• BMB Reports
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• 제30권3호
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• pp.205-210
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• 1997

p53 tumor suppressor plays an important role in the regulation of cellular proliferation. To identify proteins regulating the expression of p53 in rat liver, we analyzed p53 promoter by electrophoretic mobility shift assay (EMSA) and DNase I footprinting assay. We found that a protein binds the sequence CACGTG, bHLH consensus sequence in rat p53 promoter. Southwestern blotting analysis with oligonucleotides containing this sequence shows that the molecular weight of the protein is 100 kDa. This size is not compatible with the bHLH family such as USF or c-Myc/Max which is known to regulate the expression of the human and mouse p53 gene. Therefore this 100 kDa protein may be a new protein regulating basal transcription of rat p53. We purified this 100 kDa protein through sequence-specific DNA affinity chromatogaphy.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제52권2호
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• pp.201-204
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• 2014

This study was undertaken to characterize the properties of a 100 kDa somatic antigen from Metagonimus yokogawai. Monoclonal antibodies (mAbs) were produced against this 100 kDa antigen, and their immunoreactivity was assessed by western blot analysis with patients' sera. The mAbs against the 100 kDa antigen commonly reacted with various kinds of trematode antigens, including intestinal (Gymnophalloides seoi), lung (Paragonimus westermani), and liver flukes (Clonorchis sinensis and Fasciola hepatica). However, this mAb showed no cross-reactions with other helminth parasites, including nematodes and cestodes. To determine the topographic distribution of the 100 kDa antigen in worm sections, indirect immunoperoxidase staining was performed. A strong positive reaction was observed in the tegumental and subtegumental layers of adult M. yokogawai and C. sinensis. The results showed that the 100 kDa somatic protein of M. yokogawai is a common antigen which recognizes a target epitope present over the tegumental layer of different trematode species.

• Journal of Life Science
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• 제9권1호
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• pp.35-39
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• 1999

Elecrophoreticl analysis of a 36 kDa protein was runned by SDS-PAGE, isoelectric focusing (IEF) and two dimensional electrophoresis pattern. Major 36 kDa and 25, 46, 48, 66 kDa protein were detected by Coomassie blue stain on SDS-PAGE. Major 36kDa protein was eluted for production of antiserum for serological analysis, IEF and two dimensional electrophoresis. Isoelectric point of 36kDa was aout pH 8.5. Two dimensional electrophoresis of eluted 36kDa showed one point on the gel. Anti-36 kDa serum made by newzilland rabbit for serological test. In ELISA, final titer of antibody was 100×{TEX}$2^5}${/TEX} : 1. Neutralize ability of serum was examined by slide agglutination test and colonization test in rat. Anti-36 kDa serum agglutinated whole cell of V. vulnificus were inhibited colonization on intestine in rat. Accordingly In this paper contain some electrophoretical analysis and serological test of a 36 kDa OMP of V. vulnificus.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제33권2호
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• pp.101-106
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• 1995

정상 한국 어린이의 폐포자충(hewowstiscwinii)에 대한 항체보유 양상을 파악하기 위하여 횐쥐 폐포자충의 조항원을 전기영동(SDS-PAGE)하고 면역이적(Western blot)을 시행하여 각 항원 분획에 반응하는 정상 한국 어린이 혈청에서의 IgG 항체 반응을 관찰하였다 전기영동으로 분리한 수용성 항원의 단백질 분획은 20-200 kDa 범위에서 20개 정도가 관찰되었다. 이들 분획 중에서 신생아의 혈청 15개와 정상 어린이 혈청 130개 합계 145개를 면역이적법으로 검사한 결과 40-55와 116 kDa 분획과 반응하였으나 미국 양성 표준혈청이 반응한 100 kDa 분획과는 반응하지 않았다 이 중에서 40-55와 116 kDa 하나 또는 두 분획에 대한 항체 양성률은 총 40.0%이었 고. 성별 구분이 가능한 남자 50명과 여자 48명에서 각각 56%와 33.3%의 양성률을 얻었다. 이 결과로 우리 나라에서 정상 어린이가 흰쥐 폐포자충 조항원 중 40-55와 116 kDa 분획과 반응하는 항체를 혈청 내에 가지고 있음을 확인하였다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제41권2호
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• pp.121-123
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• 2003

This study was designed to detect and evaluate an antigenicity of low molecular weight proteins of Fasciola hepatica in fascioliasis. Low molecular weight protein of F. hepatica was purified by ammonium sulfate precipitation and Sephacryl S-100 HR gel filtration. The protein obtained was estimated to be 8 kDa on 7.5-15% gradient sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis. Immunoblotting studies showed that the 8 kDa protein reacted with human fascioliasis sera, but not other trematodiasis sera. This result suggests that the 8 kDa protein of F. hepatica is one of diagnostic antigens in human fascioliasis without cross-reaction with other human trematodiasis.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제34권1호
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• pp.30-34
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• 1992

누에의 성충특이체액단백질(adult specific protein : ASP)의 생리 생화학적 특성 및 성충화 발육에 따른 기능을 구명하기 위한 연구의 일환으로 ASP의 분리·정제 및 분자적 특성을 조사하였다. ASP는 Sephadex G-100 gel 여과 및 CM52 ion exchange chromatography에 의해 분리·정제되었으며, 정제된 단백질의 순도는 native-PAGE 및 면역전기영동에 의해 확인되었다. ASP는 분자량 19.5kDa 및 17.5kDa으로 추정되는 2종류의 subunits으로 구성되어 있고 또한 당 및 지질을 포함하지 않는 단순단백질임이 밝혀졌다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제31권6호
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• pp.445-450
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• 2016

본 연구에서는 돈지육 및 돈육 조직 내에 열안정성 수용성 단백질의 존재 여부를 확인하고 항체 생산에 있어 항원으로의 사용 가능 여부를 확인하고자 하였다. 이를 위해 돈지육 및 돈육을 생(raw) 시료와 조리된(cooked) 시료로 구분하여 비열처리 및 열처리법으로 단백질을 추출한 후 단백질 존재여부를 단백질 정량과 SDS-PAGE로 확인하였다. 그 결과 돈지육과 돈육 모두 생 시료를 비열처리법으로 추출한 시료의 경우 25~100 kDa 사이의 다양한 단백질이 확인된 반면 시료를 가열하거나 추출 시 열처리를 한 경우 돈지육에는 100 kDa 이상의 단백질과 30 kDa 및 15 kDa 이하의 일부 단백질이, 돈육에는 100 kDa 이상과 30 kDa 이하의 단백질이 확인되어 돈지육과 돈육에 열안정성 수용성 단백질이 존재하는 것으로 확인되었다. 이들 열안정성 수용성 단백질을 마우스에 면역 후 항혈청 역가를 측정한 결과 면역한 모든 마우스에서 높은 역가를 나타내었고, 생산된 혈청은 돈지육과 돈육에 각각 특이적인 반응성을 보인 반면 다른 축육과 지방육에 대해서는 반응성이 상대적으로 낮았다. 이러한 연구결과를 볼 때 돈지육 및 돈육에 존재하는 열안정성 수용성 단백질이 돈지육과 돈육에 특이적으로 반응하는 항체를 개발하는데 유용한 마커로서 활용이 가능하며, 열안정성 수용성 단백질에 대한 항체개발은 열처리된 축육 가공품 중 돈지육 및 돈육의 분석에도 매우 유용하게 활용할 수 있을 것으로 판단된다.

• 멤브레인
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• 제15권2호
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• pp.121-131
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• 2005

한외여과를 통하여 난백으로부터 라이소자임을 분리, 정제하는 연구를 수행하였다. 교반식 한외여과장치에 분획 분자량(MWCO)이 각각 10 kDa, 30 kDa 및 100 kDa의 셀룰로즈 재질 분리막을 사용하여 알부민과 라이소자임의 투과실험 데이터를 수집하였다. 단백질 용액은 20 mM, pH 6, 7, 8의 인산염 완충용액에 난단백 함량을 $1\%,\;2\%,\;3\%$ 및 $10\%$ 첨가하여 제조하였으며, 막간압력차(TMP)는 $0.5\~3$ bar의 구간에서 실험을 하였다. 분리막의 분획분자량이 증가하면서 투과유속은 증가하였으며, 분리막에서의 막간압력차가 증가하면서 그리고 공급원액의 난백농도가 감소하면서 투과유속은 증가하였다. 또한, 분리막의 분획분자량이 감소하면서 알부민의 라이소자임에 대한 선택도는 증가하였으며, 모든 분리막에서 pH 와 공급원액의 난백농도 그리고 막간압력차가 증가하면서 라이소자임의 알부민에 대한 선택도는 증가하였다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제24권5호
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• pp.688-696
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• 2017

본 연구는 불등풀가사리로부터 분리된 조다당류와 산가수분해된 다당류의 분자량에 따른 이화학적 품질특성과 항산화 활성 및 피부 주름 개선 효과를 확인하였다. 산가수분해 분자량별 다당류의 수율은 100 kDa 이상에서 29.6%로 가장 높았으며, 10 kDa 이하에서 10.4%로 가장 낮았다. 이화학적 특성으로 총당, uronic acid, sulfate 함량은 100 kDa 이상에서 각각 85.82%, 32.85 g/100g 및 39.04%로 조다당에 비해 증가하였다. 색도은 분자량이 증가함에 따라 L 값, a 값 및 b 값이 감소하였으며, 점도는 분자량이 높을수록 증가하였다. ORAC 활성은 100 kDa 이상에서 $180.07{\mu}M$을 나타내어 조다당 $34.70{\mu}M$에 비해 항산화활성이 우수하였다. L132 세포 사멸에 대한 보호효과는 $H_2O_2$ 처리 구간대비 분자량 100 kDa 이상($0.5-5{\mu}g/mL$)에서 87.34-103.85%로 세포 활성이 증가하여 세포 보호효과를 나타내었다. MMP-1 활성은 세포에 UVB를 조사한 후 분자량 100 kDa 이상 $0.05-0.5{\mu}g/mL$ 농도에서 69.67-100.87%의 저해 활성을 나타내었다. 또한, pro-collagen 생합성 역시 UVB를 조사한 후 분자량 100 kDa 이상 $0.05-0.5{\mu}g/mL$ 농도에서 64.91-77.80%의 합성능을 나타내어 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 따라서, 불등풀가사리 유래 산가수분해된 다당류의 분자량에 따른 주름 개선 효과를 통해 피부 항노화 기능성 소재로 다양하게 활용 가능할 것으로 사료된다.

• 한국작물학회지
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• 제58권1호
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• pp.50-56
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• 2013

SELDI-TOF MS를 활용한 저분자 펩타이드 분석을 위해서는 분석시료에 대한 최적화 분석조건을 확립하는 것이 필수적으로 선행되어야 한다. 본 연구는 수수 종자 내 존재하는 10 kDa 이하의 저분자 펩타이드를 프로파일링하기 위하여 활용된 SELDI-TOF MS의 최적화 분석조건을 확립하는데 있다. 분석조건은 (1) 프로테인 칩: CM10(weak cation exchanger), Q10(strong anion exchanger), (2) 바인딩 버퍼의 희석배수: 1/2, 1/5, 1/10, 1/20, 1/50, 1/100, 1/200, (3) Q10의 바인딩 버퍼 강도: 10 mM, 100 mM, (4) 단백질 추출버퍼: sodium borate, sodium borate + acetone, phenol, TCA 버퍼로 하였다. 1. 바인딩 버퍼의 희석배수는 CM10과 Q10 모두 1/20과 1/50이 최적화로 나타났다. 2. Q10의 바인딩 버퍼 강도는 농도가 약한 10 mM에서 더 많은 피크가 검출되었다. 3. SELDI-TOF MS 분석에 적합한 수수 종자단백질 추출 버퍼로는 2~10 kDa 범위에서는 sodium borate 버퍼와 10~20 kDa 범위에서는 phenol 버퍼로 분석되었다.