Barley, a monocotyledonous plant, is relatively recalcitrant to the process of Agrobacterium-mediated genetic transformation. In this study, seedlings of six barley cultivars (Keunal-1-Ho, Saessal, Ol, Saechalssal, Seodunchal and Pungsanchalssal) were injured using alkali, oxidizing or reducing agents. They were then transformed using Agrobacterium via vacuum infiltration for the analysis of comparative GUS gene expression. It was determined that chemical injuries causing a slight growth retardation could overall enhance the GUS transformation rate. Hydrogen peroxide was determined to be the most effective.
Rice cells were transformed to express human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig) using RAmy3D promoter. hCTLA4Ig was produced and secreted into culture media inducibly when sugar was depleted. The obstacles of this system are the cell death and release of proteases by sugar starvation. These problems resulted in the losses of stability and productivity of hCTLA4Ig. Therefore, the effects of proline as an inhibitor of cell death were investigated. When 4 mM proline was added in sugar-free media, the cell death and release of proteases were reduced. As a consequence, the production of hCTLA4Ig was enhanced. In addition, the effects of protein stabilizers such as gelling agents were studied. It was found that the application of 0.01 g/L gelatin led to an increase in hCTLA4Ig production. This increase might be originated from the stabilization of hCTLA4Ig. In conclusion, the production of hCTLA4Ig could be enhanced by the additions of proline and gelatin in transgenic rice cell cultures.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.34
no.1
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pp.83-87
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2010
We present here the effect of extracellular matrix (ECM) on the proliferation and physiology of HL-1 cardiac cells. HL-1 cell is from AT-1 mouse atrial cardiomyocyte tumor lineage. HL-1 cell can be serially passaged, yet they maintain the ability to contract which is a promising character of HL-1 cell for the cell based biosensors. HL-1 cells grow up on the ECM which can affect on the attachment and growth of HL-1. In this paper, we discuss HL-1 cell-ECM interactions with three different ECMs and non-treated surface. HL-1 cells are grown for 4 days after seeding then observed their attachment. Also they were immunostained by hoechst and EthD-1 for proliferation, phalloidin for Factin, and DAPI for nuclei. Fibronectin was revealed as the proper ECM material for HL-1 cell culture. This study can provide basic information for understanding the cell-ECM interactions and growth of HL-1 cells.
The growth kinetics and the production of $\beta$-glucuronidase from transgenic tobacco's suspension culture was investigated in the flask culture and a 2.5 L bubble column reactor. The growth of bubble column reactor was similar to that of flask culture. However, in the bubble column reactor, the production of $\beta$ -glucuronidase reached 2850 U/mg (85-fold higher than that of flask culture). In both case, the production level of $\beta$ -glucuronidase was fluctuated, which was resulted from periodical degradation of the protein. Sucrose is important component in plant culture medium. Twice addition of sucrose in bubble column reactor could not improve cell growth, since other components in a medium were already depleted. However, the addition of sugar decreased cell size, which facilitated the operation of bioreactor. The production of $\beta$ -glucuronidase was continuously increased, however final concentration of $\beta$ -glucuronidase was similar to that without sucrose addition.
Perilla [Perilla frutescens (L.) Britt] seedlings are easy to grow and eaten as the health vegetable sprout. Two day old perilla seedlings since germination were given a mild wounding using cell wall lytic NaOH/SDS solution for infiltration with recombinant Agrobacterium cells treated with phenolic compounds. In the analysis of fluorometric GUS gene expression for the transformed perilla seedlings, GUS enzyme activity was the highest by the combined treatments of 50 mM acetosyringone and 0.5% NaOH solution containing 0.01% SDS implying a synergic effect. This result could be successfully applied for demonstrating hepatitis B virus antigen (HBsAg) protein expression.
Park, Mi-Ok;Oh, Hoon-Kyu;Kim, Yong-Jin;Park, Jae-Bok
The Korean Journal of Cytopathology
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v.8
no.2
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pp.164-169
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1997
A case of plasmacytoma of the ovary and breast, which developed in a patient with a solitary plasmacytoma in the lumbar vertebra for nine months, was diagnosed cytologically and histologically. Enlargement of the right ovary and multiple palpable masses in the right and left breast were already present at six months after the diagnosis of vertebral solitary plasmacytoma. At eight months, plasma cell leukemia developed, and nine months the enlarged both ovaries, replaced by yellowish-gray solid tumors showed infiltration of immature plasma cells. The cytologic features of the ovarian tumors were same with those of the breast tumor. The tumor cells were of predominantly immature plasma cells with one or more nuclei. Some mature plasma cell had an eccentric nucleus with single nucleolus and peripherally clumped chromatin. Binucleated or multinucleated giant cells were often present. Histologically, sheets of poorly differentiated plasmacytoid tumor cells were separated by strands of hyaline fibrous tissue. On immunohistochemical stains, the tumor cells showed strong reactivity for lambda-light chain but no reaction for kappa-light chain, cytokeratin, or leukocyte common antigen.
hFSH (human follicle stimulating hormone) is heterodimer consisting of $\alpha$ and $\beta$ subunits. Since assembly of the both subunits in the cell is often the rate-limiting step in production of functional hormone, single-chain hormones have been engineered by genetically linking two different cDNA fragments with a linker sequence. Using retrovirus vector system, the resulting recombinant hFSH gene was transferred in CHO cells and chicken embryos, and the expression of the gene was investigated. In CHO cells, protein synthesis from the single-chain FSH gene was 17 fold higher than that from the heterodimeric counterpart. In the study of transgenic chickens, ten of the eleven chicks hatched from 62 embryos manupulated with recombinant retrovirus stock was determined to carry transgenic genes. RT-PCR analyses confirmed transcription of the single-chain FSH gene, however, no recombinant FSH was detected from the blood samples.
The vermilion zone of the lips is mucocutaneous junction between the skin and the oral mucosa of lips. Diseases of the vermilion zone may be related to a local or systemic condition, and can be manifestation of a systemic disease. In this cases, we introduced patients with hemorrhagic, ulcerative lesions on the vermilion zone and reported plasma cell cheilitis and lesion of the vermilion zone related to Stevens-Johnson syndrome(SJS).
Morphological characters of 14 taxa in 6 sections Ischnostachya(one taxon), Anomalae(one taxon), Capitellatae (five taxa), Debiles (one taxon), Capillares (one taxon) and Molliculae (five taxa) of genus Carex (Cyperaceae) were reexamined. The epidermal patterns of perigynium, achene and leaf were investigated using by using a scanning eletron microscope (SEM) and a light microscope (LM). Morphological characters such as rhizome, spike, width of leaf, leaf sheath, involucre, involucre sheath, beak of perigynium, perigynium shape, and leaf epidermal patterns were useful for the identification of observed fourteen taxa. The number of spike, arrangement of psitillate or staminate spike and presence of bract were very useful characters to divide the treated 14 taxa into two groups. A key based on data was presented here.
The Journal of the Convergence on Culture Technology
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v.5
no.3
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pp.327-332
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2019
Today's scientists try to remove heavy metals with many new technologies such as phytoremediation. One of the best cutting edge technologies is developing transgenic plants to remove certain heavy metal in soil. I constructed the transformation vector expressing T. goesingense Metal Transport Protein1 gene and TgMTP1: GFP genes. The transgenic plants were selected and confirmed the transformed genes into Arabidopsis thaliana genome. Expression was confirmed in several parts in Arabidopsis cells, tissues and organs. When TgMTP1 overexpressing Arabidopsis thaliana were subjected, transgenic plants showed higher heavy metal tolerance than non-transgenic. For further study I selected the transgenic plant lines with enhanced tolerance against four different heavy metals; Zn, Ni, Co, Cd. The accumulation of these metals in these plants was further analyzed. The TgMTP1 overexpressing Arabidopsis thaliana plant of selected lines are resistant against heavy metals. This plant is characterized by the expression of the MTP1 gene accumulating heavy metal in the vacuole and being simultaneously expressed on the plasma membrane. In conclusion, these plants may be used in plant purification applications, and as a plant with increased tolerance.
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