• 한국임상수의학회지
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• 제17권1호
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• pp.21-27
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• 2000

고양이 말초혈액 다형핵백혈구 (PMN)의 유주활성에 있어서 계난백유래물질 (EWD)의 면역증강 효과를 검토하였다. PMN의 유주활성은 EWD 그 자체 및 EWD로 배양한 PMN의 배양상층액에서는 활성이 존재하지 않았다. 그러나 EWD로 배양한 MNC 배양상층액에서는 PMN에 대한 유주활성이 증가되었다. 본 활성은 checkerboard assay를 통해 진성 유주활성으로 밝혀졌다. 이러한 고양이 PMN 유주활성은 human recombinant interleukin-8(hr IL-8)에 의해서도 증가되었다. IL-8의 또 다른 특성인 세포 형태변형 실험에서도 EWD로 배양한 MNC의 배양상층액과 hr IL-8 모두에서 높은 수준의 세포 형태변형효과를 나타내었다. 이와 같이 EWD로 배양한 MNC의 배양상층액과 hr IL-8 모두에서 증가된 PMN의 유주활성 및 세포변형효과는 anti-human IL-8mAb에 의해 농도의존적으로 억제되었다. 이상의 결과로부터 EWD는 고양이 PMN의 유주활성에 있어서 면역증강 효과가 있으며, 이것은 EWD에의해 활성화된 MNC에서 분비되는 IL-8양 유주성 인자에 의해 PMN의 유주활성 증가 및 세포 형태 변형이 일어나는 것으로 사료되었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제15권1호
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• pp.110-115
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• 1998

인삼 PD saponin(GPD)으로 배양한 고양이 말초혈액 단핵구세포(afNC) 배양상충 액에서 말초혈액 다형핵백혈구(PMNC)에 대한 interleukin(IL) 8 양 유주활성에 잔하여 검토 하였다. PMNC의 유주활성은 Hoyden chamber 변법으로 측정하였다. GPD를 첨가하여 배양 한 MNC배양상층액중에는 rMNC에 대한유주활성이 인정되었다. PMNC에 대하여 GPD 로 배양한 MNC 배양상층액중에 존재하는 유주활성이 IL 8 양 물질인지를 알아보기 위해 human recombinant IL 8을 이용하여 고양이 PMNC에 대해 유주팔성을 측정한 결과, GPD 로 배양한 MNC 배양상층액의 경우와 동등한 활성이 나타났다. Human IL 8 mAb를 사용하 여 GPD로 배양한 MNC 배양상층액중의 유주활성에 대한 중화반응을 살펴본 결과, GPD로 배양잔 MNC 배양상충액 및 human IL 8에 의해 증가되었던 PMNC의 유주활성은 IL 8 cAb의 첨가농토가 증가함에 따라 활성이 완전히 억제되었다. 또한 GPD로 배양한 고양이 MNC 배양상충액중의 유주활성은 열처리(4, 30, 37, 60 및 $100{\circ}C$) 및 산(pH 3.0)과 알카리 (pH 9.0)처리에도 안정성을 보여 human IL 8의 물리화학적 성상과 매우 유사하였다. 따라서 GPD로 배양한 MNC 배양상충액중에 존재하는 고양이 PMNC에 대한 유주활성은 feline IL 8 양 물질임을 강하게 시사하였다.

• 한국임상수의학회지
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• 제15권1호
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• pp.104-109
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• 1998

고양이 말초혈액 다형핵백혈구(PMNC)의 유주성에 있어서 인삼 saponins(ginseng total ssponin(GTS), ginseng PT saponin(GfT) 및 ginseng PD saponin(GPD))의 면역증강 효과를 검토하였다. PMNC에 대한 유주성을 hoyden chamber 변법으로 측정한 결과, GTS, GPT, GPD는 PMNC에 대해 직접적인 유주활성을 나타내지 않았다. 또한 인삼 saponins을 첨가하여 배양한 PMNC 배양상충액의 경우게는 미약한 유주활성을 나타내었다. 그러나 GPf및 GPD를 첨가하여 배양한 말초혈액 단핵구세포(MNC)배양상충액에서는 PMNC의 유주활성이 현저하게 증가하였다. PMNC에 대해 유주활성이 인정된 GPI)로 배양한 MNC 배양상충액을 이용하여 checkerboard assay를 실시한 결과 배양상충액의 농도차에 의존하는 진의 유주활성임을 알 수 있었다. 이상의 결과로부터 인삼 saponine 중 GPT 및 GPD가 고양 이 말초혈액 다형핵백혈구의 유주성을 중강시키는 효과가 있으며, 이것은 이들 saponins에 의해 활성화된 단핵구세포에서 분비되는 유주성인자에 의해 다형핵백혈구의 유주활성이 증 강되는 것으로 사료되었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제22권2호
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• pp.84-89
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• 2005

개 말초혈액 백혈구의 유주성에 있어서 1,2-benzopyrone의 효과를 검토하였다. 백혈구의 유주성은 Boyden chamber 변법으로 측정하였다. 1.2-benzopyrone 그 자체는 PMN과 PBMC의 유주성에 직접적인 효과를 보이지 않았다. PMN과 PBMC는 1,2-benzopyrone으로 배양한 PMN의 배양상층액에 대해서도 유주활성을 보이지 않았다. 그러나 1,2-benzopyrone으로 배앙한 PBMC의 배양상층액은 PBMC에 대해서는 유주활성을 보이지 않았으나 PMN에 대해서는 현저한 유주활성을 나타내었다. 또한 유주인자인 IL-8에 의한 PMN의 유주활성 측정 결과도 1,2-benzopyrone으로 배양한 PBMC의 배양상충액의 그것과 유사하였다. 이러한 유주활성은 anti-IL-8 pAb를 처리했을 때 PMN의 유주활성이 억제되어, 본 유주활성은 PBMC에서 분비되는 IL-8일 것으로 강하게 시사되었다. 이상의 결과로부터, 1,2-benzopyrone은 개 말초혈액 PMN의 유주성에 대하여 면역자극 작용을 가지고 있으며, 이것은 1,2-benzopyrone의 자극에 의해 PBMC에서 분비되는 IL-8양 가용성 물질에 의해 나타나는 것으로 사료되었다

• 한국임상수의학회지
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• 제20권1호
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• pp.1-6
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• 2003

돼지 말초혈액 다형핵 백혈구(polymorphonuclear cell; PMN)의 유주성에 있어서 conjugated linoleic acid(CLA) 이성체(CLA mixture, 10t-12c CLA, 9c-11t CLA, 9c-11c CLA 및 9t-11t CLA)의 면역증강 효과를 검토하였다. PMN에 대한 유주성은 Boyden chamber 변법으로 측정하였다. CLA 이성체들을 고농도(50∼200μM)로 사용하였을 경우 말초혈액 단핵구 세포(mononuclear cell; MNC) 및 PMN의 cell viability가 감소되거나 세포가 사멸하였다. 따라서 cell viability가 높고 세포독성을 나타내지 않는 20μM 농도로 유주활성 실험을 하였다. CLA 이성체들은 돼지 말초혈액 PMN의 유주활성에 직접적인 효과는 없었다. CLA 이성체로 배양한 MNC의 배양상층액 중 CLA mixture, 10t-12c CLA 및 9c-11t CLA 처리군에서는 PMN의 유주활성이 현저하게 증강되었으나 9c-11c CLA 및 9t-11t CLA로 배양한 MNC 배양상층액에서는 PMN의 유주활성이 나타나지 않았다. 이러한 유주성 증강효과는 checkerboard assay를 실시한 결과 진성의 유주활성이었다. 유주성 인자인 porcine recombinant (pr) interleukin(IL)-8을 이용하여 돼지 PMN에 대한 유주성을 검토한 결과, pr IL-8에 의한 PMN의 유주활성은 CLA로 배양한 MNC 배양상층액에 의한 것과 동등한 활성을 보였다. 또한 CLA로 배양한 MNC 배양상층액의 PMN에 대한 유주성을 anti-pr IL-8pAb를 사용하여 중화반응을 실시한 결과, CLA mixture로 배양한 MNC 배양상층액에 의해 증가된 PMN의 유주활성은 anti-pr IL-8 pAb 첨가에 의해 억제되어, 본 유주활성은 MNC에서 분비되는 IL-8으로 인한 것임을 강하게 시사하였다. 이상의 결과로부터 CLA 중 CLA mixture, 10t-12c CLA 및 9c-11t CLA 이성체가 돼지 말초혈액 다형핵 백혈구의 유주활성에 증강효과를 가지고 있으며, 이러한 증강효과는 CLA로 자극된 MNC에 의해 생성되는 IL-8 인자에 의한 것임을 알 수 있었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제29권3호
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• pp.207-212
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• 2012

개 말초혈액 다형핵백혈구(PMNs)의 유주활성에 대한 fucoidan의 면역증효과를 검토하였다. Fucoidan 그 자체는 PMNs에 대해 직접적인 유주활성 효과를 보이지 않았다. 그러나 recombinant IL-8에 대한 PMNs의 유주활성과 유사하게 fucoidan으로 배양한 말초혈액 단핵구세포(PBMCs)의 배양상층액은 PMNs에 대해 유주활성을 증가시켰다. 또한, fucoidan으로 배양한 PBMCs의 배양상층액에 대한 PMNs의 유주활성 증가효과는 anti-IL-8 pAb를 처리했을 때 억제되었다. PBMCs 배양 상층액 속의 IL-8의 양을 정량한 결과 fucoidan무처치 대조군에 비해 증가하였다. 이상의 결과로부터, fucoidan은 개 PMNs의 유주능에 대하여 면역증가 작용을 가지고 있으며, 이것은 fucoidan의 자극에 의해 PBMCs에서 생산되어 분비되는 IL-8에 의해 나타나는 것으로 사료되었다.

• 대한수의학회지
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• 제40권2호
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• pp.393-401
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• 2000

계난백유래물질(EWD)로 배양한 고양이 말초혈액 단핵구세포(MNC)의 배양상충액에서 다형핵백혈구(PMN)에 대한 유주성인자를 조사하였다. EWD로 배양한 MNC 배양상층액과 human recombinant (hr) interleukin (IL-8)는 고양이 PMN의 유주성을 현저하게 증가시켰다. 이 유주활성물질을 규명하기 위해 EWD 처리 MNC 배양상충액을 gel electro-phoresis(denaturing 조건 18% loading gel 및 nondenaturing 조건 12.5% loading gel)를 실시한 결과, EWD로 배양한 MNC 배양상충액과 hr IL-8는 모두 분자량 6~8kDa에서 band를 나타내었다. Denaturing 조건에서 6~8kDa band의 gel slices에서 용출시킨 용출액에서도 고양이 PMN의 유주활성이 인정되었다. EWD로 배양한 MNC 배양상층액, hr IL-8 및 용출액에 의한 유도된 고양이 PMN의 유주활성은 rabbit anti-feline polyclonal IgG(RAF pIgG)와 hr IL-8에 대한 mAb에 의해 농도의존적으로 억제되었다. 또한 RAF pIgG는 hr IL-8와 결합을 보임으로써 사람의 IL-8와 교차반응을 시사하였다. 이상의 결과로부터 EWD로 배양한 고양이 MNC는 분자량 6~8kDa의 IL-8 양(樣) 유주성인자를 분비하여 PMN의 유주성을 유도하는 것으로 사료되었다.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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• pp.526.1-526
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• 1986

세균내 glutathione의 동태를 연구하기 위한 일환으로 P. mirabilis로부터 cysteinylglycine 분해효소를 정제 검토하였다. 본 균이 생산하는 cysteinylglycine 분해효소의 정제는 무세포추출액에 비해 비활성이 10배 증가하였고 0.68%의 낮은 수율을 나타내었다. 본 호소는 (NH$_4$)$_2$ SO$_4$ 침전과정에서 활성을 크게 손실하는 등 정제과정에서 불안정하였으며 투석 중에 형성하는 불용성 침전물은 4% Trition X-100 처리에 의해 효과적으로 용해되었다.

• 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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• 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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• pp.518.2-519
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• 1986

토양으로부터 분리한 질소고정균인 Klebsiella pneumoniae NFB320의 chromosomal DNA를 BamHI으로 절단하여 동일한 제한효소로 절단한 pBR322에 ligation시켜 E. coli HB101에 형질전환을 행하여 pullulanase activity를 나타내는 clone을 얻어내었다. 이 형질 전환체로부터 분리한 pullulanase 유전자가 재조합된 plasmid DNA는 약 10kb의 DNA단편을 가지고 있었으며, 재조합된 plasmid로부터 생산되는 pullulanase의 특성은 최적 활성 pH가 6.0이며, 효소의 pH안정성은 5-10이었다. 또한 형질 전환체로부터 생산되는 pullulanase의 localization,효소활성에 영향을 미치는 온도안정성 둥을 조사하였다.

• 한국응용곤충학회:학술대회논문집
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• 한국응용곤충학회 2000년도 추계 학술발표회
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• pp.14-14
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• 2000