• 제목/요약/키워드: 16S rDNA sequence

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참외 발효과를 유발하는 세균의 동정 (Identification of Bacteria Causing Fermentation of Oriental Melon in Korea)

  • 최재을;차선경;김진희;육진아;황용수;권순우
    • 식물병연구
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    • 제9권4호
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    • pp.189-195
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    • 2003
  • 참외의 발효과를 유발하는 세균은 16S rDNA 염기분석에 의해 3 group으로 분류되었다. CM2105균주의 16S rDNA 염기서열은 Microbacterium phyllosphaerae의 염기서열과 99.6%의 높은 상동성을 나타냈고, M. holiorum과도 99.5%의 높은 상동성을 나타냈다. CM2101과 CM2121균주의 16S rDNA 염기서열은 "P. pavonaceae"와 각각 98.9%, 98.8, CM2126균주는 P. costantinii와 99.5%, P. grimontii와 99.0%의 높은 상동성을 나타냈다. CM21131균주의 16S rDNA 염기서열은 Enterobacter cloacae와 99.7%의 높은 상동성 나타냈다. 검정균주의 생리적, 생화학적 특성과 16S rDNA의 염기분석에 따라 CM2105 균주는 M. phyllosphaerae, CM2101, CM2121, CM2126 균주는 Pseudomonas spp., 그리고 CM2113 균주는 E. cloacae로 동정하였다.

미생물의 유전자(Genome) 해석과 임상세균학에 이용 (Microbial Genome Analysis and Application to Clinical Bateriology)

  • 김성광
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제19권1호
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    • pp.1-10
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    • 2002
  • With the establishment of rapid sequence analysis of 16S rRNA and the recognition of its potential to determine the phylogenetic position of any prokaryotic organism, the role of 16S rRNA similarities in the present species definition in bacteriology need to be clarified. Comparative studies clearly reveal the limitations of the sequence analysis of this conserved gene and gene product in the determination of relationship at the pathogenic strain level for which DNA-DNA reassociation experiments still constitute the superior method. Since today the primary structure of 16S rRNA is easier to determine than hybridization between DNA strands, the strength of the sequence analysis is to recognize the level at which DNA pairing studies need to be performed, which certainly applies to similarities of 97% and higher.

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Detection and Molecular Characterization of a Stolbur Phytoplasma in Lilium Oriental Hybrids

  • Chung, Bong-Nam;Jeong, Myeong-Il
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제19권2호
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    • pp.106-110
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    • 2003
  • Stolbur Phytoplasma was detected from Lilium Oriental hybrids showing flattened stem and flower clustering. The presence of phytoplasma was demonstrated using polymerase chain reaction(PCR) assays with phyto-plasma-universal(P1/P6)and stolbur phytoplasma-specific 16F1/R1-S primer pairs amplifying phytoplasma 16S rDNA regions. Nucleotide suquences of the phytoplasma 16S rDNA were determined. Nucleic acid extracted from lily amplified 1.5 kb DNA with a phytoplasma universal primer pair. In nested PCR, 1.1 kb PCR product was obtained using specific primer pair, indicating an isolate of stolbur phytoplasma. Nucleotide sequence of phytoplasma 16S rDNA reported in this study showed 99.5% and 99.1% identities with two known stolbur phytoplamas (16Sr XII-A). Also, it exhibited a sequence homology of 98.0% with phormium yellow leaf (16Sr XII-B), and 97.9% with Australian grapevine yellows (16Sr XII-B). Meanwhile, it showed 98.1% identity with strawberry green petal phytoplama, (16Sr1-C), and 94.7 % with American aster yellows (16Sr1-B). Homology percentage of the 16S rDNA nucleotide sequence suggests that this phytoplama could be classified into the stolbur phytoplasma, subgroup A (16Sr XII-A), as a type strain stolbur.

아산시와 우포늪 토양의 점액세균 다양성 (Diversity of Myxobacteria in Soil Samples from Asansi and Uponeup in Korea)

  • 정진우;김진우;조경연
    • 미생물학회지
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    • 제46권4호
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    • pp.405-408
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    • 2010
  • 점액세균의 16S rDNA에 특이적으로 부착하는 프라이머를 사용한 중합효소연쇄반응(PCR)을 통해 아산시와 우포늪에서 채취한 다섯 토양시료 내 점액세균의 다양성을 조사하였다. 점액세균의 16S rDNA을 갖는 76개 PCR 조각의 서열분석 결과, 표준균주와 95% 미만의 상동성을 보이는 5개의 신속 추정 점액세균이 관찰되어 국내 토양에 아직까지 분리되지 않은 많은 새로운 점액세균들이 존재함을 보여주었다.

김치 서식처에서 Listeria monocytogenes를 억제하는 lactococci의 분리와 16S rDNA분석에 의한 동정 (Isolation of Lactococci Inhibiting Listeria monocytogenes from Kimchi Habitat and Its Identification by 16S rDNA Analysis)

  • 박은주;한홍의;민봉희
    • The Korean Journal of Ecology
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    • 제22권1호
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    • pp.45-50
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    • 1999
  • 김치 발효 초기에 bacteriocin 생성 유산균을 분리하고자 하였다. 분리 유산균은 형태, 배양 및 생리학적인 특징과 16S rDNA의 부분적인 염기서열로부터 Lactococcus lactis로 동정되었다. 분리균주가 생성한 bacteriocin은 Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus와 같은 그람 양성 병원성 세균과 몇몇 유산균에 대해 항균활성이 있었고, 그람음성균인 Yesinia에는 활성이 없었다. bacteriocin의 활성은 protease, protease ⅩⅣ, a-chymotrypsin과 pepsin에 대해서 활성이 소실되었으나, lipase, trypsin, lysozyme에 대해서는 활성이 유지되었다. bacteriocin의 활성은 pH 2∼11에서 안정적이며 l00℃에서 10분간 열처리시에도 변하지 않았다. 따라서 L. monocytogenes는 발효초기에 L. lactis에 의하여 억제될 수 있다.

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한국 토양으로부터 전분가수분해효소를 생산하는 고온성 균주의 선별과 동정 (Isolation and Characterization of Thermophilic Microorganism Producing Starch-hydrolyze Enzyme)

  • 최원석;배동훈
    • 산업식품공학
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    • 제14권1호
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    • pp.7-13
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    • 2010
  • 호열성 미생물을 검토하기 위하여 전국 각지로부터 토양과 두엄을 채취하여 그로부터 호열성 미생물을 분리하였다. 토양과 두엄으로부터 분리된 호열성 미생물 1250여 균주를 선별하였고, 이들을 대상으로 미생물이 생산하는 효소 활성을 검토하여 호열성 전분 분해 효소를 생산하는 1주의 미생물을 확인하였다. 확인된 1주의 미생물을 strain 2719라 명명하였다. Strain 2719 균주는 형태학적으로 gram 양성 간균의 특징을 나타냈고, 균주의 표면은 매끄럽지 않았으며, 비교적 다양한 길이를 가지고 있었다. 또한 다른 gram 양성 간균들에 비해서 많은 수의 균사들이 각 균주들 사이에 복잡하게 얽혀있었다. 생화학적 특성을 확인한 결과 catalase 양성, glucose 발효, arabinose 발효, mannitol 발효, casein gelatin starch 가수분해의 특징을 가지고 있었으며, 이는 Bacillus sp.로 추정되었다. 생육 pH의 범위는 pH 6-pH 8범위에서 생육이 가능했으며, 생육 온도의 범위는 50-70${^{\circ}C}$였다. 16S rDNA sequence 분석결과 Bacillus thermoglucosidasius의 16S rDNA와 99.52%가 일치하였으나, sequence의 일부분이 다른 부분이 있고, 생육 특성에서 약간의 차이를 보였다. 또한 gene bank에 등록되어 있는 균주들의 16S rDNA sequence들과 비교하여도 일치하는 균주는 확인되지 않았다. 이와 같은 실험결과에 따라 2719 균주는 기존에 발표되지는 않았으나, Bacillus thermoglucosidasius와 매우 유사한 균주로 판단되어 Bacillus thermoglucosidasius 2719로 명명하였다.

Application of rDNA-PCR Amplification and DGGE Fingerprinting for Detection of Microbial Diversity in a Malaysian Crude Oil

  • Liew, Pauline Woan Ying;Jong, Bor Chyan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제18권5호
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    • pp.815-820
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    • 2008
  • Two culture-independent methods, namely ribosomal DNA libraries and denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE), were adopted to examine the microbial community of a Malaysian light crude oil. In this study, both 16S and 18S rDNAs were PCR-amplified from bulk DNA of crude oil samples, cloned, and sequenced. Analyses of restriction fragment length polymorphism (RFLP) and phylogenetics clustered the 16S and 18S rDNA sequences into seven and six groups, respectively. The ribosomal DNA sequences obtained showed sequence similarity between 90 to 100% to those available in the GenBank database. The closest relatives documented for the 16S rDNAs include member species of Thermoincola and Rhodopseudomonas, whereas the closest fungal relatives include Acremonium, Ceriporiopsis, Xeromyces, Lecythophora, and Candida. Others were affiliated to uncultured bacteria and uncultured ascomycete. The 16S rDNA library demonstrated predomination by a single uncultured bacterial type by >80% relative abundance. The predomination was confirmed by DGGE analysis.

Physiological and Phylogenetic Analysis of Burkholderia sp. HY1 Capable of Aniline Degradation

  • Kahng, Hyung-Yeel;Jerome J. Kukor;Oh, Kye-Heon
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제10권5호
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    • pp.643-650
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    • 2000
  • A new aniline-utilizing microorganism, strain HY1 obtained from an orchard soil, was characterized by using the BIOLOG system, an analysis of the total cellular fatty acids, and a 16S rDNA sequence. Strain HY1 was identified as a Burkholderia species, and was designated Burkholderia sp. HY1. GC and HPLC analyses revealed that Burkholderia sp. HY1 was able to degrade aniline to produce catechol, which was subsequently converted to cis,cis-muconic acid through an ortho-ring fission pathway under aerobic conditions. Strain HY1 exhibited a drastic reduction in the rate of aniline degradation when glucose was added to the aniline media. However, the addition of peptone or nitrate to the aniline media dramatically accelerated the rate of aniline degradation. A fatty acid analysis showed that strain HY1 was able to produce lipids 16:0 2OH, and 11 methyl 18:1 ${\omega}7c$ approximately 3.7-, 2.2-, and 6-fold more, respectively, when grown on aniline media than when grown on TSA. An analysison the alignment of a 1,435 bp fragment. A phylogenetic analysis of the 16S rDNA sequence based on a 1,420 bp multi-alignment sowed of the 16s rDNA sequence revealed that strain HY1 was very closely related to Burkholderia graminis with 95% similarity based that strain HY1 was placed among three major clonal types of $\beta$-Proteobacteria, including Burkholderia graminis, Burkholderia phenazinium, and Burkholderia glathei. The sequence GAT(C or G)${\b{G}}$, which is highly conserved in several locations in the 16S rDNA gene among the major clonal type strains of $\beta$-Proteobacteria, was frequently replaced with GAT(C or G)${\b{A}}$ in the 16S rDNA sequence from strain HY1.

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DGGE를 이용한 동굴 생태계 세균 군집 구조 분석 (Analysis of Bacterial Community Structure in Gossi Cave by Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE))

  • 조홍범;정순오;최용근
    • 환경생물
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    • 제22권1호
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    • pp.213-219
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    • 2004
  • 동굴 내 정점별 세균 군집 구조를 분석하기 위하여 PCf amplified 16S rDNA denaturing gradient gel electrophoresis(DGGE)를 적용하였다. DGGE는 동일한 분자량을 갖는 dsDNA band라고 할지라도, 각각의 염기서열 차이에 따라 전기영동 상에서 고유한 band양상을 나타낼 수 있다. eubacteria의 16S rDNA V3region을 증폭하기 위해 GC341F와 PRUN518r을 primer로 사용하여 지하수내에 미생물 군집의 다양성과 유사성을 분석하였다. DGGE band 양상을 통해 동굴내의 세균 군집 구조는 외부 환경에 비해 상대적으로 종다양성이 낮으며 동굴내 에서 특이적으로 서식하는 종이 있음을 확인하였다. 또한 유기 영양물질의 공급이 제한되어 있는 동굴에서 구아노가 주요 유기 영양물질의 공급원으로서 큰 영향을 미치고 있는 것으로 파악되었다. DGGE 상의 일부 band의 염기서열분석 결과 Pseudomonas sp. NZ060과 Pseudomonas pseudoalcaligenes, uncultured Variovorax sp., soil bacterium NS7로 동정되었다.

Molecular Differentiation of Bacillus spp. Antagonistic Against Phytopathogenic Fungi Causing Damping-off Disease

  • Cho, Min-Jeong;Kim, Young-Kwon;Ka, Jong-Ok
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제14권3호
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    • pp.599-606
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    • 2004
  • Gram-positive antagonistic bacilli were isolated from agricultural soils for possible use in biocontrol of plant pathogenic fungi, Fusarium oxysporum, Rhizoctonia solani, and/or Pythium ultimum. Among the 65 antagonistic Gram-positive soil isolates, 22 strains were identified as Bacillus species by 16S rDNA sequence analyses. Four strains, including DF14, especially exhibited multiple antagonistic properties against the three damping-off fungi. Genotypic properties of the Bacillus isolates were characterized by rapid molecular fingerprinting methods using repetitive extragenic palindromic-PCR (REP-PCR), ribosomal intergenic spacer-length polymorphisms (RIS-LP), 16S rDNA PCR-restriction fragment length polymorphisms (PCR-RFLP), and strain-specific PCR assays. The results indicated that the REP-PCR method was more valuable than the RIS-LP and 16S rDNA PCR-RFLP analyses as a rapid and reliable approach for bacilli typing and identification. The use of strain-specific primers designed based on 16S rDNA sequence comparisons enabled it to be possible to selectively detect a strain, DF14, which is being used as a biocontrol agent against damping-off fungi.