The diploid Solanum cardiophyllum, a wild tuberbearing species from Mexico is one of the relatives to potato, S. tuberosum. It has been identified as a source of resistance to crucial pathogens and insects such as Phytophthora infestans, Potato virus Y, Colorado potato beetle, etc. and is widely used for potato breeding. However, the sexual hybridization between S. cardiophyllum and S. tuberosum is limited due to their incompatibility. Therefore, somatic hybridization can introduce beneficial traits from this wild species into the potato. After somatic hybridization, selecting fusion products using molecular markers is essential. In the current study, the chloroplast genome of S. cardiophyllum was sequenced by next-generation sequencing technology and compared with those of other Solanum species to develop S. cardiophyllum-specific markers. The total length of the S. cardiophyllum chloroplast genome was 155,570 bp and its size, gene content, order and orientation were similar to those of the other Solanum species. Phylogenic analysis with 32 other Solanaceae species revealed that S. cardiophyllum was expectedly grouped with other Solanum species and most closely located with S. bulbocastanum. Through detailed comparisons of the chloroplast genome sequences of eight Solanum species, we identified 13 SNPs specific to S. cardiophyllum. Further, four SNP-specific PCR markers were developed for discriminating S. cardiophyllum from other Solanum species. The results obtained in this study would help to explore the evolutionary aspects of Solanum species and accelerate breeding using S. cardiophyllum.
Transgenic lilies have been obtained using Agrobacterium tumefaciens (AGL1) with the plant scale explants, followed by DL-phosphinothricin (PPT) selection. In this study, scales of lily plants cv. "red flame" were transformed with the pCAMBIA3301 vector containing the gus gene as a reporter and the blpR gene as a selectable marker, as well as a gene of interest showing herbicide tolerance, both driven by the CaMV 35S promoter. Using a 20-minute infection time and a 5-day cultivation period, factors that optimized and demonstrated a high transformation efficiency were achieved. With these conditions, approximately 22-27% efficiency was observed for Agrobacterium-mediated transformation in lilies. After transformation with Agrobacterium, scales of lilies were transferred to MS medium without selective agents for 2 weeks. They were then placed on selection MS medium containing 5 mg/L PPT for a month of further selection and then cultured for another 4-8 weeks with a 4-week subculture regime on the same selection medium. PPT-resistant scales with shoots were successfully rooted and regenerated into plantlets after transferring into hormone-free MS medium. Also, most survived putatively transformed plantlets indicated the presence of the blpR gene by PCR analysis and showed a blue color indicating expression of the gus gene. In conclusion, when 100 scales of lily cv. "red flame" are transformed with Agrobacterium, approximately 22-27 transgenic plantlets can be produced following an optimized protocol. Therefore, this protocol can contribute to the lily breeding program in the future.
The mechanism imparting salt tolerance to crop plants remains still unsolved, although soybean has been classified as a susceptible plant to NaCl. To determine optimum parameters on physiological responses for improving sensitivity of salinity in breeding program, soybean (Glycine max Merr., cv. "Gwan-gan") plants were grown in a greenhouse, treated 20 days after emergence for 7 days with NaCl at 0, 30, 60, and 90mM, corresponding to electric conductivity of 1.2, 4.4, 7.3, and 10.4 dS/m, respectively, and assessed 30 days after treatment. Chlorophyll contents were significantly decreased by NaCl ($0.4{\sim}1.0\;mg/g$) compared to control (1.2 mg/g). Photosynthesis rate by NaCl treatment at $0{\sim}90\;mM$ at flowering stage was ranged from 5.0 (control) to $9.6\;{\mu}mol/m^2/s$. Oxygen for respiration was consumed from 5.4 to $9.7\;{\mu}mol/m^2/s$ so that the ratio of $O_2$ (evolution:consumption) was increased with the increase of NaCl, indicating that $O_2$ consumption seems to go beyond $O_2$ evolution. Water potential of leaf at vegetative stage II was ranged from -0.6 to -1.8 MPa and the highest level was observed at mid-day. Water potential by salt stress was decreased with range of $-2.1{\sim}-2.7MPa$ compared to control. Transpiration was decreased from 17% to 20% by NaCl stress. Water vapor diffusing resistance of intercellular air space was affected significantly, increasing up to $16{\sim}24%$ compared to control by NaCl treatment. Salt-treated soybean tended to accumulate $Na^+$, specially in root, with reduced absorption of N, P, $K^+$, $Ca^{2+}$, and $Mg^{2+}$ contents. Free proline content of soybean leaf as affected by different NaCl concentrations was increased 4.2 times ($184{\sim}434\;{\mu}g/g$) more than control. NaCl also increased activities of nitrate reductase and peroxidase by $28{\sim}161%$ and $3{\sim}22%$, respectively. The results show that physiological characteristics of soybean plants during assay were useful as the best parameters of salt stress or salt tolerance test to improve sensitivity in screening and breeding program among cultivars or germplasms.
Sensitivities of PLBs of four Phalaenopsis cultivars, P. 'Taisuco Windian', P. 'Nancy Amour', P. 'Pink Twilight' and P. 'Taipei Gold' to kanamycin, spectinomycin and hygromycin at different concentrations (0, 25, 50, 100, 200, and $400mg{\cdot}L^{-1}$) were examined. Hygromycin was favorable for selecting the transformants in the genetic transformation of Phalaenopsis as PLBs of four cultivars were all dead at even $25mg{\cdot}L^{-1}$ hygromycin. Responses of PLBs of P. 'Maki Watanabe' and P. 'Brother Lawrence' to DL-phosphinothricin (PPT) were determined at different concentrations (0, 0.1. 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, 2.5, and $5.0mg{\cdot}L^{-1}$) and $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ PPT was thought to be suitable for selecting the transformants of Phalaenopsis. The optimum conditions for Agrobacterium cocultivation with Phalaenopsis PLBs were examined using a two-step cocultivation method in Dtps. 'City Girl' and A. tumefaciens LBA4404. In the first infection period in a 1 : 10 suspension of Agrobacterium to a VW medium, 1 hr infection showed the highest PLB survival ratio. And then, PLBs were cocultivated with a bacterial strain and a 3-day cocultivation period was better for Phalaenopsis PLBs than a prolonged period. Agrobacterium tumefaciens strains LBA4404 (pTOK233) and EHA105 (pGA643) were used to compare their efficiency on the genetic transformation of Phalaenopsis PLBs. The PLBs infected with EHA105 survived more than those infected with LBA4404 after two days in a dark condition and two weeks in light condition on a selective medium. About 1,000 PLBs for each of P. 'Maki Watanabe' and P. 'Brother Lawrence', and each bacterial strain of AGL1 (pCAMBIA3301) and LBA4404 (pTOK233) were used for the regeneration of transgenic plants. The bacterial strain AGL1 had a higher genetic transformation efficiency than LBA4404, with no significant difference between cultivars. In this study, 11 hygromycin-resistant plantlets and 32 PPT-resistant plantlets were produced, but these putative transgenic plantlets need further examinations.
The present investigation was conducted to provide a systematic approach necessary to establish an integrated insect pest management program of barley in Korea. Some ecological surveys on insect pests of barley have been undertaken at the field of Experimental Station, Ky$\check{o}$ngbuk Provincial Office of Rural Development as a fixed point survey area, and at 23 localities for round survey throughout southern and central Korea from 1983 to 1984. Previously known insects injurious to barley in Korea were revised and the population dynamics of 10 dominant harmful species were analyzed according to either 24 localities or 25 cultivars respectively by using several sampling methods of net sweeping, black light traps, yellow water pan traps and visual counting. As the results, a total of 94 species belonging to 77 genera under 32 families are known to be injurious to barley, among them 20 species are newly added here. In the population density level, the dominant species were disclosed as Laodelphax striatellus (43.1 %), Macrosiphum avenae(27.0 %), Rhopalosiphum padi(6.5 %), R. maidis(5.4 %), Psammolettix strialus(2.7 %), Chlorops oryzae(2.2 %), Agromyza albipennis(2.1 %) Phyllotreta nemorum(1.4 %), Chaetoenema cylindrica(1.0 %), Dolycoris baccarum(1.0 %) in order. For the general abundance of major insect pests, it was highest in the cultivar P'aldal whereas lowest in Milyang #22. There were tendencies that Psammotettix striatus, Dolycoris baccarum, Phyllotreta nemorum and Chaetocnema cylindrica represented a maximum increase in the beginning of June, while Chlorops oryzae and Agromyza albipennis showed in the middle of May but aphids were in the end of May. In the dominance of natural enemies, Nabis stenoferus occupied 21.4 % and Propylaea japonica 9.6 %.
Kim, Yun-Hye;Park, Hyun-Myung;Jung, Ji-Yong;Kwon, Tack-Min;Jeung, Soon-Jae;Yi, Young-Byung;Kim, Gyung-Tae;Nam, Jae-Sung
Horticultural Science & Technology
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v.28
no.3
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pp.449-455
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2010
'Moulinrouge' was selected as the best regenerating cultivar among 18 different spray-type chrysanthemum cultivars bred in the Gyeongnam Flowers Breeding Research Institute. When the leaf explants from standard- and spray-type chrysanthemum 'Jinba' and 'Moulinrouge' were incubated on MS basal medium supplemented with $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA, both 'Jinba' and 'Moulinrouge' induced adventitious shoots that can be regenerated into plantlets. Based on these regeneration conditions, we developed an efficient $Agrobacterium$-mediated chrysanthemum 'Moulinrouge' transformation method by using sequential selection of shoots from low ($10mg{\cdot}L^{-1}$) to high ($30mg{\cdot}L^{-1}$) concentrations of kanamycin after co-cultivation of leaf explants with $Agrobacterium$ for 10 days and induction of shoots. All kanamycin resistant plants investigated with genomic PCR analysis carried the report gene, $AtSICKLE$, in their genome. Although expression levels of the report gene in the transgenic plants investigated with RT-PCR were relatively low because of inefficiency of CaMV 35S promoter in chrysanthemum, transgenic lines expressing $AtSICKLE$ efficiently showed leaf epinasty phenotype. We expect that our results will provide a useful method that can perform a high-throughput investigation of genes isolated and studied well in model plants for molecular breeding of chrysanthemum.
'Honong' is a new japonica rice variety developed and registered by the rice breeding team of Department of Rice and Winter Cereal Crop, NICS, RDA in 2009. This variety was derived from mutagen MNU (N-methyl-N-nitrosourea) treatment on fertilized egg cells of Unbong31. This variety has about 126 days growth duration from transplanting to harvesting in west-southern coast, Honam and Youngnam plain of Korea. It has 79 cm in culm length and is tolerant to lodging. In reaction to biotic and abiotic stresses, it show resistance to blast, bacterial blight pathogen races from $K_1$ to $K_3$ and stripe virus, but susceptible to other major diseases and insect pests. The milled rice of 'Honong' exhibits translucent, relatively clear non-glutinous endosperm and medium short grain. It has higher amylose content (20.3%) and lower protein content (6.3%), and good palatability of cooked rice compared with Nampyeong. The milled rice yield performance of this variety is about 5.44MT/ha in local adaptability test for three years. 'Honong' would be adaptable to west-southern coast, Honam and Youngnam plain of Korea.
A single cross hybrid, 'Eolrukchal 1', is a bicolor waxy corn (Zea mays L.) developed by the maize breeding team at the National Institute of Crop Science (NICS), RDA in 2007. This hybrid, which has a high eating quality, was produced by crossing two inbred lines, KBW23 and KW33. KBW23 was a seed parent and KW33 was a the pollen parent of 'Eolrukchal 1'. Ear length and diameter of 'Eolrukchal 1' is 18.4 cm and 4.5 cm, respectively. The ratio of kernel set length/ear length is 89%, similar with that of a check hybrid, 'Chalok 1'. It is resistant to Exserohilum turcicum (Northern corn leaf blight) and its lodging resistance is higher than that of 'Chalok 1'. The yield of 'Eolrukchal 1' in fresh ear weight was 9.80 ton/ha and 14% higher than that of 'Chalok 1' in regional yield trials (RYT) from 2005 to 2007. A seed production of this hybrid has been well due to good match during crossing between the seed and the pollen parents. It is adaptable to the whole country except Jeju-do.
Kim, Kyung-Hwan;Lee, Kyeong-Ryeol;Kim, Jung-Bong;Lee, Myoung Hee;Lee, Eungyeong;Kim, Nyunhee;Lee, Hongseok;Kim, Song Lim;Baek, JeongHo;Choi, Inchan;Ji, Hyeonso
Korean Journal of Breeding Science
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v.50
no.4
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pp.463-471
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2018
Perilla is an oilseed crop cultivated in Korea since ancient times. Due to the high ${\alpha}-linolenic$ acid content in perilla, perilla seed oil can easily become rancid. ${\alpha}-Linolenic$ acid is synthesized by two enzymes, endoplasmic reticulum-localized ${\Delta}15$ desaturase (FAD3) and chloroplast-localized ${\Delta}15$ desaturase (FAD7) in vivo. In order to lower the ${\alpha}-linolenic$ acid content of the seed oil without disturbing plant growth, we tried to suppress the expression of only the FAD3 gene using RNA interference, whilst maintaining the expression of the FAD7 gene. Seventeen transgenic plants with herbicide ($Basta^{TM}$) resistance were obtained by Agrobacterium-mediated transformation using hypocotyls of perilla plants. The transgenic plants were firstly confirmed by treatment with 0.3% (v/v) $Basta^{TM}$ herbicide, and the expression of FAD3 was measured by Northern blot analysis. The ${\alpha}-linolenic$ acid content was 10-20%, 30-40%, and 60% in two, seven, and three of the twelve $T_1$ transgenic perilla plants which had enough seeds to be analyzed for fatty acid composition, respectively. Analysis of the fatty acid composition of $T_2$ progeny seeds from $T_1$ plants with the lowest ${\alpha}-linolenic$ acid content showed that the homozygous lines had 6-10% ${\alpha}-linolenic$ acid content and the heterozygous lines had 20-26% ${\alpha}-linolenic$ acid content. It is expected that the reduction in ${\alpha}-linolenic$ acid content in perilla seed oil will prevent rancidity and can be utilized for the production of high-value functional ingredients such as high ${\gamma}-linolenic$ acid.
This study was undertaken to compare and estimate the severity of pitch canker of individual trees of Pinus rigida and Pinus rigida ${\times}$ P. taeda in two seed orchards in Jeju island, in which the orchards have been damaged by the pitch canker for seven years. Wind-pollinated two-year-old seedlings of P. rigida and P. rigida ${\times}$ P. taeda, in which the seedlings of P. rigida ${\times}$ P. taeda were from seeds of phenotypically selected, uninfected(but untested) trees, were inoculated with the pathogenic fungus, Fusarium circinatum, isolated from P. rigida and P. thunbergii. The virulence of the isolates was also identified. Statistically significant difference was found in 'stem cankers'(SC; ${\chi}^2=7.76$, P=0.05) among 4 plantations of P. rigida ${\times}$ P. taeda of two seed orchards. P. rigida was higher in 'top kill' (TK) and 'branch tip symptoms' (BT) than those of P. rigida ${\times}$ P. taeda. In artificial inoculation tests, mortality of the seedlings from the resistant candidates was 14% higher than that of the seedlings from the susceptible candidates. This result may becaused by unknown pollen trees and/or candidate tree selection based only on phenotype. Two of five fungal isolates, C-6-L(9) and C-6-L(19), showed significantly higher mortality (68% and 60%, respectively) than others, suggesting that these isolates can be used as virulent isolates for a mass artificial inoculation. Resistance candidate seedlings that were selected from this study can be utilized as useful materials for fundamental studies of genetics and biochemistry to breed resistance varieties to pitch canker.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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