High-density perfusion cultivation was performed to produce extracellular polysaccharide(ECP) as immunostimulating agents in suspension cell cultures of Angelica gigas Nakai. In batch culture, the maximum cell density was 16.8 gDCW/L at day 6 and 0.9 g/L of ECP was obtained at day 8. When the medium exchange was started at the fifth day after inoculation for the perfusion culture, high concentration of the cells at 23.8 gDCW/L could be achieved with continuous production of ECP. Treatments of ultrasound and Pluronic F-68 were found to be helpful for the secretion of intracellular ECP into the culture medium.
To evaluate the biological effects of dykellic acid, a novel apoptosis inhibitor, isolated from microorganism on the plant cells, the cell growth, protein contents, and superoxide dismutase (SOD) activity were investigated in suspension cultures of tobacco photomixotrophic cultured (PM) cells on 12 days after different concentration of chemical treatment. The cells were cultured in MS medium containing 0.7 mg/L 2,4-D, 0.3 mg/L kinetin, 30 g/L sucrose and 200 mM NaCl at $25^{\circ}C$ in the light (100 rpm). Dykellic acid strongly inhibited the cell growth by evaluating the cell fresh wt and the ion conductivity in the medium ($IC_{50}$/, about 20 $\mu$M). The results as inhibition of cell growth and cell wall damage were same. The compound significantly increased the protein contents and the SOD specific activity in proportion with the dosage. The results suggested that dykellic acid may have biological activity in plant cells and tobacco PM cells may be suitable biomaterials for in vitro evaluation of the biological activity of natural products.
In order to product the furofuranoid lignans, (+)-eudesmin which is one of the secondary products from Magnolia sieboldii. through cell suspension cultures; various culture media, initial sucrose concentration, elicitations, shaking speeds, and inoculum sizes. Among the culture media tested, MS medium had a pronounced effect on suspension cell growth and (+)-eudesmin contents. The maximum dry cell weight (DCW) of 3.71 g per flask was obtained at inoculum size of 0.5 g and in MS medium supplemented with $3\%$ sucrose plus 0.5 mg/L 2,4-D after 8 weeks. (+)-Eudesmin biosynthesis was stimulated with high initial sucrose concentration ,and the maximum (+)-eudesmin production of $3.2{\mu}g/g$ DCW was achieved at 200mg/L chitosan and $5\%$ initial medium sucrose. The optimal shaking speeds for dry biomass accumulation and (+)-eudesmin contents was 130 rpm. This work is considered to be helpful for large-scale bioprocessing of Magnolia sieboldii suspension cell cultures in bioreactor.
We investigated the levels of glutathione (GSH) and its oxidized form (GSSG) in 24 cell lines derived from various plant species to understand the antioxidative mechanism in plant cell cultures. The total glutathione content was 98$\pm$27 $\mu$g/g cell fresh wt, showing a slight difference in plant species. The average contort of GSH and GSSG was 72$\pm$20 and 26$\pm$10 $\mu$g/g cell fresh wt, respectively. The average GSH content in plant cell lines occupies approximately 73% in total glutathione. During the suspension cultures of Scutellaria baicalensis, one of the plant species we tested, the GSH content decreased in proportion to the cell growth during the exponential growth stage, showing the low level at the stationary growth stage (84 $\mu$g/g cell fresh wt), whereas the GSSG content increased to the stationary growth stage (31 $\mu$g/g cell fresh wt). The results suggested that the ratio of GSH and GSSG should be involved in the cell growth and antioxidative mechanism in cultured cells.
Cell lines of Ginkgo biloba were derived from different plant parts and from ten varieties spanning various geographic locations. They had various properties of growth and product formation. More than three flavonol glycosides were present in low concentration in callus and suspension cultures. Cell growth and biosynthesis of flavonol glycosides were found to be affected by medium composition. Culture conditions which influenced cell growth and product formation were also examined. Light stimulated the flavonol glycosides biosynthesis and ten times higher flavonol glycosides content was obtained as compared with the result without light.
Kim, Hye-Jin;Kim, Won-Bea;Yoo, Dong-Lim;Kim, Su-Jeong;Lee, Jun-Gu
Korean Journal of Plant Resources
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v.21
no.1
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pp.60-65
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2008
Kalopanax pictus was cultured in vitro to find out optimal condition for embryogenic cells proliferation in liquid media rapidly. Embryogenic cells were induced from leaves and petiols of Kalopanax pictus. Optimum culture medium appeared to be a 1/2MS medium supplemented with 2.0mg/L 2,4-D and 0.1mg/L BA. To find out optimal conditions, embryogenic cells were cultured some condition as different concentrations of 2,4-D, medium and sucrose. There was cultured on 1/2MS liquid medium containing different concentration of 2,4-D. When embryogenic cells were cultured on 1/2MS liquid medium supplemented with 1.0mg/L 2,4-D, cell propagation rate was higher than other concentration of 2,4-D. When embryogenic cells were cultured on different media that MS, Gambols B5, N6, White, SH medium, observed the highest multiplication rate among Gambols B5 and White medium. To find out of effect of sucrose to embryogenic cells propagation, we tested cells under different concentrations. Optimal concentration of sucrose appeared to be a basal medium added 3% sucrose. Above results suggest that optimal conditions for proliferation of embryogenic cells were established Gambols B5 and White medium added 1.0mg/L 2,4-D and 3% sucrose. There is every possibility achieving embryogenic cells proliferation via bioreactor culture system in Kalopanax pictus.
A structured kinetic model is proposed to describe cell growth and secondary metabolite, flavone glycosides, synthesis in batch suspension culture of Scutellaria baicalensis G. The model has been developed by representing the physiological state of cell described as the activity and viability which can be estimated based on the culture fluorescence. In the model, three type of cells are considered; active-viable, nonactive-viable and dead cells. Viable cell weight could be determined based on the relative fluorescence intensity. The flavone glycosides could be produced by both active-viable and non-active viable cells with a different production rate. And the model includes the cell expansion due to glucose concentration and death phase which accounts for the release of intracellular secondary metabolite into medium. Dependent variables include substrate concentration(glucose), cell mass(dry cell weight and fresh cell weight), product concentration(flavone glycosides), activity and viability. Satisfactory agreement between the model and experimental data is obtained from shake flask culture of Scutellaria baicalensis G. The proposed model can predict the cell growth and flavone glycosides synthesis as well as intermediate materials.
This experiment was carried out to establish a year-round production system of pathogen-free stock through micropropagation in Fritillaria thunbergii as medicinal bulbous plant. The effect of different types of culture method and plant growth regulators, activated charcoal and mannitol on bulblet formation and subsequent growth were investigated. The MS solid medium containing 1. 0 mg/L kinetin and 0. 3 mg/L NAA was effective on bulblet formation and propagation rate compared to liquid and suspension culture. Addition of activated charcoal at 0. 01% to 0. 1% in the medium promoted bulbing of cultured bulblets and shoot formation. Addition of 1% to 2% mainnitol in MS medium was effective on the formation of bulblet and subsequent growth of bulblets compared to control. In addition of inhibitors, $10{\sim}100\;mg/L$ B-9 and Chloromequat had effective to stimulate bulblet growth but their effects were not so much as mannitol treatment. ABA treatment had detrimental effect on survival rate of explant and bulblet formation.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.13
no.3
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pp.170-176
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1993
The yield, viability and continuous culture of isolated Italian ryegrass protoplasts were investigated. The effects of cold treatment (4^{\circ}C.$) for 7 days and basic LS medium supplemented with 5mg/l $AgNO_3$ showed effectively on embryogenic callus induction and regeneration responses of immature and mature embryos or young inflorescences subcultured every 4 weeks on basic medium. The optimum combinations of growth regulator on the regeneration responses was 0.2mg/l BAP and 2mg/l 2, 4-D. Calli induced inflorescences were suspended in its liquid medium for 5 days before enzyme treatment. Maximum protoplast yield and viability were obtained after digestion in enzyme solution contained 4% cellulase R10. 2% macerozyme and 2% pectinase in 0.6M mannitol. Cell division and microcalli development were observed in isolated protoplasts cultured in agarose culture of KM8P medium.
The effects of sucrose on cell growth and anticancer drug taxol production were investigated in cell suspension cultures of Taxus cuspidata. The cells were cultured at various concentrations of sucrose (20 to $100g/\ell$). The highest specific growth rata was achieved at $40g/\ell$ of sucrose as 0.076 day-1 and the highest final cell density, 34 g DCW/$\ell$ after 25 days of culture, was obtained at $60g/\ell$ of sucrose. The cell yield(Yx/s) was found to be 0.55g cell/g sucrose and doubling time (Td) was 9.12 day. High concentration of sucrose (80, $100g/\ell$) and the addition of osmoticum enhanced the production of taxol significantly. The maximum taxol production was $1.36mg/\ell$ at $80g/\ell$ of sucrose, which was 0.01% as a specific content.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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