A study on the optimum hydrolysis conditions of fish skin through the aid of enzymes and the development of a natural seasoning using the hydrolysate has been carried out for the effective utilization of fish skin. Using the "pH-drop" techniques the collagenase and pronase were identified as most suitable for this purpose. The $K_m$ and $V_{max}$ values of pronase were 1.82 mgN/ml and 0.06 mgN/mL/min, respectively. The hydrolysis conditions of the cod skin for the pronase were as follows: reaction temperature, $50^{\circ}C$; reaction time, 3hrs; pH 6; enzyme concentration, 0.03%. The degree of hydrolysis at these conditions was 76.8%. But after hydrolyzing cod skin with collagenase for 1hr, when the pronase was treated, the degree of hydrolysis was 83.13%. The molecular weight of the hydrolysate was 8,000 daltons. Among the amino acids in the hydrolysate, glycine(27.95%), glutamic acid(10.94%), proline(7.39%), aspartic acid(9.47%) and serine(7.39%) were responsible for 64.23% of the total amino acids. But valine, methionine, isoleucine, leucine, phenylalanine and histidine having a bitter taste were only 13.05%. From the results of the sensory evaluation, the imitation sauce which was made of 20% fermented soy sauce prepared from the hydrolysate was at least similar to the traditional soybean sauce in product quality. The complex seasoning containing 31.7% of the hydrolysate was nearly equal to complex seasonings on the market, too.
Ozone is a gaseous molecule able to kill microorganisms, such as yeast, fungi, bacteria, and protozoa. However, ozone gas is unstable and cannot be used easily. In order to utilize ozone properly and efficiently, plant oil can be employed. Ozone reacts with C-C double bonds of fatty acids, converting to ozonized oil. In this reaction, ozonide is produced within fatty acids and the resulting ozonized oil has various biological functions. In this study, we showed that ozonized oil has antimicrobial activity against fungi and bacteria. To test the antimicrobial activity of ozonized oil, we produced ozonized olive oil. Ozonized olive oil was applied to Staphylococcus aureus, methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, and Candida albicans. Antimicrobial activity was assayed using the disk diffusion method following the National Committee for Clinical Laboratory Standards. Minimal inhibitory concentrations (MIC) were 0.25 mg for S. aureus, 0.5 mg for S. epidermidis, 3.0 mg for P. aeruginosa, and 1.0 mg for E. coli. Gram positive bacteria were more susceptible than Gram negative bacteria. We compared growth inhibition zones against S. aureus and MRSA, showing that the ozonized olive oil was more effective on MRSA than S. aureus. Furthermore, the ozonized olive oil killed C. albicans within an hour. These data suggested that ozonized olive oil could be an alternative drug for MRSA infection and could be utilized as a potent antimicrobial and antifungal substance.
Forty gentamicin-resistant isolates of Enterococcus faecalis were selected from various clinical materials, determined their antimicrobial susceptibility, and studied there R-plasmid characteristics and polypeptide patterns. All of the isolates were susceptible to vancomycin. The MICs($\mu$/ml) of antimicrobial agents to the isolates were as follows; the MIC of gentamicin was 128 and $\geq$2040, ampicillin 1 and 1, chlorarmphenicol 2 and 8, erythromycin 32 and 256, and vancomycin 1 and 2. E. faecalis HL-1 strain had 8 plasmid DNA elements, HL-2 and HL-3 strains had 6, HL-4 had 7, HL-5 had 4, and HL-6 had 5. The 51.7 Kb of gentamicin resistance plasmid DNA was conjugally transferred from two strains of E. faecalis HL-1 and HL-6 to S. aureus SK 982. The plasmid transfer frequency between S. aureus SK 982 and E. faecalis HL-1 or E. faecalis HL-6 was 6.3$\times10^{-4} and 3.7$\times10^{-5}$, respectively. Plasmid curing ratio after the treatment of ethidium bromide(10$\mu$/ml) to E. faecalis tarnsconjugants R-1 and R-6 were about 51% and 67%, respectively. The tetracycline gene was located in 2.15 Kb plasmid of E. faecalis HL-1, but it was not found in the E. faecalis HL-6 by Southern blot analyses. The antigenic components of E. faecalis HL-1, HL-6, R-1 and R-6 strains were analyzed by SDS-PAGE and immunoblotting. The E. faecalis strains had 7 to 16 polypeptide bands, however their major proteins were 97.8 and 26.8 Kd. At the Immunoblotting, 97.8, 95.8, 74.8, 63.5, 33.7 and 26.8 Kd polypeptides of the strains showed major antigenic activities with patient's sera infected intra-abdominally with an E. faecalis strain.
A literature review is made on the physical and chemical characteristics of clay minerals in acidic solutions from the mineralogical and hydrometallurgical viewpoints. Some of the important characteristics of clays are their ability to cation exchange, swelling, and incongruent dissolution in acidic solutions. Various clay minerals can take up metallic ions from solution via cation exchange mechanism. Generally, cation exchange capacity increases in the following order : kaolinite, halloysite, illite, vermiculite, and montmorillonite. In acidic solutions, the cation uptake such as copper by clay minerals is strongly inhibited by hydrogen and aluminum ions and thus is not economically significant factor for recovery of metals such as uranium and copper. In acidic solutions, the cation uptake is substial. Swelling is minimal at lower pH, possibly due to lattice collapse. Swelling may be controllable with montmorillonite type clays by exchanging interlayer sodium with lithium and/or hydroxylated aluminum species. The effect of add on clay minerals are : 1. Division of aggregates into smaller plates with increase in surface area and porosity. 2. Clay-acid reactions occur in the following order: (i) $H^+$ replacement of interlayer cations, (ii) removal of octahedral cations, such as Al, Fe, and Mg, and (iii) removal of tetrahedral Al ions. Acid attack initiates, around the edges of the clay particles and continued inward, leaving hydrated silica gel residue around the edges. 3. Reaction rates of (ii) and (iii) are pseudo-1st order and proportional to acid concentration. Rate doubles for every temperature increment of $10^{\circ}C$. Implications in in-situ leaching of copper or uranium with acid are : 1. Over the life span of the operation for a year or more, clays attacked by acid will leave silica gel. If such gel covers the surface of valuable mineral surfaces being leached, recovery could be substantially delayed. 2. For a copper deposit containing 0.5% each of clay minerals and recoverable copper, the added cost due to clay-acid reaction is about 1.5c/lb of copper (or 0.93 lbs of $H_2SO_4/1b$ of copper). This acid consumption by clay may be a factor for economic evaluation of in-situ leaching of an oxide copper deposit.
This study was conducted to determination of the endocrine distruptor function of 'Parabens' by dosing ethyl paraben, propyl paraben, isopropyl paraben, butyl paraben and isobutyl paraben to the immature SD rats. 18 groups were given vehicle control group, negative control group (Dibutyl phthalate), postive control group ($1'7-{\alpha}$ Ethynylestrdiol) and each paraben groups involved 3 dose level. Rats were injected with 62.5, 250 and 1,000mg/kg from postnatal day 19 till 21 once a day in subcutaneous and a total 3, times. There was no treatment related death. but, subcutaneous nodule, edema, alopecia and scrub formation on injection site was observed. These signs was become worse in high dose level. these signs was cause from physical stimulation by test substance which parabens were mix with com oil as vehicle. In the analysis of organ weights, absolute and relative weights of brain, spleen, liver, thymus, heart, kidneys, adrenals, ovaries and vagina were no difference with control group. but, wet and blotted weight of uterus was increased in every high dose parabens treat group. Especially, all dose level of isobutyl paraben was showed increment of uterus weight. uterus dilatation of parabens treated group was observed in gross anatomic pathology and these result was agree with wet and blotted weight of uterus. In the result of this study, estrogenic effect as endocrine distruptor was observed in ethyl paraben, propyl paraben, isopropyl paraben, butyl paraben and isobutyl paraben. and it was considered isobutyl paraben has highest estrogrnic effect under the condition of this study.
$\beta$-Xylosidase B was produced by Escherichia coli HB101/pKMG12 carrying the xylB gene of Bacillus stearothermophilus No.236 on its recombinant plasmid. The $\beta$-xylosidase B produced was purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sepharose CL-6B, Sephacryl S-200 and Superdex 200 HR gel filtration. The purified enzyme showed the highest activity at pH 6.5 and 5$0^{\circ}C$. But, the enzyme was observed to be very sensitive to the pH and temperature of the reaction mixture. The enzyme was activated about 35% of its original activity in the presence of 1 mM of $Mn^{2+}$ but it was completely inhibited by $Ag^{+}$, $Cu^{2+}$and $Hg^{2+}$ions. In contrast with the $\beta$-xylosidase A, the B enzyme was found to have $\alpha$-arabinofuranosidase activity though the activity was fairly low compared with the $\alpha$-arabinofuranosidase produced from the arfI gene of the same Bacillus stearothermophilus. Therefore, $\beta$-xylosidase B is considered to be more suitable than $\beta$-xylosidase A at least for the biodegradation of arabinoxylan. The $K_{m}$ and V$_{max}$ values of the $\beta$-xylosidase B for o-nitrophenyl-$\alpha$-D-xylopyranoside were 6.43 mM and 1.45 $\mu$mole/min, respectively. Molecular mass of the enzyme was determind to be about 54 kDa by SDS-PAGE and 160 kDa by Superdex 200HR gel filtration, indicating that the functional $\beta$-xylosidase B was composed of three identical subunits.s.
The purpose of this study is to evaluate laboratory experiments on arsenic and cadmium removal from tailings using apatite at the Ulsan Abandoned Iron Mine, and to develop a stabilization technique. The results of this study show that the permeability is decreased proportionally to the amount of apatite when it is added below 8%, while this is almost constant when the amount of apatite is added above 10%. The water extraction test from tailings using deionized water for several days shows that pH (7.4-8.4) is almost constant or slightly increased when apatite is added below 8%, while it is slightly decreased when apatite is added above 10%. According to TCLP test, reduction of concentrations of heavy metals in leachate is proportional to amount of apatite added. It seems that precipitates generated from leachate-apatite chemical reaction are not redissolved. As a result, cadmium and arsenic in leachate is mostly removed when apatite is added above 10%, and it is suggested that a proper technique should be selected for field application because either mixed or layered method shows almost same removal efficiencies of cadmium and arsenic in tailings.
In order to investigate the effects of developmental stage of embryos and plant growth regulators on mass production of Zantedeschia spp. Southern Light, immature zygotic embryos of Zantedeschia spp. Southern Light were cultured on Murashige and Skoog(1962) basal media or containing 2,4-D, NAA and BA. Globular embryos did not grow on any of the 2,4-D, NAA and BA combinations. The most suitable stage of immature zygotic embryo culture on the induction callus and multiple shoot was at early cotyledonary embryo stage, and at this stage of embryos were germinated up to 87.5%. The whitish watery callus and yellowish compact nodular callus produced on all 2,4-D, NAA and BA media. The best combination for inducing embryogenic callus was 0.5 mgL NAA and 1.0 mg/L BA. Whitish watery calli have been subcultured for more than 8 months and have retained their producing ability, Plant regeneration was only obtained by direct shoot development and yellowish compact nodular calli. Abundant plantlets were regenerated from cotyledonary stage of embryo culture on MS medium supplemented with 0.5 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA. Supplementation of the media with 10% coconut water showed as the best concentration for plant differentiation from direct developed of shoots. The number of regenerated plants from one embryo could be seperated 25-35s plantlets. All yellowish compact callus-derived plantlets were transferred to pots containing a mixture of vermiculite, perlite and sand(1:1;1 v/v) and 100% of divided plantlets were phenotypically normal.
Cypermethrin, a commonly used domestic and agricultural pyrethroid pesticide, is widely considered detrimental to the environment and to many organisms because of its residual property and toxicity. Cellulophaga lytica DAU203, isolated from coastal sediment, was chosen because it degrade cypermethrin. Cellulophaga lytica DAU203 effectively degraded cypermethrin, as the utilized carbon source and substrate, in a mineral salt medium. Effective factors, such as carbon source, nitrogen source, initial pH, and temperature, for cypermethtin biological degradation by Cellulophaga lytica DAU203 were analyzed by one factor at a time method. Temperature ($22{\sim}42^{\circ}C$), initial pH (5~9), and yeast extract concentration (0.1~2.5%[w/v]) were selected as the three most important factors. There were optimized at $33.4^{\circ}C$, pH 7.7, and 2.4%(w/v) by response surface methodology, respectively. The Box- Behnken design consisting of 46 experimental runs with three replicates was used to optimize the independent variables which significantly influenced the cypermethrin biological degradation. This model for cypermethrin degradation by Cellulophaga lytica DAU203 is highly significant (p<0.05). Under the optimized condition, Cellulophaga lytica DAU203 degraded approximately 83.7 % of the cypermethrin within 5 days. These results suggest that Cellulophaga lytica DAU203 may be useful for the biological degradation of cypermethrin in cypermethrin-contaminated environments.
Yeonsan Ogae has been known as supporting health and high efficacy of treatment. In recent days, as the efficacy of functional peptides has known, the optimization of oligo peptides production and its characteristics from Ogae viscera has been performed. Response surface method was used to perform the optimizaion of enzyme hydrolysis. The range of processes was temperature (40, 50 and $60^{\circ}C$), pH(6.0, 7.0 and 8.0), and enzyme(1, 2 and 3%). The degree of hydrolysis, amono acids, molecular weight of products were analyzed. The optimum process of enzyme hydrolysis were determined as temperature $58^{\circ}C$, pH 7.5, and enzyme concetration 3%. At optimum conditions, the degree of hydrolysis after 2 h reaction was 75-80%. The total amino acids of amino acid and were 386.15 mg/100 g and 155.26 mg/100 g, respectively. The molecular weight of products by using Maldi-TOF was ranged from 300 to 1,000 Da.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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