• 제목/요약/키워드: 2-D LC MS/MS

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Anti-Melanogenic Effect of Dendropanax Morbiferus and Its Active Components via Protein Kinas e A/Cyclic Adenos ine Monophosphate-Responsive Binding Protein-and p38 Mitogen-Activated Protein Kinase-Mediated Microphthalmia-Associated Transcription Factor Downregulation

  • Bohyun Yun;Ji Soo Kim;Jung Up Park
    • 한국자원식물학회:학술대회논문집
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    • 한국자원식물학회 2022년도 추계학술대회
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    • pp.104-104
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    • 2022
  • Dendropanax morbiferus H. Lev has been reported to have some pharmacologic activities and also interested in functional cosmetics. We found that the water extract of D. morbiferus leaves significantly inhibited tyrosinase activity and melanin formation in α-melanocyte stimulating hormone (MSH)-induced B16-F10 cells. D. morbiferus reduced melanogenesis-related protein levels, such as microphthalmia? associated transcription factor (MITF), TRP-1, and TRP-2, without any cytotoxicity. Two active ingredients of D. morbiferus, (10E)-9,16-dihydroxyoctadeca-10,17-dien-12,14-diynoate (DMW-1) and (10E)-(?)-10,17-octadecadiene-12,14-diyne-1,9,16-triol (DMW-2) were identified by testing the anti-melanogenic effects and then by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) analysis. DMW-1 and DMW-2 significantly inhibited melanogenesis by the suppression of protein kinase A (PKA)/cyclic AMP (cAMP)-responsive binding protein (CREB) and p38 MAPK phosphorylation. DMW-1 showed a better inhibitory effect than DMW-2 in α-MSH-induced B16-F10 cells. D. morbiferus and its active component DMW-1 inhibited melanogenesis through the downregulation of cAMP, p-PKA/CREB, p-p38, MITF, TRP-1, TRP-2, and tyrosinase. These results indicate that D. morbiferus and DMW-1 may be useful ingredients for cosmetics and therapeutic agents for skin hyperpigmentation disorders.

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닥나무 추출물의 항산화 활성 및 성분 분석 (Antioxidative Activity and Component Analysis of Broussonetia kazinoki SIEB Extracts)

  • 박수아;하지훈;박수남
    • 공업화학
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    • 제24권2호
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    • pp.177-183
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    • 2013
  • 본 연구에서는 닥나무 추출물의 항산화 활성과 성분 분석에 관한 연구를 실시하였다. 닥나무 추출물은 우수한 free radical(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 소거활성($FSC_{50}=8.53{\mu}g/mL$)을 나타내었다. Luminol-의존성 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$계에서 생성된 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)에 대한 에틸아세테이트 분획의 총항산화능(OSC50)은 $1.69 {\mu}g/mL$이었다. 닥나무 추출물에 대하여 $^1O_2$으로 유도된 사람 적혈구의 광용혈 실험 결과 에틸아세테이트분획은 $10{\mu}g/mL$의 낮은 농도에서 ${\tau}_{50}$이 183.3 min으로 대표적인 항산화 물질로 알려진 $\alpha$-tocopherol (${\tau}_{50}$ = 38.00 min)보다 매우 큰 세포보호 효과를 나타내었다. TLC, HPLC, LC/ESI-MS/MS 및 $^1H$-NMR을 이용하여 닥나무 추출물 에틸아세테이트 분획의 성분 분석을 수행하였다. 그 결과, 닥나무 추출물 에틸아세테이트 분획은 kazinol류의 kazinol J와 플라보노이드류인 luteolin을 함유하고 있음을 확인하였다. 이상의 결과들은 닥나무 추출물이 $^1O_2$ 혹은 다른 ROS를 소광시키거나 소거함으로써, 또는 이에 대항하여 세포막을 보호함으로써, 생체계 특히 태양 자외선에 노출된 피부에서 항산화제로서 작용할 수 있음을 가리키며 기능성 화장품 원료로서 응용 가능성이 있음을 시사한다.

체외에서 ESI-MS/MS 탐지에 연결된 HPLC에 의한 Entacapon의 수량화: 생물학적 동등성 연구에 적용 (Quantification of Entacapone in Human Plasma by HPLC Coupled to ESI-MS/MS Detection: Application to Bioequavalence Study)

  • Balasekhara Reddy., Ch.;Baburao., Ch.;Chandrasekhar., K.B.;Kanchanamala., K.;RihanaParveen., S.K.;Ravikumar., Konda
    • 대한화학회지
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    • 제54권5호
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    • pp.523-532
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    • 2010
  • 제안된 방법은 국제표준(IS)인 Entacapone-d10(EAD10)을 사용하여 체외에서 Entacapon(EA)의 정량화를 위한 간단하고, 감도가 좋고, 명확한 액체 크로마토그래피-직렬 질량 분석법(LC-ESI-MS/MS)이다. 크로마토그래피 분리는 Zorbax SB-C18에서 수행되었고, $2.1{\times}50\;mm$, $5\;{\mu}m$ 컬럼과 10 mM Ammonium formate (pH 3.0)로 구성된 이동상에서 수행되었다: 0.7 mL/min 유속의 아세토나이트릴(60:40 v/v)은 액체-액체 추출을 따른다. EA와 EAD10은 다중 반응 탐색법(MRM)에서 수소부가물을 가지고 상대적으로 포지티브 모드인 m/z $306.1{\rightarrow}233.1$$316.3{\rightarrow}233.0$에서 수소부과물을 가지고 측정되었다. 그 방법은 상관계수($r^2$) 0.993 이상을 갖는 1.00 - 2000.00 ng/mL의 선형 농도 범위 이상으로 입증되었다. 하루 중과 하루 이내에 3.60에서 7.30과 4.20에서 5.50% 이내의 정밀성과 97.30에서 104.20과 98.30에서 105.80% 이내의 정확도는 EA를 위해 입증되었다. 이러한 방법은 건강한 인도인 자원자들의 생물학적 동등성 연구에서 성공적으로 적용되었다.

Quantitative determination of pseudoephedrine in human plasma by reversed-phase liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry

  • Kim, Jin-Ki;Cho, Jung-Hye;Woo, Jong-Soo;Kim, Chong-Kook
    • 대한약학회:학술대회논문집
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    • 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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    • pp.394.2-394.2
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    • 2002
  • A sensitive and selective reversed-phase LC-ESI-MS method to quantitate pseudoephedrine in human plasma was developed and validated. Phenacetin was used as an internal standard. Samples were prepared simply by acetonitrile precipitation without an evaporation step. Chromatographic separation was achieved on a XTerra MS C18 column ($150{times}2.1$ mm I.D.. 3.5 $\mu\textrm{m}$ particles). using gradient elution with 0.5% (v/v) trifluoroacetic acid (TFA) in water and 0.5% (v/v) TFA in methanol at a flow-rate of 0.1 ml/min. (omitted)

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Iron Starvation-Induced Proteomic Changes in Anabaena (Nostoc) sp. PCC 7120: Exploring Survival Strategy

  • Narayan, Om Prakash;Kumari, Nidhi;Rai, Lal Chand
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제21권2호
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    • pp.136-146
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    • 2011
  • This study provides first-hand proteomic data on the survival strategy of Anabaena sp. PCC 7120 when subjected to long-term iron-starvation conditions. 2D-gel electrophoresis followed by MALDI-TOF/MS analysis of iron-deficient Anabaena revealed significant and reproducible alterations in ten proteins, of which six are associated with photosynthesis and respiration, three with the antioxidative defense system, and the last, hypothetical protein all1861, conceivably connected with iron homeostasis. Iron-starved Anabaena registered a reduction in growth, photosynthetic pigments, PSI, PSII, whole-chain electron transport, carbon and nitrogen fixation, and ATP and NADPH content. The kinetics of hypothetical protein all1861 expression, with no change in expression until day 3, maximum expression on the $7^{th}$ day, and a decline in expression from the $15^{th}$ day onward, coupled with in silico analysis, suggested its role in iron sequestration and homeostasis. Interestingly, the up-regulated FBP-aldolase, Mn/Fe-SOD, and all1861 all appear to assist the survival of Anabeana subjected to iron-starvation conditions. Furthermore, the $N_2$-fixation capabilities of the iron-starved Anabaena encourage us to recommend its application as a biofertilizer, particularly in iron-limited paddy soils.

국내산 포도와 수입산 포도의 페놀계화합물 함량 (Phenolic compounds in domestic and imported grape cultivars in Korea)

  • 정성민;김수진;허윤영
    • 한국식품과학회지
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    • 제52권3호
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    • pp.205-211
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    • 2020
  • 국내산 포도 품종 'Campbell Early', 'Kyoho', 'Heukbosuk', 'Hongju Seedless (SDS)'와 수입 포도 'Crimson SDS', 'Thomson SDS'의 페놀계 화합물을 비교하기 위해 LC-MS/MS와 HPLC를 이용하여 함량을 비교하였다. 수입포도 'Crimson SDS'와 'Thompson SDS' 품종은 국내산 포도 품종보다 가벼운 과피무게(300-350 mg)와 단단한 경도(5.2-5.6 kg·f)를 가진 것으로 조사되었다. 'Crimson SDS' 품종의 과피에 함유된 페놀계 화합물 함량은 다른 포도 품종에 비해 전반적으로 높았지만, resveratrol (25-29 mg/kg), quercetin (350-380 mg/kg), myricetin (31-32 mg/kg) 함량은 'Hongju SDS' 품종과 유사하였다. Anthocyanin 함량은 포도 품종에 따라 달랐는데, 'Hongju SDS' 품종은 Delphinidin-3-glucoside의 함량이 높았고, 'Crimson SDS' 품종은 Peonidin-3-glucoside의 함량이 높았다. 페놀 화합물의 함량은 포도 부위별 다른 함량을 나타냈고, catechin, epicatechin, procyanidin B1, B2는 포도 종자에서 전형적인 화합물이었다. 과피를 함께 먹을 수 있는 포도품종은 과피에 포함된 유용한 phenolic compounds를 효과적으로 이용할 수 있다.

구척으로부터 신경재생 효능 성분 분리 (Isolation of the Efficacy Constituent for Neuronal Regeneration from Cibotium barometz)

  • 김상태;한용남;손연경;장형석;김수장;신준식
    • 약학회지
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    • 제46권6호
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    • pp.398-404
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    • 2002
  • A phytochemical study on the root of Cibotium barometz J. Smith led to the isolation of onitin (I), daucosterol (II) and a new compound (III). Compound III was characterized as 2-Ο-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-3-Ο-[$\alpha$-D-galactopyranosyl-(1"-6")-Ο-$\beta$-D-galactopyranosyl] glycerol, named shinbarometin by $^1$H-, $^{13}$ C-NMR and LC/MS data. Compound III exerted an induced neuronal regeneration on nogo-A induced neuroblastoma cells.

2DSpotDB: A Database for the Annotated Two-dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis of Pathogen Proteins

  • Kim, Dae-Won;Yoo, Won-Gi;Lee, Myoung-Ro;Kim, Yu-Jung;Cho, Shin-Hyeong;Lee, Won-Ja;Ju, Jung-Won
    • Genomics & Informatics
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    • 제9권4호
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    • pp.197-199
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    • 2011
  • The biological interpretation of two-dimensional (2D) gel electrophoresis experiments is a key step toward understanding the functions of biological systems. We here present a web-based integrated database, called 2DSpotDB, for the management of proteome data derived from several pathogens. The 2DSpotDB was established as a part of the management of a pathogen proteome project at the Korea National Institute of Health. The goals of the 2DSpotDB implementation are to store and define important pathogen genes, retrieve information obtained by 2D polyacrylamide gel electrophoresis and mass spectrometry, and create an integrated system to provide pathogen proteome information for biological scientists. This database currently contains 14 gels and information on 387 protein spots, among which 329 proteins were identified and annotated.

QuEChERS법과 LC-MS/MS를 이용한 농산물 중 Fenpropimorph 시험법 개발 및 검증 (Development and Validation of an Analytical Method for Fenpropimorph in Agricultural Products Using QuEChERS and LC-MS/MS)

  • 이한솔;도정아;박지수;조성민;신혜선;장동은;최영내;정용현;이강봉
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제34권2호
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    • pp.115-123
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    • 2019
  • 본 연구는 농산물 중 잔류허용기준 신설 예정 농약인 펜프로피모르프의 안전 관리를 위한 공정 시험법을 개발하기 위하여 수행되었다. 펜프로피모르프는 모르폴린계 살균제로 스테롤 생합성을 저해하여 곡류와 채소류에 발병하는 녹병과 흰가루병 및 바나나에 발병하는 시가토카병을 방제 하는 데 사용되고 있다. 현재 국내에는 농산물 중 펜프로피모르프의 잔류물의 정의 및 잔류허용기준이 설정되어 있지 않고, 수입식품 바나나에 대한 잔류허용기준을 신설할 예정이다. 이에 농산물 중 잔류농약 분석 및 검사를 위한 공정 시험법 마련이 시급하여 본 연구에서는 대표농산물 5종(현미, 감자, 대두, 감귤, 고추)을 대상으로 시험법을 개발하고자 하였다. 따라서 QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe)법을 이용한 추출 및 정제법을 최적화하여 LC-MS/MS에 의한 분석법을 확립하였다. 펜프로피모르프의 시험법 정량한계는 0.01 mg/kg이며 5종의 농산물에 0.01, 0.1 및 0.5 mg/kg의 처리농도로 회수율 실험을 한 결과 평균 회수율은 90.9~110.5%이었고, 상대표준편차는 5.7% 이하로 조사되었다. 또한 실험실간 검증 결과 두 실험실간 회수율 결과에 따른 평균값은 88.6~101.4%이며 변이계수(CV) 또한 14.6% 이하로 조사되어 국제식품규격위원회 가이드라인(CAC/GL 40-1993, 2003)의 잔류농약 분석 기준 및 식품의약품안전평가원의 '식품등 시험법 마련 표준절차에 관한 가이드라인(2016)'에 적합한 수준임을 검증하였다. 따라서 본 연구에서 개발한 시험법은 국내 및 수입 농산물 중 펜프로피모르프의 안전 관리를 위한 공정시험법으로 활용될 수 있으며 잔류물의 정의 및 잔류허용기준을 설정하는 데 기초자료로써 활용 가능할 것이다.

초임계 이산화탄소를 이용한 maca [Lepidium meyenii]의 지질 추출물로부터 macamides 분리 및 동정 (Isolation and Identification of Macamides from the Lipidic Extract of Maca [Lepidium meyenii] using Supercritical Carbon Dioxide)

  • 이승호;강정일;이상윤;하효철;송영근;변상요
    • KSBB Journal
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    • 제23권2호
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    • pp.153-157
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    • 2008
  • 생리활성이 뛰어난 마카의 지질 분획으로부터 macamides를 분리 동정하기 위해 본 연구에서는 초임계 이산화탄소 추출을 통해 마카 지질 추출물을 제조하여 재순환 분취용 HPLC로부터 2종의 macamides 물질을 분리 정제하였다. 분리된 2종의 macamides 물질의 구조 해석을 위해 LC/MS와 $^1H$-NMR과 $^{13}C$-NMR 분석을 실시한 결과 분자량이 384인 N-benzyl-5-oxo-6E,8E-octadecadienamide와 분자량이 346인 N-benzylhexadecanamide로 동정되었다. 본 연구를 통해 분리된 2종의 macamides는 향후 마카분말 및 마카제품의 macamides의 지표물질로 활용이 가능할 것으로 사료된다.