Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.28
no.7
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pp.697-703
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2006
Endocrine disruptors were measured with GC/MS in effluents discharged from sewage treatment processes in pilot scale for the purpose of water reuse. From that analysis, we compared the removal rate of them by treatment processes. Nonylphenol was mainly detected in effluents and high concentration from 0.36 to 0.94 ${\mu}g/L$. $17{\beta}$-estradiol(E2) and $17{\alpha}$-ethynylestradiol(EE2) were detected as below the limit of detection in effluent. Endocrine disruptors were removed effectively in the range from 50 to 100% by treatment process. EC50 value($9.0{\times}10^{-3}$ M) of $17{\beta}$-estradiol(E2) by dose response curve of E-screen assay has higher than that of bisphenol A($2.736{\times}10^{-5}M$) and p-octylphenol($9.760{\times}10^{-6}$ M). These results showed that alkylphenols have lower relative estrogen potency than other estrogens such as $17{\beta}$-estradiol(E2). Calculated estrogenic activity(ng-EEQ/L) was 2 times higher than measured total estrogenic activity which estimated by E-screen assay. Moreover estrogenic activity of effluent by treatment process showed very low as below 1 ng-EEQ/L.
KIM Yoon;KIM Woo Jin;BAEK Hea Ja;KIM Kyung Kil;BANG In Chul;HAN Chang Hee
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.30
no.3
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pp.480-487
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1997
Vitellogenin (Vg) was purified from plasma of $estradiol-17\beta(E_2)-treated$ spotted flounder, verasper variegatus, by preripitation with cold distilled water, followed by fractionation using a Sepharose CL-6B column chromatography. $E_2-induced$ protein was identified as Vg by SDS-PAGE and western blot analysis. The molecular weight of the purified Vg was estimated 175 kD as determined by SDS-PAGE. In order to measure the Vg level, monoclonal antibodies against Vg were produced by hybridoma technique. Purified Vg was immunized into Balb/c mice and then the spleen cells from mice were fused with NS-1 myeloma cells. The hybridoma cells were screened by enzyme-linked immunosorbent assay (WLISA) and subcloned by limiting dilution. The hybridoma clones which secreted antibodies highly reactive to the purified Vg were designated as 4D6. Its specificity was demonstrated by western blot from plasma of untreated, $E_2-treated$ male fish, and purified Vg.
In the present study, we examined the effects of tamoxifen and LY117018 on various parameters for the estrogenic actions in order to understand the mechanism by which tamoxifen and LY117018 act on the uterine cells in 21-23 day old immature rats. Tamoxifen and LY117018 stimulated uterine weight and uterine contents of DNA, protein, and peroxidase activity in the absence of estradiol while inhibited above parameters in the presence of estradiol. Both cytosolic and nuclear progesterone receptors were increased by the treatment of tamoxifen and LY117018 as well as estradiol, but estradiol-induced increase in the progesterone receptors were reduced by the treatment of antiestrogens. These effects were enhanced by the multiple injections of antiestrogens. It seemed that tamoxifen was more agonistic than LY117018 but less antagonistic than LY117018, judged by their effects on various parameters for the estrogenic action. The affinities of estradiol, tamoxifen, and LY117018 for the estrogen receptor were $0.17{\pm}0.01nM(100%)$, $1.10{\pm}0.01nM(6.3%)$, and $0.23{\pm}0.01nM(77%)$, respectively. Furthermore, LY117018 was the competitive ligand for the estrogen receptor in dose-related manner but tamoxifen was not. Following estradiol treatment, nuclear estrogen receptor was sharply increased by 1 h, reaching the maximum by 16 h, while tamoxifen and LY117018 slightly increased nuclear estrogen receptor by 1 h and then decreased thereafter. It is therefore concluded that LY117018 is a competitive antagonist for the estrogen receptor with less estrogenic activity, compared to tamoxifen with low affinity to the estrogen receptor, and tamoxifen may act through other binding site than the estrogen receptor.
This experiment was conducted to examine the $PGF{2{\alpha}}$-induced changes in concentrations of ovarian and pituitary hormones of Korean native goats. Each goats received two injections of $PGF{2{\alpha}}$ (5mg each ; 3 hours apart) on day 10 of the estrous cycle. Jugular venous blood samples were collected at 0, 3, 6, 12, 24, 48 and 72 hours postinjection for quantification of LH, FSH, prolactin, progesterone and estradiol-$17{\beta}$. The results were summarized as follows ; The blood serum concentration of progesterone was decreased from pretreatment level of $4.15{\pm}1.8ng/ml$ to $2.52{\pm}1.2ng/ml$ (about 60%) within 3 hours and to $0.81{\pm}0.3ng/ml$ at 12 hours of the $PGF{2{\alpha}}$ injection. After 12 hours, the concentrations of progesterone were less than 1.02ng/ml by 72 hours postinjection. The concentrations of estradiol-$17{\beta}$ following treatment increased (p < 0.05) over the 72 hours. Initial concentration of LH was $3.0{\pm}0.3{\mu}IU/ml$. After treatment with $PGF{2{\alpha}}$, concentrations of LH increased within 12 hours but declined 12 and 72 hours from $4.1{\mu}IU/ml$ to $2.5{\mu}IU/ml$. Prior to administration of $PGF{2{\alpha}}$, mean concentration of FSH was $3.5{\pm}0.5{\mu}IU/ml$. Concentrations of FSH declined over time in goats treated with $PGF{2{\alpha}}$ on day 10 postestrus. The mean prolactin concentrations in the blood serum after $PGF{2{\alpha}}$ treatment were not significantly different from those of the pretreatment. It is concluded that the initial increase in LH is dependent on a decrease in serum progesterone and differences in patterns of secretion of gonadotropins might be caused by differences in progesterone or progesterone-estradiol ratio when luteal regression is induced on day 10 of the estrous cycle.
The study was designed to investigate the effects of progesterone and estrogen on the uterus of rats by immunohistochemical methods using Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA) antibody. Eighteen female rats(Wistar), weighing initially about 300g, were ovariectomized. These rats were divided into four groups, progesterone-treated group, estrogen-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and control group, progesterone-treated group was injected with 1mg of progesterone per rat per day for 2 days and estrogen-treated group with $20{\mu}g$ of $17{\beta}-estradiol$ for 3 days and estrogen+progesterone-treated group with $17{\beta}-estrdiol$ for 3 days and then with progesterone for 2 days as above. In gross findings, the uteri were markedly hypertrophied by estrogen treatment but were not affect in size by progesterone treatment. Immunohistochemical investigation was performed on the cell types with higher appearance of PCNA positive reaction cells in four groups. The groups with higher appearance of the stromal cells were ordered as estrogen-treated group, progesterone-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and control group. The muscle cells were ordered as progesterone-treated group, estrogen-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and control group. Positive reaction cells of the stromal cells were total 4.6 times higher than those of muscle cells. Therefore, the affect of the hypertrophy on the uterus by estrogen was larger than those of progesterone and affect on the uterus by stromal cells were larger than those of muscle cells. The group with more PCNA positive reaction cells of luminal epithelial cells were ordered as control group, progesterone-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and estrogen-treated group, and glandular epithelial cells were ordered as estrogen+progesterone-treated group, progesterone-treated group, control group, and estrogen-treated group. It was suggested that estrogen and progesterone did not affect on the proliferating cells of luminal epithelial cells and affection of progesterone on the development of glandular epithelial cell was larger than that of estrogen.
The aim of this study was to assess the precision of the estimates of the time of estrous cycle, optimal breeding and ovulation derived by vaginal cytology. The thirteen Korea Jin-do dogs were examined the vaginal cytology, plasma estradiol-17$$\beta $ and progesterone assay during the estrous cycle. Day 0 was the day of the first male acceptance. The main change of vaginal cytology during the estrous cycle was the high proportion of anuclear cell and erythrocyte in proestrus, superficial cell, anuclear cell and erythrocyte in estrus, parabasal cell, large intermediate cell and leukocytes in diestrus, and parabasal cell and small intermediate cell in anestrus, respectively. These data indicated that vaginal cytology was reliable method for estimating estrous cycle in Korea Jin-do dogs. In the cell indices during estrus the maximum eosinoghilic index was $92.0{\pm}$2.6 (Mean{\pm} SEM$)% at Day 2 and the maximum cornification indez was $96.0{\pm}1.3%$ at Day 2, respectively. The eosinothilic indez and cornification indez of up to 70% were found at Day -1 to Day 5 and Day -6 to Day 8, and up to 80% at Day 1 to Day 4 and Day -4 to Day 6, respectively. From these data it was presumed that eosinophilic index was more reliable index for monitoring optimal breeding time than cornification indexm because eosinophilic index peak period was shorter than cornification indeX peak period and Day 2 was the day of ovulation. Therefore, optimal breeding time was the eosinophilic index peak period, more than 80% of eosinoghilic index. The $estradiol-17{\beta}$ peak, with 3 days delayed when progesterone concentration was $4.5{\pm}0.5 ng/ml$. These data estimated that the ovulation time was the day of eosinophilic index peak, Day 2. breeding time and pvulation time in Korea Jin-do dogs.
This study was designed to record the ovarian response towards a combined administration of heterologous buffalo FSH (buFSH) and LH (buLH) in goats. The impact of such a treatment on ovarian structures and on the plasma profile of the ovarian sex steroids (estradiol $17-{\beta}$ and progesterone) was studied. The buFSH and buLH were isolated from the buffalo pituitaries involving a procedure of ethanolic extraction, acetone precipitation followed by metaphosphoric acid - ammonium sulphate fractionation. Both gonadotrophin samples prepared were found biologically active and potent. There was an increase in the total number of follicles in the treated group ($12.66{\pm}1.24$) vis-a-vis the control group ($8.50{\pm}2.06$). However, the percentage ($51.48{\pm}6.37$) of large follicles were found reduced ($23.74{\pm}5.93$) following the treatment. Again the number of corpora lutea were observed significantly higher ($2.33{\pm}0.47C.L.$) in the treated group than (1 C. L.) in the control group. The peak plasma estradiol- $17{\beta}$ levels achieved, were much higher ($17.16{\pm}9.52pg/ml$) in the treated group, than the peak ($7.22{\pm}1.67pg/ml$) achieved in the control group. Similar trend was observed with respect to the progesterone levels (higher in the treated group). This study thus indicated that, a combined administration of heterologous buffalo FSH and LH to goats speeded up development of larger follicles nearing the ovulation stage. This population of the follicles subsequently got reduced and lead to the formation of the increased number of the corpora lutea observed in this study.
Lee, Nam Kyung;Jang, Kyoung Hwa;Lee, Jong Tae;Park, Hee Won;Han, Sung Tai;In, Gyo
Natural Product Sciences
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v.25
no.1
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pp.49-58
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2019
Eleven steroid hormones (SHs: androstene-3,17-dione, estrone, ${\beta}$-estradiol, ${\alpha}$-estradiol, testosterone, dehydroepiandrosterone, $17{\acute{a}}$-hydroxyprogesterone, medroxyprogesterone, megestrol acetate, progesterone, and androsterone) were detected from New Zealand deer (Cervus elaphus var. scoticus) velvet antler (NZA, 鹿茸 ). A method for the quantification of eleven SHs was established by using ultraperformance liquid chromatography (UPLC)-MS/MS. The linearities ($R^2$ > 0.991), limits of quantification (LOQ values, 0.3 ng/mL to 23.1 ng/mL), intraday and interday precisions (relative standard deviation: RSD < 2.43%), and recovery rates (97.3% to 104.6%) for all eleven SHs were determined. In addition, a method for the quantification of three 7-oxycholesterols (7-O-CSs: 7-ketocholesterol, $7{\alpha}$-hydroxycholesterol, and $7{\beta}$-hydroxycholesterol) in the NZA was established by using an HPLC-photodiode array (PDA) method. The linearities ($R^2$ > 0.999), LOQ values (30 ng/mL to 350 ng/mL), intraday and interday precisions (RSD < 1.93%), and recovery rates (97.2% to 103.5%) for the three 7-O-CSs were determined. These quantitative methods are accurate, precise, and reproducible. As a result, it is suggested that the five steroid compounds of androstene-3,17-dione, androsterone, 7-ketocholesterol, $7{\alpha}$-hydroxycholesterol, and $7{\beta}$-hydroxycholesterol could be marker steroids of NZA. These methods can be applied to quantify or standardize the marker steroids present in NZA.
In order to evaluate estrogenic compounds in brown algae, an in vitro test system for the verification of estrogenic activity was applied. Fractions from ethanol extracts of each brown alga were prepared by a systematic fractionation procedure with solvents such as $H_2O$, hexane, butanol and methanol. Aqueous fractions of brown algae showed the highest estrogenic activities. Estrogenic activities of $500\;{\mu}g/ml$ aqueous fractions of Undaria pinnatifida and Laminaria japonica showed almost the same strength as that of $10^{-7}\;M$ standard solution ($17{\beta}$-estradiol). Furthermore, estrogenic activities of $500\;{\mu}g/ml$ aqueous fractions of Ecklonia stolonifera and Porphyra suborbiculate represented higher activities than that of $10^{-8}\;M$$17{\beta}$-estradiol. These observations suggest that aqueous fractions of all these brown algae are expected to possess estrogenic compounds and could be developed as estrogenic agents for postmenopausal disorder.
The occurrence of endocrine disrupting compounds (EDCs), chemicals that interfere with human hormone system, are increasing in the freshwater, waste water and subsurface as well. In this study, we determined the reactivity of three EDCs in the presence of birnessite. In aqueous phase, bisphenol A, 2,4-dichlorophenol and 17${\beta}$-estradiol, which possesses phenoxy-OH, were very rapidly transformed by birnessite: up to 99% of initial concentrations (50 mg/L for bisphenol A, 100mg/L for 2,4-dichlorophenol, and 1.5mg/L for 17${\beta}$-estradiol) were destroyed within 60 minutes. Especially, bisphenol A was the most reactive chemical, disappearing by 99% in a few minutes. The reaction occurred on the surface of birnessite, showing a linear increase of first-order kinetic constants with the increase of the surface area of birnessite. In soil slurry phase, the reactivity of birnessiteto EDCs was faster than in aqueous phase probably due to the cross coupling reaction of phenoxy radicals with soil organic matter. Considering the rapid transformation of the EDCs in the both phases, this oxidative cross coupling reaction mediated by birnessite would be an effective solution for the remediation of EDCs in environmental media, especially in soil.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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