토양으로부터 분리한 Klebsiella pneumoniae 의 pullulanase 유전자의 cloning 및 발현

  • 유주현 (연세대학교 식품공학과) ;
  • 공인수 (연세대학교 식품공학과) ;
  • 정용준 (연세대학교 식품공학과) ;
  • 이정기 (연세대학교 식품공학과)
  • Published : 1986.12.01

Abstract

토양으로부터 분리한 질소고정균인 Klebsiella pneumoniae NFB320의 chromosomal DNA를 BamHI으로 절단하여 동일한 제한효소로 절단한 pBR322에 ligation시켜 E. coli HB101에 형질전환을 행하여 pullulanase activity를 나타내는 clone을 얻어내었다. 이 형질 전환체로부터 분리한 pullulanase 유전자가 재조합된 plasmid DNA는 약 10kb의 DNA단편을 가지고 있었으며, 재조합된 plasmid로부터 생산되는 pullulanase의 특성은 최적 활성 pH가 6.0이며, 효소의 pH안정성은 5-10이었다. 또한 형질 전환체로부터 생산되는 pullulanase의 localization,효소활성에 영향을 미치는 온도안정성 둥을 조사하였다.

Keywords