We examined the genetic diversity in intra-populations of Korean shiner, Coreoleuciscus splendidus, in six major rivers (Bukhan, Namhan, Geum, Osipcheon, Nakdong and Seomjin river) of Korea based on two different mitochondrial genes, the mitochondrial cytochrome b and the 16S rRNA. Analysis of sequence variation in a 657-bp segment of the mitochondrial cytochrome b gene revealed deep divergence among populations (98.2~99.9%) and high genetic diversity from geographically isolated populations. Intra-specific variation in this 697-bp segment of the 16S rRNA gene sequences was very low and nearly identical. Six isolate populations of C. splendidus showed a high similarity (97.7%~99.7%). This result may be indicative of a complex history of connection and isolation of the rivers in the Korea peninsula.
An actinobacterial strain designated Gordonia sp. MMS17-SY073 (=KCTC 49257) was isolated from a coastal soil of an island, and its complete genome was analyzed. A single contig consisting of 5,962,176 bp with the G + C content of 67.4% was obtained, and the annotation resulted in 5,201 protein-coding genes, 6 rRNA genes and 45 tRNA genes. Strain MMS17-SY073 was closest to the type strain of Gordonia soli based on the 16S rRNA gene sequence comparison, sharing 98.5% sequence similarity. A number of biosynthetic gene clusters for secondary metabolites, non-ribosomal peptide synthetase types in particular, could be identified from the genome.
We investigated the phylogenetic diversity of ammoniaoxidizing bacteria (AOB) in Yellow Sea continental shelf sediment by the cloning and sequencing of PCR-amplified amoA and 16S rRNA genes. Phylogenetic analysis of the amoA-related clones revealed that the diversity of AOB was extremely low at the study site. The majority (92.7%) of amoA clones obtained belonged to a single cluster, environmental amoA cluster-3, the taxonomic position of which was previously unknown. Phylogenetic analysis on AOB-specific 16S rRNA gene sequences also demonstrated a very low diversity. All of the cloned 16S rRNA gene sequences comprised a single phylotype that belonged to the members of uncultured Nitrosospira cluster-1, suggesting that AOB belonging to the uncultured Nitrosospira cluster-1 could carry amoA sequences of environmental amoA cluster-3.
Nine types of staphylococcal enterotoxin (SE) genes (sea~see, seg~sej), 3 types of virulence genes (eta, etb, tst), mecA and 16S rRNA as internal positive control were detected from 187 clinical MRSA (methicillin resistance Staphylococcus aureus) strains isolated from a variety hospitalized patients in Daegu and Gyeongsangbuk-do areas using the multiplex PCR. The frequency of the S. aureus strains harboring recently reported SE genes (seg~sej) were found to be very high (65.9%) and greater than that of the strains harboring classical SE (sea~see) genes (47.8%) as previously established. Taking into account that the newly described pairs form SE genes (i.e., sec+seg+sei, seg+sei) were many, in the other hand, single form SE genes (i.e., seg, seh, sei and sej) were rarely detected. The S. aureus with pairs form enterotoxigenic genes become more potentially toxigenic strains. Furthermore, this work indicated a systematic association between the seg and sei genes and their high incidence among the S, aureus strains, which suggests that these two SE's could be an important phylogenetic link among the staphylococcal enterotoxins.
Ziganshina, Elvira E.;Belostotskiy, Dmitry E.;Shushlyaev, Roman V.;Miluykov, Vasili A.;Vankov, Petr Y.;Ziganshin, Ayrat M.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.11
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pp.1464-1472
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2014
The microbial community structures of two continuous stirred tank reactors digesting turkey manure with pine wood shavings as well as chicken and swine manure were investigated. The reactor fed with chicken/swine wastes displayed the highest organic acids concentration (up to 15.2 g/l) and ammonia concentration (up to 3.7 g/l ammonium nitrogen) and generated a higher biogas yield (up to $366ml/g_{VS}$) compared with the reactor supplied with turkey wastes (1.5-1.8 g/l of organic acids and 1.6-1.7 g/l of ammonium levels; biogas yield was up to $195ml/g_{VS}$). The microbial community diversity was assessed using both sequencing and profiling terminal restriction fragment length polymorphisms of 16S rRNA genes. Additionally, methanogens were analyzed using methyl coenzyme M reductase alpha subunit (mcrA) genes. The bacterial community was dominated by members of unclassified Clostridiales with the prevalence of specific clostridial phylotypes in each reactor, indicating the effect of the substrate type on the community structure. Of the methanogenic archaea, methanogens of the genus Methanosarcina were found in high proportions in both reactors with specific methanosarcinas in each reactor, whereas the strict hydrogenotrophic methanogens of Methanoculleus sp. were found at significant levels only in the reactor fed with chicken/swine manure (based on the analyses of 16S rRNA gene). This suggests that among methanogenic archaea, Methanosarcina species which have different metabolic capabilities, including aceticlastic and hydrogenotrophic methanogenesis, were mainly involved in anaerobic digestion of turkey wastes.
Bacterial diversities in the guts of sea cucumbers (Apostichopus japonicus) and shrimps (Litopenaeus vannamei) were investigated using barcoded or tag-encoded 454 pyrosequencing of 16S rRNA genes. In sea cucumbers, most of sequences were related to two genera, the genus Propionigenium in the phylum Fusobacteria and an unclassified genus in the family Flavobacteriaceae of phylum Bacteroidetes. Shrimps showed various kinds of genera including Lactococcus, Leuconostoc, Prochlorococcus, and Vibrio as well as the unclassified genera in the families, Flavobacteriaceae, Rhodobacteraceae, Desulfobulbaceae, and Helicobacteraceae and in the order Mycoplasmatales. Unclassified genera containing environmental sequences only are more than half of genera from sea cucumbers and shrimps. Sea cucumbers and shrimps could be unexplored sources of novel microbes and the bacterial diversity of them was revealed by high throughput 454 pyrosequencing.
Compost is widely used as an organic additive to improve the bioremediation of diesel-contaminated soil. In this study, the effects of compost amendment on the remediation performance, functional genes, and bacterial community are evaluated during the bioremediation of diesel-contaminated soils with various ratios of compost (0-20%, w/w). The study reveals that the diesel removal efficiency, soil enzyme (dehydrogenase and urease) activity, soil CH4 oxidation potential, and soil N2O reduction potential have a positive correlation with the compost amendment (p < 0.05). The ratios of denitrifying genes (nosZI, cnorB and qnorB) to 16S rRNA genes each show a positive correlation with compost amendment, whereas the ratio of the CH4-oxidizing gene (pmoA) to the 16S rRNA genes shows a negative correlation. Interestingly, the genera Acidibacter, Blastochloris, Erythrobacter, Hyphomicrobium, Marinobacter, Parvibaculum, Pseudoxanthomonas, and Terrimonas are strongly associated with diesel degradation, and have a strong positive correlation with soil CH4 oxidation potential. Meanwhile, the genera Atopostipes, Bacillus, Halomonas, Oblitimonas, Pusillimonas, Truepera, and Wenahouziangella are found to be strongly associated with soil N2O reduction potential. These results provide useful data for developing technologies that improve diesel removal efficiency while minimizing greenhouse gas emissions in the bioremediation process of diesel-contaminated soil.
China has a long history of sheep (Ovis aries [O. aries]) breeding and an abundance of sheep genetic resources. Knowledge of the complete O. aries mitogenome should facilitate the study of the evolutionary history of the species. Therefore, the complete mitogenome of O. aries was sequenced and annotated. In order to characterize the mitogenomes of 3 Chinese sheep breeds (Altay sheep [AL], Shandong large-tailed sheep [SD], and small-tailed Hulun Buir sheep [sHL]), 19 sets of primers were employed to amplify contiguous, overlapping segments of the complete mitochondrial DNA (mtDNA) sequence of each breed. The sizes of the complete mitochondrial genomes of the sHL, AL, and SD breeds were 16,617 bp, 16,613 bp, and 16,613 bp, respectively. The mitochondrial genomes were deposited in the GenBank database with accession numbers KP702285 (AL sheep), KP981378 (SD sheep), and KP981380 (sHL sheep) respectively. The organization of the 3 analyzed sheep mitochondrial genomes was similar, with each consisting of 22 tRNA genes, 2 rRNA genes (12S rRNA and 16S rRNA), 13 protein-coding genes, and 1 control region (D-loop). The NADH dehydrogenase subunit 6 (ND6) and 8 tRNA genes were encoded on the light strand, whereas the rest of the mitochondrial genes were encoded on the heavy strand. The nucleotide skewness of the coding strands of the 3 analyzed mitogenomes was biased toward A and T. We constructed a phylogenetic tree using the complete mitogenomes of each type of sheep to allow us to understand the genetic relationships between Chinese breeds of O. aries and those developed and utilized in other countries. Our findings provide important information regarding the O. aries mitogenome and the evolutionary history of O. aries inside and outside China. In addition, our results provide a foundation for further exploration of the taxonomic status of O. aries.
Bacterial wihte enteritis ocurred by infection of V. ichthyoenteri is a devastating disease in olive flounder (Paralichthys olivaceus) hatcheries in Korea. Since white enteritis has been a problem in aquqtic industries, necessity of a rapid detection method is increased. In an attempt to develop rapid PCR method the detection of V. ichthyoenteri, we examined the 16S-23S rRNA intergenic spacer region(ISR) of V. ichthyoenteri and developed species-specific primer for V. ichthyoenteri. The intergenic spacers were amplified by primers complementary to conserved region of 16S and 23S rRNA genes. The intergenic spacer region between the 16S and 23S rRNA genes of V. ichthoenteri were investigated by PCR fragment length typing and DNA sequencing. Analysis of the ISR sequences showed that V. ichthyoenteri contains one types of polymorphic ISRs. The size of ISRs ranged 348bp length and not contains tRNA genes. Mutiple alignment of representative sequences from different Vibrio species revealed several domains of high sequence variability, and allowed to design species-specific primer for detection of Vibrio ichthyoenteri. PCR. The specific of the primer was examined using genomic DNA prepared from 19 different Vibrio species, isolated 18group Vibrio species. The results showed that the PCR reaction using species-specific primer designed in this study can be used to detect V. ichthyoenteri.
We report that mycoplasma organisms from lung tissues of slaughter pigs were identified to genes fragments with references use of nested-PCR technique(nPCR). Seven strains of mycoplasma species were isolated from 70 lung tissues. The organisms were detected by in vitro amplification of 16S rRNA and 23S rRNA genes. Nucleotide sequences of the spacer between 16S and 23S in the ribosomal RNA operons of mycoplasma were identified by the analysis of products from the nested PCR. Four common PCR primers, MhF1, MhF2 MhR1 and MhR2, were designed by analysis between these sequences by first amplified with F1, R1 and second with F2, R2, respectively. Specific amplification of the spacer region for reference strains of M. hyopneumoniae, M. hyorhinis, M. flocculare were confirmed by first round of PCR in which the traduced fragments of 690bp, 460bp, 630bp. But amplications of second round was changed to 240bp, 210bp, 230bp, respectively. Three different strains (M. hyopneumoniae:4, M. hyorhinis:2, M. flocculare:1) were detected by the nested-PCR technique. The results suggest that the detection of swine mycoplasma by n-PCR can be analyzed the nucleotide sequences between rRNA operons and homology study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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