부추에 존재하는 항미생물 활성물질에 관한 정보를 얻고자 항미생물 활성의 검색 및 항미생물 활성물질의 탐색을 시도하였다. 부추 MeOH추출물의 항미생물 활성을 17종의 미생물을 대상으로 검색한 결과 Gram 양성의 세균, Gram 음성의 세균 그리고 효모에 대해서 광범위한 미생물 증식 억제능을 나타냈다. 부추를 MeOH로 추출, 용매분획하여 얻어진 활성을 silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, TLC, silica gel partition chromatography, HPLC 등의 방법으로 분석한 결과 부추에 존재하는 항비생물 활성물질은 약간의 극성을 띠는 중성물질로 200-400정도 분자량을 갖는 6종의 항미생물 활성물질의 존재가 확인되었다.
무화과잎의 메탄올추출물을 용매분획하여 얻은 분획중 산성 분획과 페놀성 분획이 항미생물 활성이 강한 것으로 나타났고 페놀성 분획이 산성 분획보다 항미생물 활성이 더 강하여 페놀성 분획중의 항미생물 활성물질을 동정하기 위하여 먼저 silica gel column chromatography, RP-8 column chromatography 및 preparative liquid chromatography를 행하여 정제하였고 정제된 항미생물 활성물질을 IR, $^{1}H-NMR$ 및 MS에 의한 기기분석을 통하여 동정한 결과 각각 psoralen, bergapten, umbelliferone 및 ${\beta}$-sitosterol로 구명되었다.
땅콩껍질에 함유된 항미생물 활성물질의 탐색을 위해 땅콩껍질을 MeOH로 추출하고 이 MeOH 추출물을 용매분획하여 EtOAc 중성획분을 얻었다. 이 획분에 함유된 항미생물 활성물질을 silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, ODS column chromatography로 정제한 다음 HPLC를 이용하여 1종의 화합물을 단리하였다. $^1H-NMR$, MS 및 NOESY 분석에 의해 땅콩껍질로부터 분리된 항미생물 활성물질은 pratensein으로 동정되었다.
치자(Gardenia jasminoides Ellis) 열매의 methanol추출물은 Gram양성 세균, Gram음성 세균, 효모 등의 미생물에 대하여 항미생물 활성을 보여, solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, ODS column chromatography, HPLC등에 의해 얻어진 활성 물질을 MS, GC-MS, $^{1}H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 그리고 2D-NMR 등의 기기 분석에 의해 3,4-dihydroxybenzoic acid는 동정하였다. 치자 열매에서 3,4-dihydroxybenzoic acid가 항미생물 활성물질로 분리 동정된 것은 처음으로 생각된다. 3,4-dihydroxybenzoic acid는 건조 치자열매에 g당 $32.7\;{\mu}g$ 정도 함유되어 있었다.
두릅나무(Aralia elata $S_{EEMANN}$) 껍질의 MeOH추출물이 세균과 호모, 곰팡이 등에 대한 항미생물 활성을 보여 solvent fractionation, Silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, silica gel partition chromatography, HPLC 등의 기법으로 활성물질을 순차 정제하여 얻어진 활성물질을 1% acetic acid-MeOH (60 : 40, v/v)용매계의 HPLC에 의해 분리하였다. 분리된 성분($t_r$ 17.1 min)의 활성본체를 구명하기 위하여 $MS,\;^1H-NMR\;and\;^13C-NMR$. 등을 이용하여 기기분석한 결과, trans-3,4-dihydroxycinnamic acid로 동정되었다. 3,4-dihydroxycinnamic acid가 두릅에서 항미생물 활성물질로서 분리, 동정된 것은 처음으로 생각된다.
밤나무 잎에 함유된 기능성 물질 검색의 일환으로 항미생물 효과를 검정하고 활성물질의 분석을 시도하였다. 예비실험을 통해 추출물의 활성을 확인한 후 시료를 n-hexane, EtOAc, MeOH로 순차 추출하여 정제한 다음 활성이 강한 MeOH 분획의 0.2 g, 0.5 g에 해당하는 추출물로 13종의 미생물에 대해 활성을 측정한 결과, Cram 양성 세균 중에서 S. aureus와 S. epidermidis는 대조구로 사용한 benzoic acid보다 강한 활성이 나타났고, M. luteus와 L. mesenteroides, B. subtilis에서도 활성이 인정되었으며, Gram 음성 세균인 E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa에서도 강한 활성이 나타나 밤나무 잎 추출물은 비교적 넓은 항균 spectra와 활성이 있음이 확인되었다. 이에 활성물질을 규명하고자 시료를 solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, HPLC 등으로 정제하고 활성이 나타난 산성 획분과 페놀성 획분의 물질을 분리한 후 MS, $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 등으로 분석한 결과, 산성 획분에서는 stigmast- 5-en-3-ol($\beta$-sitosterol)이 활성을 갖는 물질로 나타났다.
두릅나무(Aralia elata $S_{EEMANN}$) 껍질의 MeOH 추출물이 세균과 효모, 곰팡이에 대해 항미생물 활성을 보여 solvent fractionation, silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, silica gel partition chromatography, HPLC, TLC 등의 기법으로 주활성본체를 분리하였다. MS, GC-MS, IR, 1^H-NMR, 13^C-NMR 등의 기기분석을 통해 항미생물 활성의 본체구명을 시도한 결과 3,4-dihydroxybenzoic acid로 동정되었다. 3,4-dihydroxybenzoic acid가 항미생물 활성본체로서 분리된 것도 처음으로 생각되며 두릅에서 이 물질이 분리, 동정된 것도 처음으로 생각된다. 건조 두릅껍질 g당 3,4-dihydroxybenzoic acid의 함량은 0.869mg 정도이었다.
무화과잎으로부터 천연 항미생물 물질의 개발을 검토할 목적으로 무화과잎을 메탄올로 추출하고 ethyl acetate와 buffer용액을 이용하여 용매분획하였고 각 분획에 대한 항미생물 활성을 측정하였으며 활성이 강한 분획에 대한 최소저해농도(MIC)와 최소치사농도(MLC)를 측정하였다. 무화과 잎중의 항미생물 활성은 산성 분획과 페놀성 분획에서 강하게 나타났으며 미생물의 종류에 관계없이 활성범위가 넓었다. 페놀성 분획이 산성 분획에 비하여 MIC와 MLC값이 상대적으로 낮았고 MIC값의 경우 두 분획이 공통적으로 세균보다는 진균류에 대하여 낮았으며 특히 저온세균인 Pseudomonas aeruginosa에 대한 MIC와 MLC값이 대단히 낮음을 알 수 있었다.
헛개나무 어린 줄기와 잎의 열수추출물에서 얻어진 MeOH 가용 획분에 항미생물 및 항산화 활성을 보여, 이들 활성 본체를 규명하고자 활성물질을 solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, ODS column chromatography로 순차정제하고, HPLC등에 의해 두 종의 활성물질을 단리하여 LC-MS, GC-MS 분석에 의해 vanillic acid와 ferulic acid로 각각 동정하였다. 두 활성물질은 그람 양성 세균 및 그람 음성 세균 그리고 효모 등의 미생물에 항균 활성을 보였다. 또한, vanillic acid와 ferulic acid의 항산화 활성은 vanillic acid보다 ferulic acid가 강한 활성을 나타내, DPPH 자유라디칼 소거능을 나타내는 농도는 ferulic acid가 $14\;{\mu}g/mL(SC_{50})$을, 그리고 vanillic acid가 $8\;{\mu}g/mL(SC_{10})$이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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