Hwang Mi Ra;Cha Jae Young;Shin Sang Min;Park Jong Kun
Journal of Life Science
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v.15
no.1
s.68
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pp.124-131
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2005
The regulation of gene expression plays an important rolet in cell cycle controls. In this study, a novel $mas3^+$ (mitosis associated protein) gene, a homolog of human SMARCADl, was isolated and characterized from a fission yeast Schizosaccharomyces pombe. The overall homology between the helicase proteins of the two species is $87\%$. This DEAD/H box-containing molecule has seven highly conserved sequence regions that allow us to place it in the SNF2 family of the helicase superfamily. Knock-out cell of $mas3^+$ gene was constructed using kanMX6 as a selection marker. Survival of mas3 null mutant exposed to UV or MMS was similar to those of wild type cells. $mas3^+$ expression was lowest at $G_2$ and gradually increased. Cytokinesis of mas3 null mutant was abnormal at $26^{\circ}C\;and\;35^{\circ}C$ and a large number of multi-septate cells were produced. These results indicate that the $mas3^+$ is involved in cytokinesis and cell shape control.
Kim, Myeong-Dong;Gang, Hyeon-A;Lee, Sang-Gi;Seo, Jin-Ho
한국생물공학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.99-102
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2001
Recombinant Saccharomyces cerevisiae strains harboring various copy numbers of hirudin gene were developed to study dependency of hirudin expression level on its gene copy number. A linear relationship between the copy number of hirudin expression cassette and hirudin expression level was observed up to 10 copies. A double <5-integration vector truncated wi 디 1 the unnecessary bacterial genes before yeast transformation showed a four-fold increase in transformation efficiency and a 1.3-fold enhancement in hirudin expression level compared with a single <5 system. Gratuitous hirudin expression strain was developed by disrupting the GALl gene of S. cerevisiae. Glucose that was fed in a limited manner effectively supported cell growth and hi겨din expression by the gratuitous strain. Effects of methanol concentrations on hirudin production in recombinant Hansenula polymorpha were investigated in continuous and fed-batch cultures. At a steady-state of continuous culture, an optimum methanol concentration of 1.7 g/L was determined at a dilution rate of 0.18 $h^{-1}$ with 1.8 mg/L ${\cdot}$ h hirudin productivity.
This article introduces Gaussian process regression and shows its application with time-course microarray gene expression data. Gene screening for yeast cell cycle microarray expression data is accomplished with a ratio of log marginal likelihood that uses Gaussian process regression with a squared exponential covariance kernel function. Gaussian process regression fitting with each gene is done and shown with the nine top ranking genes. With the screened data the Gaussian model-based clustering is done and its silhouette values are calculated for cluster validity.
Antimicrobial and antitumor activities of Camellia sinensis L seed extracts were investigated. Seed extracts showed antifungal activities against Candida albicans IFO 1594 and Cryptococcus neoformans. Inhibition zone of 20 mm was shown by 70% ethanol extract against C. albicans IFO 1594 at 100 mg/mL. Antifungal activity of seed extract was not decreased by heating at 80 and $100^{\circ}C$ for 30 min or at $121^{\circ}C$ for 15 min, indicating heat-stability of seed component. Growth-inhibitory effects were observed in 70 and 10% of tumor cell line SK-OV-3 and normal ceil line NIH/3T3 at $50{\mu}g/mL$, respectively.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.46
no.1
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pp.1-9
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2020
In this experiment, the Grateloupia elliptica (G. elliptica) was fermented using the fungus Aureobasidium pullulans (A. pullulans) and its extract was obtained from hot water and 70% ethanol solution. The extract was studied for their biological activities such as antioxidant effect, Collagenase and tyrosinase inhibition in comparison to the nonfermented exatract in same solvents. Antioxidative activity test using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) showed that ethanol extract had higher antioxidant activity than water extract. Among all of the samples, the antioxidant activity of G. elliptica fermented ethanol extracts (GEFEE) was highest. Tyrosinase inhibitory activity of GEFEE was highest with 9.8% at the 1,000 ㎍/mL concentration. No inhibition of collagenase from G. elliptica water extract (GEWE) and G. elliptica fermented water extract (GEFWE) was observed, but G. elliptica ethanol extracts (GEEE) and GEFEE showed increased collagenase inhibition activity with increasing concentrations of them. Collagenase inhibitory activity of GEFEE was highest with 50.3% at the 1,000 ㎍/mL concentration. MTS cell proliferation assay was conducted with the GEWE, GEEE, GEFWE, GEFEE and cell viability was over 90% at the 10 ㎍/mL ~ 1000 ㎍/mL concentrations for all of the samples, which suggested that the extracts were noncytotoxic. In conclusion, fermented extracts of G. elliptica could be developed to bioactive functional material for cosmetics with antioxidant and wrinkle improvement effects.
Ha, Jung-Min;Kim, Hyun-Kyung;Kim, Myoung-Rae;Joe, Young-Ae
Journal of Life Science
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v.16
no.7
s.80
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pp.1199-1206
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2006
Plasminogen kringle 5 is a potent inhibitor of endothelial tell proliferation like an endogenous angiogenesis inhibitor, angiostatin consisting of plasminogen kringles 1-4. In this study, we produced the recombinant protein of plasminogen kringle 5 (PK5) employing an Pichia expression system and examined its. effect on~endothelial cell migration and its possible inhibitory mechanism. PK5 was expressed in Pichia pastoris GS115 by fusion of the cDNA spanning from Thr456 to Phe546 to the secretion signal sequence of a-factor prepro-peptide. After methanol induction, the secreted PK5 was purified by using S-spin column. SDS-PACE analysis of the purified protein showed one major band of approximately 10kDa. In in vitro migration assays, the purified protein inhibited dose-dependently the migration of human umbilical endothelial cells (HUVECs) induced by basic fibroblast growth factor (bFGF) or vascular endothelial growth factor (VEGF) with an $IC_{50}$ of approximately 500nM. Accordingly, it inhibited bfGF-stimulated extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) phosphorylation in HUVECs at 500nM. In addition, it also potently inhibited bFGF-induced cytoskeletal rearrangement of HUVECs. Thus, these results suggest that Pichia-produced PK5 effectively inhibits endothelial cell migration, in part by suppression of ERK1/2 activation and blocking cytoskeleton rearrangement.
Optimum conditions for vacuum-drying ad cultivation of yeast cells for the production of active dry yeast were examined. At lower temperature, more drying time was required to dry the yeast pellet to reach the desirable water content(8%). Optimum temperature of vaccum oven and time for drying was 63$^{\circ}C$ and 90 min, respectively. Optimum medium composition for flask culture using cane molasses as the substrate were 0.25% sugar, 0.013% $K_2$HPO$_4$, 0.1% $K_2$HPO$_4$. and 0.125% (NH$_4$)$_2$SO$_4$. Culture temperature $25^{\circ}C$ gave the highest survival rate of dired yeast. After finishing fed-batch culture and the culture was left in the fermentor without adding any sugar or nutrient, survival of the dried yeast harvested from the fermentor increased to 86.0% after 36 hr. It was also observed that the yeast cells with higher budding rates showed lower survival rate.
Automatic counting of yeast cells in baker's yeast culture was tried using a conventional light microscope equipped with a pc camera. Relatively good binary image was obtained by using white LED as microscope light source, but uneven brightness distribution in original image hindered counting accuracy. A block binarization method using local thresholds proportional to local brightnesses was used to get improved binary images. The brightnesses of the blocks were expressed as the value component in HSV color model. Good quality binary images were obtained by binarization on $8{\times}6$ blocks of original images and connected-component labelling of the binarized images produced reliable counting results in the concentration range $1.4{\times}10^5/mL{\sim}1.4{\times}10^7\;cells/mL$.
Jo, Jin-Guk;Jang, U-Jin;Choe, Jin-Yeong;Heo, Gang-Chil;Lee, Jong-Ik
Proceedings of the Korean Society for Food Science of Animal Resources Conference
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2005.05a
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pp.375-379
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2005
본 연구는 ${\beta}-galactosidase$와 phytase활성이 높은 균주의 선발을 목적으로 수각 미생물들을 Kefir와 자연환경에서 분리하여 효소활성을 측정하였다. 배양한 유산균과 효모 균체액을 French pressure cell press로 세포를 파쇄하였을 때, 각 미생물의 단백질농도는 효모보다 유산균이 높은 것으로 나타났다. ${\beta}-galcactosidase$의 비활성은 Kluyveromyces maxiranus와 Candida utilis를 제외하고는 대부분 $0.80{\sim}0.89\;umol/min/mg$ 사이였다. 체적활성의 경우는 Lactobacillus paracasei 및 Lactobacillus rahmnosus, Enterococcus faecium이 각각 15.9 및 14.5, 14.5 umol/ml를 기록하여 ${\beta}-galcactosidase$의 추출재료로 우수하였다. phytase의 비활성은 Lactobacillus paracasei 와 Enterococcus faecium이 0.032와 0.038 umol/min/mg로 가장 높았다. 체적활성의 경우는 Lactobacillus paracasei가 35.12 umol/ml로 가장 높았다. 결론적으로 ${\beta}-galactosidase$와 phytase의 생산측면에서 이용한 미생물중에서는 Lactobacillus paracasei가 가장 우수한 것으로 사료되었다.
The present study was designed to investigate isoenzyme (ACPase, ALPase) pattern and its refulatory function between catabolically repressed and derepressed states in yeast, Saccharomyces uvarum. As the results, no other isoenzyme was detectable in acid phosphatase, but there were three isoenzyme types in aldaline phosphatase. Type "B" isoenzyme among alkaline phosphatases in catabolically repressed cell was derepressed, but in normally cultivated cell, type "C" isoenzyme was derepressed while type "B" activity was lowered. Type "B" isoenzyme could be postulated as repressible enzyme, type "A" as constityityve enzyme and type "C" as L-histidinol phosphatase, respectively, Also, it could be shown that type "B" ALPase, repressible enzyme, compensated for phosphate group supplier under catabolically repressed states. Protein profile in cytoplasmic soluble fraction of exponential phase cell was characterized by negative charged protein.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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