Park, Hee Ran;Yoon, So Jung;Park, Han-Sul;Shin, Jung-Kue
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.45
no.5
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pp.590-597
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2013
High voltage pulsed electric fields (PEF) treatment is a promising non-thermal processing technology that can replace or partially substitute for thermal processes. The aim of this research was to investigate the microbial inactivation mechanisms by PEF treatment in terms of physiological changes to Saccharomyces cerevisiae. PEF was applied at the electric field strength of 50 kV/cm, treatment time of 56 ${\mu}s$ and temperature of $40^{\circ}C$. The microbial cells treated with PEF showed loss of salt tolerance on the cell membrane and collapse of the relative pH gradient on in-out of cells. Cell death or injury resulted from the breakdown of homeostasis, decreased $H^+$-ATPase activity, and loss of glycolysis activity.
포도는 전세계에서 널리 소비되는 과실로 포도 과피에 존재하는 천연색소인 flavonoid는 혈중 콜레스테롤 함량 저하, 항알러지성, 항암성, 항바이러스성, 항염성의 생리적 기능이 있다고 알려져 있다. 최근에 들어와 이들 과실주스 가공에 열처리를 최소화하는 살균방법으로 자연 그대로의 영양성분, 맛과 향기 개선을 위한 초고압 처리에 관한 연구가 폭넓게 이루어지고 있다. 본 연구는 주스에서 문제가 되고 있는 ethanolic spoilage 균주인 S. cerevisiae의 초고압 살균 효과와 세포 구조적 형태를 연구하였다. 1.2$\times$$10^{6}$ cfu/ml의 S. cerevisiae를 포도주스에 접종하고 24시간 배양하여 멸균한 high barrier주머니에 20m1씩 넣고 2$0^{\circ}C$ 에서 200-600 MPa 조건으로 0-20분 동안 초고압 장치로 실시하였다. 생균수는 YM agar로 poured 방법으로 실시하였으며 200 MPa에서 5, 10, 15, 20분 후의 생균수는 각각 2.2$\times$$10^{7}$ , 4.5$\times$$10^4$, 2.8$\times$$10^4$, 9.8$\times$$10^3$, 9.5$\times$$10^3$cfu/ml로 tailing 현상을 관찰하였고, 400 MPa에서 5분 후 급격하게 감소하였다. S. cerevisiae의 사멸속도는 초고압 처리가 높을수록 증가했으며 세포 손상도는 압력과 처리시간이 길수록 증가하였다. 이들 조건에 따른 효모 세포의 구조적 관찰을 scanning electron microscopy와 electron microscopy로 하였다. S. cerevisiae 세포는 압력에 의한 pinhole, surface roughening을 발견하였고, 세포 내부의 세포질, 액포, 핵 손상과 세포질 물질들이 압력에 의하여 세포벽으로 이동하여 내부가 비어있는 현상을 관찰하였다.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.66-66
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1993
혈액 세포 형성 과정인 조혈 작용은 콜로니 자극인자 (Colony Stimulating Factor, CSF)라 불리는 몇 종류의 당 단백질에 의해 조절된다. 이들 자극인자 중, GM-CSF는 다계통에 작용하는 조절인자로서 과립구와 거식세포의 생성을 조절한다고 알려져 있다 한편 GM-CSF는 생체내에서 백혈구의 형성을 조절하는 인자이기 때문에 골수이식을 한 환자 및 화학요법이나 방사선 치료를 받는 암환자에게서 발생하는 백혈구의 감소현상을 완화시키는 역할을 한다. 혈액의 보조화와 관련하여 의학적 효능을 나타낼 것으로 간주되는 GM-CSF를 유전자 재조합 기술로 효모에서 발현, 정제하여 물리화학적 특성 및 역가를 측정하는 것이 이 연구의 기본목적이다.
Two experiments were conducted to observe the effects of direct fed microbials on metabolic characteristics in sheep and milking performance in dairy cows. A metabolic trial with four ruminally cannulated sheep(60±6kg) was conducted in a 4×4 Latin square design to investigate the supplementation effects of Saccharomyces cerevisiae, Clostridium butyricum or mixed microbes of S. cerevisiae and C. butyricum on ruminal fermentation characteristics and whole tract digestibility. Sheep were fed 1.25 kg of total mixed ration(TMR, DM basis) supplemented with S. cerevisiae (2.5g/day), C. butyricum (1.0g/day) or its mixture(S. cerevisiae 1.25g/day+C. butyricum 1g/day), twice daily in an equal volume. But control sheep were fed only TMR. A feeding trial with 28 lactating Holstein cattle was also conducted for 12 weeks to investigate the effects of the same microbial supplements as for the metabolic trial on milking performance. The cows were fed the TMR(control), and fed S. cerevisiae(50g/day), C. butyricum(15g/day) or its mixture (S. cerevisiae 25g/day + C. butyricum 7.5g/day) with upper layer dressing method. Total VFA concentration and the digestibility of whole digestive tract in the sheep increased by supplementation of S. cerevisiae, C. butyricum or their combined microbials compare to control group. The proportion of propionic acid at 1h(P<0.039) and 3h(P<0.022) decreased by supplementation of S. cerevisiae while tended to increase acetic acid proportion at the same times. Daily dry matter intake(DMI) was not influenced by the microbial treatments, but milk yield(P<0.031) and feed efficiency(milk yield/DMI, P<0.043) were higher for the cow received C. butyricum than those for other treatments. The milk fat content was higher (P<0.085) when cows fed S. cerevisiae(4.11%) than that fed the control (4.08%), the diets with C. butyricum (3.85%) and the microbial mixture. Based on the results obtained from the current experiments, supplementation of C. butyricum or mixture with S. cerevisiae might be increased milk fat content and milk productivity of lactating daily cows. (Key words:Saccharomyces cerevisiae, Clostridium butyricum, Fermentation characteristics,
The enzymes lytic to red yeast cell wall, which were produced by Penicillium lilacinum ATCC 36010 and Bacillus pumilus No 41, hydrolyzed an extracellular mannan from Rhodotonla glutinis IFO 0695. mannan was arranged with $\beta$-1,3 and $\beta$-1,4 linkages alternatively. Using this mannan, substrate specificities of these enzymes were investigated. The one from Penicillium lilacinum was an unique mannanase which hydrolyzed $\beta$-1,3 mannoside bond and the other from B. pumilus was a new type of mannanase which cleaved $\beta$-1,4 mannoside bond with requirement of the existence of $\beta$-1,3 linkage on the reducing side. Both enzymes released two kinds of oligosaccharide from mannan, respectively. However, the enzyme from Pen lilacinum produced tetrasaccharide and disaccharide and one of them, tetrasaccharide, was hydrolyzed to disaccharide further. The one from B. pumilus released tetrasaccharide and hexasaccharide from mannan finally.
An intracellular accumulation of cadmium by the intact cell of an extremely cadmium tolerant yeast, Hansenula anomala B-7, was investigated in the presence of Triton X-100. The uptake of cadmium by the intact cell was efficiently enhanced up to approximately 40% or more by 0.1% of Triton X-100 and Aerosol OT, respectively. The Michaelis constant, Km, done by Lineweaver-Burk plot of accumulation velocity of cadmium vs. cadmium concentration was calculated to be 0.247mM. The optimal conditions of pH and the temperature for the effective cadmium uptake were from neutrality to alkali and 4$0^{\circ}C$, respectively. The accumulation of cadmium was increased approximately 3 times under the shaking incubation, with no correlation to shaking rate. By zinc the cadmium accumulation was decreased.
Redox signaling is one of way to regulate growth and death of cell in response to change of redox of proteins. To search whether translation is regulated by redox, we attempted in vitro translation assay under condition with or without DTT. Interestingly in vitro translation activity was increased up to 40% In the presence of dithiothreitol (DTT). Then we checked whether this positive effect by DTT was further accelerated by addition of thioredoxin (Trx). When a Trx purified from Saccharomyces cerevisiae was added to the in vitro translation extract, we observed a dose-dependent increase in translational activity. These results suggest the possibility of translation factors being redox-regulated via Trx in vivo.
THOC1/Hpr1 is one subunit of THO complex that is an evolutionally conserved assembly involved in the mRNP packaging and mRNA export during transcription elongation. In fission yeast Schizosaccharomyces pombe, an ortholog (spHpr1) of THOC1/Hpr1 was identified based on sequence alignment. A deletion mutant in a diploid strain was constructed by replacing one of spHpr1-coding region with a $kan^r$ gene using one-step gene disruption method. Tetrad analysis showed that the sphpr1 is essential for growth. Over-expression of sphpr1 from strong nmt1 promoter caused no defects of growth and mRNA export. However, repression of the sphpr1 expression resulted in growth inhibition accompanied by accumulation of poly$(A)^+$ RNA in the nucleus. These results suggest that spHpr1 is involved in mRNA export from the nucleus to cytoplasm.
The alcohol fermentation was carried out to study the effect of aeration and unsaturated fatty acids added on the ethanol tolerance of Saccharomyces cerevisiae STV89 and Kluyveromyces fragilis CBS397. The cell growth rate and ethanol production rate was stimulated by aeration and the cell mass production and ethanol production were also substantially improved. With respect to strains, the maximum specific growth rate and overall ethanol productivity of K. fragilis under aerated condition were 6.4 fold and 4.4 fold higher than those of strictly anaerobic condition, although those of S. cerevisiae were increased 1.7 times and 2.3 times by aeration. The addition of ergosterol, linoleic acid and oleic acid also improved the cell growth and ethanol production of S. cerevisiae and K. fragilis. Thus it was found that oxygen and unsaturated fatty acids added played a decisive role on the increase of ethanol tolerance of yeast strains.
Microtubule-based kinesin motor proteins are used for long-range vesicular transport. KIF5s (KIF5A, KIF5B and KIF5C) mediate the transport of various membranous vesicles along microtubules, but the mechanism behind how they recognize and bind to a specific cargo has not yet been completely elucidated. To identify the interaction protein for KIF5B, yeast two-hybrid screening was performed and a specific interaction with the unconventional myosin Myo9b, an actin-based vesicle transport motor, was found. The GTPase-activating protein (GAP) domain of Myo9s was essential for interaction with KIF5B in the yeast two-hybrid assay. Myo9b bound to the carboxyl-terminal region of KIF5B and to other KIF5 members. In addition, glutathione S-transferase (GST) pull-downs showed that Myo9s specifically interact to the complete Kinesin-I complex. An antibody to KIF5B specifically co-immunoprecipitated KIF5B associated with Myo9s from mouse brain extracts. These results suggest that kinesin-I motor protein interacts directly with actin-based motor proteins in the cell.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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