• Title/Summary/Keyword: 유전자독성

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Time-dependent Toxic Effects of Cadmium Chloride on the Stress-related Gene Expression, Growth and Reproduction of the Soil Nematode Caenorhabditis elegans (토양선충 Caenorhabditis elegans의 스트레스 관련 유전자 발현을 이용한 시간에 다른 카드뮴의 독성영향)

  • Roh, Ji-Yeon;Lee, Jeong-Gyeong;Kwon, Hyuk-Cu;Choi, Jin-Hee
    • Environmental Analysis Health and Toxicology
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    • v.23 no.1
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    • pp.11-16
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    • 2008
  • 카드뮴은 환경과 인체 위해도에 큰 영향을 미치는 중요한 환경오염물질로 잘 알려져 있다. 본 연구에서는 토양선충인 Caenorhabditis elegans에 카드뮴을 12시간과 48시간으로 나누어 처리하여 시간에 따른 장, 단기적 독성영향을 알아보고자 하였다. 이때 생리학적 수준으로 성장 및 생식을 조사하고, 분자수준에서 스트레스 관련 유전자들의 시간에 따른 발현 정도를 관찰하였다. 생식에서는 단기노출(12시간) 시 그 영향이 대조군에 비해 크게 나타났으며, mtl-2의 스트레스 관련 유전자가 증가하였다 장기 노출(48시간) 시에는 cyp35a2, ape-1, sod-1, ctl-2 유전자가 대조군에 비해 약 $2{\sim}4$배 가량의 발현 증가 결과를 조사할 수 있었다. 본 연구결과들을 통해 스트레스 관련 유전자의 발현을 조사하는 것이 중요하고 민감한 생체지표가 된다는 것과 토양선충 C. elegans는 환경중 오염물질에 대한 장기, 단기적 영향을 평가하기 위한 좋은 생물학적 모델이 된다는 것을 알 수 있었다.

Effect of Retrovirus Mediated TNF-$\alpha$ Gene Transfer to Tumor Necrosis Factor(TNF) Sensitive Tumor Cell Lines on Sensitivity to TNF (Retroviral Vector를 이용한 TNF-$\alpha$ 유전자의 이입이 암세포의 종양괴사인자(TNF) 감수성에 미치는 효과)

  • Oh, Yeon-Mok;Park, Kyeo-Yeong;Jung, Man-Pyo;Yoo, Chul-Gyu;Kim, Young-Whan;Han, Sung-Goo;Sim, Young-Soo;Han, Yong-Chol
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • v.41 no.2
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    • pp.87-96
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    • 1994
  • Background : Since tumor necrosis factor was discovered in 1975, TNF has been well known about its cytotoxic effect on tumor cells in vivo and in vitro. According to the recent improvement of molecular biological techinques, it is possible that exogenous TNF gene is transferred to tumor cells and is expressed in theirs. By virtue of TNF gene transfer, we have expected that TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would kill tumor cells in vivo without systemic side effect. The expected mechanisms in which antitumor effects of TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells are working would be as followings. In the first mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would kill tumor cells around(like homicide). In the second mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would kill themselves(like suicide). In the third mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would recruit immune effector cells and kill tumor cells indirectly. In the last mechanism, TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cells would augment cytokine such as interferon-$\gamma$ to kill tumor cells. Among these four mechanisms of antitumor effect, only the second mechanism has not been established yet. Therefore, to elucidate the second mechanism, We performed this study. Method : We transferred TNF-$\alpha$ gene to NCI-H2058, a human mesothelioma cell line and WEHI164, a murine fibrosarcoma cell line by using retroviral vector(pLT12SNTNF). And, We determined by using MTT assay whether TNF expressed in TNF-gene-transferred tumor cell lines would kill themselves like suicide or not. Then, if TNF-gene-transferred tumor cell lines would not suicide themselves, I would know more about the TNF sensitivity of TNF-gene-transferred tumor cell lines to exogenous TNF also by MTT assay. Result : NCI-H2058 and WEHI164 which were sensitive to TNF, became far less sensitive to endogenous and exogenous TNF after being transferred TNF-$\alpha$ gene to. Conclusion : TNF-gene-transfer to NCI-H2058 and WEHI164 gave them resistance to TNF.

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Thirteen-Week Repeated Oral Toxicity Study of Leaf Folder (Cnaphalocrocis medinalis) Resistant Rice (Nakdongbyeb) in Sparague-Dawely Rats (SD 랫드에서 혹명나방 저항성 유전자 변형 낙동벼의 13주 경구 반복투여 독성에 관한 연구)

  • Seo, Dong-Seok;Kwon, Min;Sung, Ha-Jung;Park, Cheol-Beom
    • The Korean Journal of Pesticide Science
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    • v.15 no.2
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    • pp.104-113
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    • 2011
  • We investigated the systemic effects of leaf folder (Cnaphalocrocis medinalis) resistant rice (transgenic rice, Nakdongbyeb) in Sprague-Dawley rats for 13 weeks. Leaf folder resistant rice was added to the diet at percentage levels of 0, 5 and 20 percentage/feeder and was administered for 13 weeks. The results did not show any changes in food and water intake. There were also no biologically significant changes in both body and organ weights, hematological and blood biochemical parameters, autopsy and histopathology between the treatment and control groups. Based on these results, no observed adverse effect level (NOAEL) of transgenic rice was considered to be more than 10,000 mg/kg b.w. under the conditions of the present study.

Development of Biomarkers for Cadmium Toxicity (카드뮴 독성의 생체지표 (유전자 지표))

  • Lee, Mi-Ock
    • Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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    • 2003.05a
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    • pp.29-30
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    • 2003
  • The heavy metal cadmium is a xenobiotic toxicant of environmental and occupational concern and it has been classified as a human carcinogen. Inhalation of cadmiumhas been implicated in the development of emphysema and pulmonary fibrosis, but, the detailed mechanism by which cadmium induces adverse biological effects is not yet known.(omitted)

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제초제저항성 GM 들잔디(JG21)의 포장시험을 통한 생물학적 안전성평가

  • Bae, Tae-Ung;Gang, Hong-Gyu;Jeong, Ok-Cheol;Song, In-Ja;Seon, Hyeon-Jin;Go, Seok-Min;Im, Pyeong-Ok;Song, Pil-Sun;Lee, Hyo-Yeon
    • Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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    • 2010.10a
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    • pp.3-3
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    • 2010
  • GM 들잔디의 환경위해성평가는 유전자변형생물체의 국가간이동등에 관한 법률 (2008년)에 안전관리 및 시험평가가 수행되었다. 일반적으로 GM 작물의 환경위해성평가는 도입 유전자의 안정적 발현여부, 일반적으로 사용되어온 식물과의 실질적 동등성, 화분비산에 의한 유전자이동성 검정, GM재배작물 주변 환경에 미치는 영향, GM작물 및 유전자의 인체 및 동물에 대한 안전성 평가, 위해성 관리 등이 있다. 본 발표에서는 제초제저항성 GM 들잔디를 실용화 하기위한 환경위해성평가의 내용을 소개하기 위하여 GM 들잔디의 안전성평가를 수행한 포장시험에 대해서 간략히 발표하고자 한다. GM 들잔디는 제초제저항성 유전자가 식물체내에 1개의 복제수를 갖으며, 후세대에서도 안정적으로 발현되었다. 또한 TAIL PCR을 통한 도입 유전자의 삽입 부위를 확인하였고, 주변염기서열을 이용한 JG21 들잔디 만의 특이적 염기서열을 얻었다. GM 들잔디의 실질적 동등성검정은 격리온실 수준과 격리포장 수준에 생물학적, 화학적 특성을 조사하였고, 일반 들잔디와 큰 차이가 없음을 확인하였다. GM 들잔디의 화분은 일광조건하에서 약 1시간 이내에 불활성 되었고, 실내의 실온조건에서는 3시간까지 활성이 유지되었다. GM 들잔디 재배포장 ($12m{\times}6m$ 크기)으로부터 화분비산 밀도는 3 m 이내에서 높게 나타났고, 9 m 이상의 거리에서는 낮은 빈도로 일정하게 나타났다. 화분비산에 의한 GM 들잔디 유전자이동성은 근접거리에서 약 15%가 관찰되었고, 반경 3 m 이내에서 거리에 따라서 2 ~ 0.12%의 유전자이동성이 관찰되었다. 각각의 시험모형에 따른 GM 들잔디와 일반들잔디 간의 교잡율을 조사한 결과 들잔디 교잡율은 GM 잔디의 면적과 거리에 의존적이었고, GM 들잔디 면적에 따라서 6-21%의 교잡율이 나타났다. GM들잔디의 인체위해성평가는 독성 및 알레르기 반응성을 검정하였고, 도입유전자 산물인 PAT 단백질은 독성 및 알레르기 반응성이 없음이 알려져 있다. 본 연구에서는 GM들잔디의 독성 및 알레르기 반응성을 검토한 결과 아플라톡신 등의 독성은 검출되지 않았으나, GM과 일반 들잔디 모두에서 화분 알레르기 반응성이 양성으로 나왔다. 그러나 GM들잔디에 도입된 유전자에 의한 알레르기 반응이 아닌 일반들잔디 화분에 가진 알레르겐에 의한 반응성이라 할 수 있다. GM들잔디의 비의도적 방출가능성을 조사하기위하여 시험포장외부의 자연환경에 대해서 환경모니터링을 수행한 결과 GM 들잔디의 유출 및 유전자이동 의한 제초제저항성 들잔디는 나타나지 않았다.

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Functional analysis of PEBP2$\alpha$C activity by knockout mouse model (Knockout 마우스 생산에 의한 PEBP2aC 유전자의 생물학적 활성의 규명)

  • ;;;Ito Yoshiaki
    • Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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    • 1998.10a
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    • pp.8-13
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    • 1998
  • Polyoma Virus Enhancer core Binding Protein (PEBP2)는 유전자의 전사를 조절하는 hetero-dimeric transcription factor로서 $\alpha$$\beta$ subunit으로 구성되어 있다. $\alpha$ subunit을 coding 하는 유전자중 하나인 PEBP2aB는 급성백혈병과 관련되어있는 t(8;21) 또는 t(12;21)에 의하여 변형됨으로서 백혈병 발병의 원인이 되고 있다 (Miyoshi et al., 1993; .Romana et al., 1995). $\beta$ subunit을 coding 하는 PEBP2$\beta$도 inv(16)에 의하여 변형됨으로서 백혈병을 유도하는 주요 원인이 되고 있다 (Liu et al., 1993). 이 유전자들의 생물학적 활성을 밝히기 위한 연구가 gene targeting에 의한 knockout mouse 생산 방법으로 수행되었다. 그 결과 PEBP2$\alpha$B와 PEBP2$\beta$ 유전자가 definitive hematopoiesis에 있어서 결정적으로 중요한 역할을 하고 있음이 관찰되었다 (Okuda et al., 1996, Wang et al., 1996a, 1996b), 이는 이들 유전자가 bematopoietic master switch 유전자임을 밝힌 중요한 결과로서 이로부터 혈액학 연구 분야의 새로운 장이 열리게 되었다. 또한 이러한 연구 결과들은 PEBP2 family에 속하는 다른 유전자의 생물학적 활성의 연구를 촉진하는 계기가 되었다. 최근 PEBP2$\alpha$A 유전자가 결손된 마우스가 생산되었는데 이 유전자의 경우에는 모든 종류의 뼈의 생성이 완전히 결손됨이 관찰되었다 (Komori et al., 1997). 이는 PEBP2$\alpha$A 유전자가 뼈의 생성을 지배하는 master switch 유전자임을 보여주는 중요한 관찰로서 bone biologist 들의 큰 관심을 모으고 있다. 본 연구팀은 PEBP2 family 유전자 중 유일하게 아직 생물학적 활성이 규명되지 않은 PEBP2$\alpha$C 유전자의 활성을 knockout 마우스를 생산하는 방법에 의하여 분석하였으며 소화기관의 형성에 중요한 역할을 하고 있음을 확인하였다.

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Microarray analysis of hypoxia-induced changes in gene expression in BV-2 microglial cells (BV-2 microglia 세포주에서 저산소증의 유전자 발현에 대한 마이크로어레이 분석)

  • Kim, Bum-Shik;Seo, Jung-chul
    • Journal of Acupuncture Research
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    • v.20 no.4
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    • pp.85-92
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    • 2003
  • 목적 : 허혈시 발생되는 저산소중 상태에서는 세포독성을 유발한다고 알려져 있으나 정확한 기전은 아직 규명되지 않았다. 본 연구에서는 뇌허혈로 인한 세포독성의 기전을 유전자 발현을 통하여 살펴보고자 하였다. 방법 : 본 실험에서는 BV-2 microglia 세포주에 12시간 동안의 저산소 상태에서의 유전자 발현을 분석하기 위하여 마이크로에레이를 시행하였다. 결과 : 저산소 상태에서는 정상에 비하여 cathepsin F, growth factor independent 1, calcitonin/calcitonin-related poly, leucine-rich repeat LGI family membrane, dublecortin, cyclohydrolase 1, Ia-associated invariant chain, carbohydrate kinase-like과 erythrocyte protein band 4.1-like 3 등의 유전자 발현이 3배 이상 증가하였다. 한편 neuronal guanine nucleotide exchange factor, Bcl-2-related ovarian killer protein, chemokine (C-X-C motif) ligand 5, RNA binding motif protein 3, interleukin 2 receptor, alpha chain, crystallin zeta, cytochrome P450 subfamily IV B, asparagine synthetase과 moesin 등의 유전자 발현은 0.2배 이하로 감소하였다. 결론 : 이상의 결과는 저산소중에 관여하는 유전자 및 저산소중과 관련된 뇌경색 등의 질환의 기전을 밝히는데 기초적 자료로 이용될 수 있을 것이다.

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Insect Resistance of Tobacco Plant Expressing CpBV-ELP1 Derived from a Polydnavirus (폴리드나바이러스 유래 CpBV-ELP1 발현 담배의 내충성)

  • Kim, Eunseong;Kim, Yonggyun
    • Korean journal of applied entomology
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    • v.56 no.1
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    • pp.19-28
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    • 2017
  • Polydnaviruses (PDVs) are a group of double-stranded DNA viruses symbiotic to some endoparasitoid wasps. Cotesia plutellae bracovirus (CpBV) is a PDV symbiotic to an endoparasitoid wasp, C. plutellae, parasitizing young larvae of Plutella xylostella. An early expressed gene, CpBV-ELP1, plays an important role in the parasitism by suppressing host cellular immunity by its cytotoxic activity against hemocytes. This study aimed to test its oral toxicity against insect pest by expressing it in a recombinant tobacco plant. A recombinant CpBV-ELP1 protein was produced using a baculovirus expression system and secreted to cell culture medium. The cell cultured media were used to purify CpBV-ELP1 by a sequential array of purification steps: ammonium sulfate fractionation, size exclusion chromatography, and ion exchange chromatography. Purified rCpBV-ELP1 exhibited a significant cytotoxicity against Spodoptera exigua hemocytes. CpBV-ELP1 was highly toxic to the fifth instar larvae of S. exigua by injection to hemocoel. It also showed a significant oral toxicity to fifth instar larvae of S. exigua by a leaf-dipping assay. CpBV-ELP1 was cloned into pBI121 vector under CaMV 35S promoter with opaline synthase terminator. Resulting recombinant vector (pBI121-ELP1) was used to transform Agrobacterium tumefaciens LBA4404. The recombinant bacteria were then used to induce callus of a tobacco (Nicotiana tabacum Xanthi) leaves and subsequent generation (T1) plants were selected. T1 generation tobacco plants expressing CpBV-ELP1 gave significant insecticidal activities against S. exigua larvae. These results suggest that CpBV-ELP1 gene can be used to control insect pests by constructing transgenic crops.