보리로부터 분리한 Fusarium sp. BYA-1균주의 감자한천배지 배양체로부터 여러 식물병원곰팡이에 길항력을 나타내는 세 개의 항생물질을 분리하였다. 추출한 세 개의 항생물질은 silica gel관 크로마토그래피와 분취 HPLC, 그리고 Phytolhthora capsici 검정을 이용하여 정제하였다. 이들 분리한 항생물질들을 동정하기 위하여 융점 결정, 자외선흡광법, 질량분석 및 핵자기공명법 등의 기기분석을 실시하였다. 그 결과, 세 개의 항진균성 항생물질들은 fusarielin A, enniatin B, 그리고 enniatin B\ulcorner으로 각각 동정되었다. 분리한 세 개의 물질 중 fusarielin A가 공시된 곰팡이에 가장 강한 항균활성을 나타내었으며, 최소저해농도는 40$\mu\textrm{g}$/ml이하였다. Fusarium속 균주가 구조적으로 다른 두 종류의 항진균성 항생물질인 fusarielin A와 enniatins을 동시에 생성한다는 것은 본 논문에서 처음으로 보고하는 것이다.
Bacillus lichemiformis Kll, a plant growth promoting rhizobacterium was reported as a producer of auxin, siderophore, as well as antifungal cellulase under some culture conditions. In vitro test, B. licheniformis Kll represented excellent antagonistic ability against Fusarium oxyspoum (KACC 40037), and showed broad spectrum against other phytopathogenic fungi. B. licheniformis Kll had cellulolytic activity toward not only carboxymethyl-cellulose (CMC) but also insoluble cellulose, such as fungal cell wall cellulose, filter paper (Whatman No. 1), and Avicel. In addition, we confirmed antifungal substance production by butanol-extract methods. The strain produced optimally the antifungal substance when it was cultivated at pH 9.0, 30${\circ}$C for 4 days on nutrient medium. The biological control mechanisms of B. lichemiformis Kll were caused by antifungal substance, cellulase and siderophore against phytopathogenic fungi.
The purpose of this study was to verify the antifungal properties of various herbal medicines belonging to the Ranunculaceae family and to find an extraction method effective in inhibiting fungal growth. When antifungal activity was measured in a liquid medium with extracts obtained by either hot water extraction or organic solvent extraction of the herbal medicines Clematis apiifolia, Coptis chinensis, and Pusatilla chinensis, effective results were obtained from the chloroform extract. In addition, fungal growth inhibition experiments were performed on unicellular fungi, Candida albicans, Candida tropicalis, and Candida lusitaniae, and on filamentous fungi, such as Pythium ultimum, Aspergillus fumigatus, and Fusarium oxysporum, using disk diffusion experiments on solid media. It was confirmed that P. chinensis extract has excellent antifungal properties against Candida spp. and C. apiifolia extract against filamentous mold. Finally, GC-MS analysis was performed to explore the useful antifungal substances present in the extract. As a result of the study, thurbergenone from C. apiifolia and 16-hydroxycleroda-3, 13(14)-dien-15, 16-olide (16-HCDO) from C. chinensis were confirmed as antifungal candidates. In conclusion, it was confirmed that C. apiifolia, C. chinensis, and P. chinensis have antifungal activity against various fungi, and in GC-MS analysis, all herbal medicines were confirmed to have different antifungal candidates. These results indicate that the Ranunculaceae family has evolved in several directions for fungal resistance traits.
t-Cinnamamide has been isolated from the culture filtrate of the isolates, Streptomyces. sp. No.297 The identity of the compound was established by UV and IR spectra, NMR, mass spectra and by chemical reactions. Through antimicrobial activity test using a two-fold serial agar dilution mothjod, t-cinnamamide showed strong growth inhibitory activity against Pellicularia sasakii, Pyriculario oryzae and some pathogenic fungi, but not inhibitory over procaryotes tested.
Streptomyces griseorubiginosus var. soyoensis previously identified, produced two kinds of antifungal antibiotics, trans-cinnamamide and another new substance. The latter was identified to be a new substance of tetraene family by establishment of UV, IR, NMR, mass spectra and chemical reactions and rotatively named as Tetraene KM-A. Through an antimicrobial activity test using serial agar dilution method, Tetraene KM-A showed strong growth inhibitory activity against fungi and yeasts, but not against procaryotes tested. The inhibitory action of Tetraene KM-A on fungi was remarkably ineffective when some of sterols were added to the cultural media. $LD_{50}$ of the Tetrene KM-A to mice and rats by intravenous injection were 84.3 and 90.4 mg/kg respectively. $LD_{50}$ to mice by oral feeding was 1503mg/kg.
To isolate a novel antifungal compound, we obtained 107 kinds of endolichenic fungi from Lichen Bioresources Center and examined their antifungal capability. Two fungi EL123 and EL156 showed high antifungal activity against Candida albicans in both MYA and EMM media. Nucleotide sequence analysis and NCBI Blast analysis in ITS region including 5.8S rRNA revealed that EL123 has 95% homology with Thielavia microspora and EL156, 99% with Cryptosporiopsis diversispora which belong to Ascomycetes. It observed that EL156 formed a branched mycelium whereas EL123 formed a straight one. EL156 also produced the antifungal substance faster than EL123 when they grew on MY liquid medium.
The work has been carried out for the development of antifungal antibiotics possessing curative effect in the control of sheath blight disease of rice plant. Soil samples were collected from over 1600 spots throughout the country. More than 1300 specimens which seem to be the genus Streptomyces were isolated from the soil samples. Screening procedures consist of respective processes by four steps. Those are growth inhibition test in liquid culture, paper disk method, dendroid test and green house test. 102 isolates appeared to be active against Pellicularia sasakii when all specimens isolated were examined by the first growth inhibition test. Finally a strain of Streptomyces forming strong antifungal substances against P. sasakii was selected from a soil sample of Mt. Soyo, Kyeongi Province. Antifungal substances formed by the strain were isolated and purified from the culture broth and examined for antimicrobial activities as to be specific against fungi but not active on bacterial growth.
For the production of antifungal compound, strain B-1 was used as a strong producing strain among bacteria isolated from various soil samples. The optimum medium for the production of antifungal compound was PDB (potato starch 0.4%, dextrose 2%, pH5.1). The optimum conditions for the production of antifungal compound didn't affect on the carbon and nitrogen sources. The produced compound showed broad antimicrobial activity to the tested strains such as five fungi and four bacteria. The optimum pH and temperature of the production antifungal compound were pH 5.0 and 28$^{\circ}C$, respectively. Ether extrct (1$\mu\textrm{g}$/${\mu}\ell$) of culture broth was confirmed inhibitory zone by the thin layer chromatography and plate assay. The antimicrobial compound was unstabled after heat (121$^{\circ}C$) trsatment. Strain B-1 was mass cultured in a 5-liter tormentor, containing 3 liters of PDB medium at 28$^{\circ}C$, pH 5.0, 120 (pm with aeration (1L/min).
The optimum production condition for the antibiotic from Bacillus thuringiensis BK4 was determined, and the suppression rate of Fusarium-wilt by the butanol-extracted antibiotic was verified by employing tomatoes in vitro and in vivo pot tests. Cell growth and antifungal activity were the best when 0.5% xylose and 0.2% peptone No.3 were given as carbon and nitrogen sources, respectively, in the presence of 5mM $CaCl_2$. The partially purified antibiotic successfully prevented Fusarium oxysporum pathogen in pot experiments. When the pots were treated with both live cells and the partially purified antibiotic, an additive-effect was seen in the suppression of Fusarium-wilt, but synergistic effect was not detected. The antibiotic, denoted BK4, purified by Sephadex LH-20 column chromatography was eluted with a single peak at a retention time of 38 min. on prep-HPLC; Minimum inhibition concentration of the homogenous antibiotic was determined to be 50${\mu}$g/ml.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1995.04a
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pp.68-68
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1995
청주 근처 토양에서 분리한 에너지 대사 저해제인 2,4-dinitrophenol (DNP)에 내성을 보이는 Streptomyces CM 001 균주가 생산하는 항진균성 물질(CUA)을 순수하게 분리 정제하고 화학분석을 통한 구조의 규명, 항진균활성 연구 및 유전적 변이원성(mutagenicity)등을 살펴보았다. CM 001 균주를 베네트 배지와 같이 영양성이 좋은 배지에서 배양시 항진균 활성이 동반 생성되는 색소와 비례적으로 증가했다. 배양 상등액 속의 항진균성 물질들을 염산처리, 유기용매처리 후 Amberlite XAD-4 column chromatography, silica gel adsorption-Sephadex LH-20 chromatography 과정을 통해 색소가 제거된 부분 정제 백색분말로 얻었다 이로부터 Prep. HPLC과정을 통하여 8종의 화합물을 각기 분리하였는데 이 화합물들은 동일한 UV spectrum과 216, 260nm에서 최대 흡수파장을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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