling factor also.

시뮬레이션에 의한 순환식(循環式) 벼 건조(乾燥) -순건조(純乾燥) 및 템퍼링 시간(時間)의 영향(影響)- (Continuous Flow Rice Drying Using Simulation -Resident and Tempering Time Effects-)

  • 금동혁;알 폴 씽
    • Journal of Biosystems Engineering
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    • 제11권2호
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    • pp.41-54
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    • 1986
  • 순환식(循環式) 벼 건조과정(乾燥科程)을 건조(乾燥)-템퍼링의 연속 과정으로 간주하여 이를 해석(解析)할 수 있는 시뮬레이션 모델을 개발하였으며, 시뮬레이션 결과치와 실험치가 잘 일치하였다. 특히 벼의 박층건조방정식(薄層乾燥方程式)으로 Page 형의 방정식(方程式)과 수분확산방정식(水分擴散方程式)을 이용한 모델을 비교하였으며, 수분확산계수는 백미부(白米部), 쌀겨부(部) 및 왕겨부(部)로 나누어 고려하였다. 시뮬레이션 모델을 이용하여 순건조(純乾燥) 및 템퍼링 시간(時間)이 건조속도(乾燥速度), 소요(所要)에너지 및 곡물품질(穀物品質)에 미치는 영향을 분석(分析)하고 적절한 순건조시간(純乾燥時間) 및 템퍼링 시간을 제시하였다.

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An Investigation of the Visual-Mental Capability of Pre- and In-Service Mathematics Teachers: A Tale of Two Cones and One Cube

  • Barkai, Ruthi;Patkin, Dorit
    • 한국수학교육학회지시리즈D:수학교육연구
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    • 제18권1호
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    • pp.41-54
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    • 2014
  • This study investigated the visual-mental capability of pre-service and in-service mathematics teachers as well as academicians making a career change to mathematics teachers with regard to manipulations of two geometric shapes (from 2- to 3-dimensional). Moreover, it investigated whether there are differences between the visual-mental capability of these participant groups. Findings illustrate that most of the participants demonstrate an adequate visual capability relating to the task dealing with a cube. Conversely, very low percentage of participants manifested a visual-mental capability in a task requiring the identification of a solid resulting from rotation of a square page, whose diagonal serves as the rotation axis. The study indicates that learners' high visual view should be developed in order to enhance their visual-mental capability.

KMTNet 자료처리 시스템 설계와 측광데이터베이스 구축 (DESIGN OF DATA REDUCTION SYSTEM AND CONSTRUCTION OF PHOTOMETRIC DATABASE FOR KMTNet)

  • 김동진;이충욱;김승리;박병곤;이재우
    • 천문학논총
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    • 제24권1호
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    • pp.83-91
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    • 2009
  • We have designed data processing server system to include data archiving, photometric processing and light curve analysis for KMTNet (Korea Microlensing Telescope Network). Outputs of each process are reported to the main photometric database, which manages the whole processing steps and archives the photometric results. The database is developed using ORACLE 11g Release 2 engine. It allows to select objects applying any set of criteria such as RA/DEC coordinate and Star ID, etc. We tested the performance of the database using the OGLE photometric data. The searching time for querying 70,000,000 records was under 1 second. The database is fully accessed using query forms via web page.