• 제목/요약/키워드: 128 rRNA

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쥐L6 근원세포에서 miR-128의 근육세포 분화와 인슐린신호에서의 역할 (Roles of miR-128 in Myogenic Differentiation and Insulin Signaling in Rat L6 Myoblasts)

  • 오명주;김소현;김지현;전병학
    • 생명과학회지
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    • 제30권9호
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    • pp.772-782
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    • 2020
  • 골격근의 분화 또는 근육 분화는 근육량과 신진대사 항상성을 유지하기 위해 중요하다. 근육 특이적 microRNAs (miRNAs)는 골격근 분화에 중요한 역할을 한다. 본 연구에서는 rat miRNAs 마이크로어레이를 사용하여 rat L6 근아세포의 근육 분화 과정에서의 miRNAs 발현 양상을 조사했다. 우리는 miR-128의 발현 증가를 발견했고, 동시에 이미 알려진 근육 분화 조절 miRNAs인 miR-1, miR-133b와 mi-206의 발현 증가를 확인했다. 이 microarray 결과를 확인하기위해 우리는 Quantitative RT-PCR 기술을 사용하였고, microarray 결과와 유사하게 발현 초기 mRNAs와 발현 후 성숙 miRNAs에서 모두 miR-128의 발현 증가를 확인했다. 또한 Rat L6 근아세포로의 miR-128 발현 향상은 muscle creatine kinase (MCK), myogenin, myosin heavy chain (MHC)와 같은 근육분화 표지 유전자 발현을 유발했고, 또한 MHC의 단백질 발현을 증가시켰다. 억제 PNAs를 사용한 miR-128의 작용 억제는 이러한 근육 분화 표지 유전자들의 발현을 차단했다. 또한, miR-128 발현 향상은 Erk와 Akt 단백질의 인슐린 자극에 의한 인산화를 증가시켰고, 고인슐린혈증과 고혈당증으로 인해 유도된 인슐린 저항성으로 인한 Erk와 Akt의 억제된 인산화를 회복했다. 이러한 발견은 miR-128이 근육분화와 인슐린 작용에 중요한 역할을 할 수 있다는 것을 시사한다.

Inhibition of miR-128 Abates Aβ-Mediated Cytotoxicity by Targeting PPAR-γ via NF-κB Inactivation in Primary Mouse Cortical Neurons and Neuro2a Cells

  • Geng, Lijiao;Zhang, Tao;Liu, Wei;Chen, Yong
    • Yonsei Medical Journal
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    • 제59권9호
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    • pp.1096-1106
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    • 2018
  • Purpose: Alzheimer's disease (AD) is the sixth most common cause of death in the United States. MicroRNAs have been identified as vital players in neurodegenerative diseases, including AD. microRNA-128 (miR-128) has been shown to be dysregulated in AD. This study aimed to explore the roles and molecular mechanisms of miR-128 in AD progression. Materials and Methods: Expression patterns of miR-128 and peroxisome proliferator-activated receptor gamma ($PPAR-{\gamma}$) messenger RNA in clinical samples and cells were measured using RT-qPCR assay. $PPAR-{\gamma}$ protein levels were determined by Western blot assay. Cell viability was determined by MTT assay. Cell apoptotic rate was detected by flow cytometry via double-staining of Annexin V-FITC/PI. Caspase 3 and $NF-{\kappa}B$ activity was determined by a Caspase 3 Activity Assay Kit or $NF-{\kappa}B$ p65 Transcription Factor Assay Kit, respectively. Bioinformatics prediction and luciferase reporter assay were used to investigate interactions between miR-128 and $PPAR-{\gamma}$ 3'UTR. Results: MiR-128 expression was upregulated and $PPAR-{\gamma}$ expression was downregulated in plasma from AD patients and $amyloid-{\beta}$ $(A{\beta})-treated$ primary mouse cortical neurons (MCN) and Neuro2a (N2a) cells. Inhibition of miR-128 decreased $A{\beta}-mediated$ cytotoxicity through inactivation of $NF-{\kappa}B$ in MCN and N2a cells. Moreover, $PPAR-{\gamma}$ was a target of miR-128. $PPAR-{\gamma}$ upregulation attenuated $A{\beta}-mediated$ cytotoxicity by inactivating $NF-{\kappa}B$ in MCN and N2a cells. Furthermore, $PPAR-{\gamma}$ downregulation was able to abolish the effect of anti-miR-128 on cytotoxicity and $NF-{\kappa}B$ activity in MCN and N2a cells. Conclusion: MiR-128 inhibitor decreased $A{\beta}-mediated$ cytotoxicity by upregulating $PPAR-{\gamma}$ via inactivation of $NF-{\kappa}B$ in MCN and N2a cells, providing a new potential target in AD treatment.

Sphingomonas chungbukensis DJ77의 16S rRNA 염기서열과 이차구조 (Nucleotide Sequence and Secondary Structure of 16S rRNA from Sphingomonas chungbukensis DJ77)

  • 이관영;권해룡;이원호;김영창
    • 미생물학회지
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    • 제41권2호
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    • pp.125-128
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    • 2005
  • S. chungbukensis DJ77로부터 16S rRNA유전자의 염기서열을 분식하였다. 염기서열은 총 1,502 bp로 2000 년에 등록된 부분 서열(1,435 bp)보다 5' 방향과 3' 방향으로 29 bp와 37 bp 길이만큼 각각 확장하였으며, 1 bp가 추가로 삽입되었다. E. coli의 16S rRNA유전자를 모델로 이차구조를 제작하였으며, 네 부위가 특이적임을 발견하였다. Sphnigomonas spp.의 16S rRNA 서열과 S. chungbukensis DJ77의 다중서열검색 결과, Sphingomonas종에서만 나타나는 보존부위와 가변부위를 발견할 수 있었다. 특히, Campylobacter jejuni에서만 나타나는 것으로 알려진 긴 stem loop구조가 서열은 조금 다르지만 구조적 일치를 보이는 유사한 구조를 S. chungbukensis DJ77에서도 발견하였다. 결과적으로, 다중서열검색을 통해 제작한 계통수와 nucleotide signatures분석에 근거하여 S. chugukensis DJ77을 cluster II (Sphingobium)로 분류하였다.

남해 정치망에서 채집한 엽상자어(Leptocephalus)의 형태 및 유전학적 특성 (Morphogenetic Identification of Eel's Larva (Leptocephalus) Collected by Set net in Namhae, Korea)

  • 홍창기;한경호
    • 한국해양생명과학회지
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    • 제8권2호
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    • pp.128-135
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    • 2023
  • 엽상자어(Leptocephalus)는 뱀장어목(Anguiliformes)에 속하는 어류의 자어로 5~6월에 우리나라 남해안 일대의 정치망에서 멸치와 함께 어획 후 방류하지만 대부분 폐사하는 실정이다. 따라서 본 연구의 목적은 멸치어업을 하는 정치망에서 무분별하게 포획되는 엽상자어의 종을 구명하여 수산자원보호 및 이들 자치어 생태 연구를 위한 기초 생물학적 자료를 제시하고자 수행하였다. 실험에 사용된 엽상자어는 5~6월에 남해의 정치망에서 채집하였으며, 외부형태와 유전학적 특성을 붕장어(Conger myriaster), 갯장어(Muraenesox cinereus) 및 뱀장어속(Anguilla) 4종의 성어와 비교하였다. 유전학적 분석은 추출한 DNA를 12s rRNA, 16s rRNA 부분단편을 PCR로 증폭하여 염기배열을 분석한 후 분자계통수를 작성하여 장어류 유생이 붕장어, 갯장어 및 뱀장어속 4종 중 어느 쪽의 성체와 클러스터 그룹화를 이루는지 계통학적 유연관계를 확인하였다. 엽상자어의 외부형태 계수 및 계측결과 엽상자어의 전장에 대한 머리길이의 백분비와 뒷지느러미 기점거리의 백분비는 붕장어와 가장 유사한 비율을 보였고, 척추골수 역시 붕장어와 가장 유사하였다. 또한 엽상자어의 유전자 분석결과는 모두 붕장어 성체와 클러스터 그룹화를 이루는 것을 확인함으로서 남해안에서 5~6월에 어획되는 엽상자어는 모두 붕장어의 자어임을 할 수 있었다.

Analysis of miRNA expression in the trachea of Ri chicken infected with the highly pathogenic avian influenza H5N1 virus

  • Suyeon Kang;Thi Hao Vu;Jubi Heo;Chaeeun Kim;Hyun S. Lillehoj;Yeong Ho Hong
    • Journal of Veterinary Science
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    • 제24권5호
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    • pp.73.1-73.16
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    • 2023
  • Background: Highly pathogenic avian influenza virus (HPAIV) is considered a global threat to both human health and the poultry industry. MicroRNAs (miRNA) can modulate the immune system by affecting gene expression patterns in HPAIV-infected chickens. Objectives: To gain further insights into the role of miRNAs in immune responses against H5N1 infection, as well as the development of strategies for breeding disease-resistant chickens, we characterized miRNA expression patterns in tracheal tissues from H5N1-infected Ri chickens. Methods: miRNAs expression was analyzed from two H5N1-infected Ri chicken lines using small RNA sequencing. The target genes of differentially expressed (DE) miRNAs were predicted using miRDB. Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes analysis were then conducted. Furthermore, using quantitative real-time polymerase chain reaction, we validated the expression levels of DE miRNAs (miR-22-3p, miR-146b-3p, miR27b-3p, miR-128-3p, miR-2188-5p, miR-451, miR-205a, miR-203a, miR-21-3p, and miR-200a3p) from all comparisons and their immune-related target genes. Results: A total of 53 miRNAs were significantly expressed in the infection samples of the resistant compared to the susceptible line. Network analyses between the DE miRNAs and target genes revealed that DE miRNAs may regulate the expression of target genes involved in the transforming growth factor-beta, mitogen-activated protein kinase, and Toll-like receptor signaling pathways, all of which are related to influenza A virus progression. Conclusions: Collectively, our results provided novel insights into the miRNA expression patterns of tracheal tissues from H5N1-infected Ri chickens. More importantly, our findings offer insights into the relationship between miRNA and immune-related target genes and the role of miRNA in HPAIV infections in chickens.

날붕장어(Echelus uropterus) 엽상자어의 분자동정, 개체발생 및 진화학적 고찰 (Molecular Identification, Ontogeny and Evolutionary Note of Echelus uropterus Leptocephali)

  • 지환성;이수정;김진구
    • 한국어류학회지
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    • 제23권3호
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    • pp.217-224
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    • 2011
  • 동해에서 바다뱀과 엽상자어 7개체(TL 14.6~68.0mm)를 채집하여, 미토콘드리아 DNA 12S rRNA 861 bp 염기서열로 종을 동정하고, 이들의 개체발생을 기술하고, 진화적 관계를 고찰하였다. 바다뱀과 엽상자어 7개체는 날붕장어 성어와 유전거리(d=0.000)에서 잘 일치하였다. 날붕장어 엽상자어 7개체는 9개의 소낭이 항문 앞까지 존재하고, 전체 근절수가 154~158개, 전장에 대한 체고가 10% 이하이며, 흑색소포가 항문 뒤부터 꼬리지느러미 앞까지 8개 분포하는 형태적 특징을 보였다. 엽상자어의 형태 및 분자 분석결과를 통해 날붕장어는 진화학상 바다뱀아과 및 갯물뱀아과 사이에 위치하는 그룹으로 사료된다.

수입냉동 어패류에 오염되어 있는 Vibrio속 세균의 분리 및 동정 (Isolation and Identification of Vibrio Species Contaminated in Imported Frozen Seafoods)

  • 윤영준;김도연;이실한;이우윤;고영환;김승곤;김정완
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제15권2호
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    • pp.128-136
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    • 2000
  • 수입 냉동어패류에서 24주의 Vibiro 균주를 순수 분리하여 그들의 생리, 생화학적 특성에 따라 동정한 결과 V. cholerae non-O1과 V. diazotrophicus가 각 2주, V. hollisae 1주, V. natriegens 5주, V. fluvialis 8주, V. nereis 4주인 것으로 밝혀졌고 2주는 Vibirio속 균주가 아닌 것으로 나타났다. 이 균주들을 API-2OE kit로 동정한 결과는 위의 결과와 매우 달라, V. cholerae로 동정된 2주와 fluvialis로 동정된 5균주의 경우에만 결과가 일치하였고 나머지는 Vibrio속이 아닌 것으로 분석되었다. 식품류에서 V. cholerae가 검출된 점에 주목하여 이 분리균들의 동정을 보다 정확히 하기 위하여 분리균들의 165 rRNA를 증폭시켜 이들의 RFLP를 분석하였다. 그 결과, r cholerae로 동정된 두 균주는 동일한 RFLP양상을 갖고 있었으며, V. cholerae보다는 V. proteolyticus의 RFLP에 보다 가까운 것으로 나타났다. 따라서 식품류의 병원균 검색을 보다 정확하고 신속하게 할 수 있도록 효율적인 검색 방법의 개발이 시급하다고 하겠다.

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Isolation and Characterization of Lactic Acid Bacteria from Kimchi, Korean Traditional Fermented Food to Apply into Fermented Dairy Products

  • Cho, Young-Hee;Hong, Sung-Moon;Kim, Cheol-Hyun
    • 한국축산식품학회지
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    • 제33권1호
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    • pp.75-82
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    • 2013
  • This study aimed to isolate lactic acid bacteria (LAB) from Kimchi and to identify suitable probiotic strain for application in fermented dairy product as a commercial starter culture. A total of 106 (LAB) strains were isolated from Kimchi collected from different regions in Korea and their phenotypic characteristics were assayed. Four isolates from MRS agar plates were selected and designated as DKL109, DKL119, DKL121 and DKL128. They were identified first by API 50 CHL kit and then 16S rRNA gene sequencing. DKL121 and DKL128 were identified as Lactobacillus paracasei and Lactobacillus casei, respectively. Other two isolates (DKL109 and DKL119) were identified as Lactobacillus plantarum. To estimate their applicability in dairy products, the characteristics including acid and bile tolerance, cold shock induced cryotolerance and enzymatic activities were determined. There was wide variation in ability of strains to acid tolerance, but no significant differences in bile tolerance, cold shock induced cryotolerance within selected strains. DKL119 and DKL121 showed the highest resistance to acid and bile and the highest ${\beta}$-galactosidase activity, respectively. When these two strains were used for yogurt preparation as a single starter culture, their viable cell counts reached to $1.0{\times}10^9CFU/mL$. Lactobacillus plantarum DKL119 showed faster acid development than commercial starter culture. Also storage trials at $10^{\circ}C$ showed that the viability of these strains was retained over 15 d. With these results, it was indicated that probiotics isolated from Kimchi can be used in yogurt manufacturing as a starter culture.

A report of 29 unrecorded bacterial species belonging to the phylum Bacteroidetes in Korea

  • Cho, Sang Hyun;Yoon, Jung-Hoon;Kim, Seung-Bum;Jahng, Kwang-Yeop;Cho, Jang-Cheon;Joh, Ki-seong;Cha, Chang-Jun;Seong, Chi-Nam;Bae, Jin-Woo;Im, Wan-Taek;Jeon, Che Ok
    • Journal of Species Research
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    • 제6권2호
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    • pp.119-128
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    • 2017
  • Within a comprehensive, widescale investigation of indigenous prokaryotic species in Korea, 29 bacterial strains in the phylum Bacteroidetes were isolated from diverse environmental habitats that included soil, plant roots, natural caves, tidal flats, freshwater from lakes, and seawater. Based on their high 16S rRNA gene sequence similarities (>99.1%) and the formation of robust phylogenetic clades with the closest type species, each strain likely belonged to an independent and predefined bacterial species. There are no publications or official reports of the isolation of these 29 species in Korea. Our study provides strong evidence that seven species in three genera in the order Cytophagales, 15 species in 13 genera in the order Flavobacteriales and seven species in five genera in the order Sphingobacteriales, all within the phylum Bacteriodetes, are new reports of bacterial species in Korea. Gram reaction, colony and cell morphology, basic biochemical characteristics, isolation source, and strain IDs are described in the species description section.

$\alpha$-Galactosidase를 생산하는 Bacillus lichennformis YB-42의 분리와 효소 특성 (Characterization of Extracellular $\alpha$-Galactosidase Produced by Bacillus licheniformis YB-42.)

  • 김현숙;이경섭;소재호;이미성;최준호;윤기홍
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.128-134
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    • 2004
  • 가정에서 제조된 된장으로부터 -galactosidase의 생산균으로 분리된 YB-42는 형태적 특성, 생화학적 성질 및 16S rRNA의 염기서열에 근거하여 Bacillus licheniformis로 동정되었다. B. lichentyormiE YB-42의 -galactosidase 활성은 균체내ㆍ외에서 모두 관찰되었다. 배양상등액으로부터 DEAE-Sepharose와 Q-Sepharose 컬럼 크로마토그래피를 통해 부분 정제한 -galactosidase을 사용하여 para-nitrophenyl--D-galactopyranoside(pNP-Gal)의 가수분해 반응특성을 조사한 결과 와 pH 6.5에 서 최대 활성을 보였다. Melibiose, raffinose와 stachyose는 부분 정제효소액에 의해 완전히 가수분해 되었으며, 분해산물로 galactose가 생성된 것으로 보아 -1,6 결합이 분해된다는 것이 확인되었다. 한편 pNP-Gal과 melibiose의 가수분해 활성은 galactose에 의해 가장 크게 저해되었으며, galactose보다는 낮지만 pNP-Gal의 가수분해 활성이 mannose와 glucose에 의해서도 저해되는 것으로 나타났다.