Thapsigargin is a specific antagonist of SR/ER-type $Ca^{2+}-ATPase$ in animal tissue, and it was used to characterize the microsomal ATPases prepared from the roots of tomato. When $10\;{\mu}M$ thapsigargin was added, it inhibited the microsomal ATPase activity by 30%. The thapsigargin-induced inhibition was dose-dependent. Since the activity of $Ca^{2+}-ATPase$ is very low in the roots of tomato tissue, it is possible that thapsigargin inhibits the activities of major $H^+-ATPases$ located in plasma and vacuolar membranes. The inhibitory effect of thapsigargin was reduced when the vacuolar $H^+-ATPase$ activity was inhibited by ${NO_3}^-$. However, the effect of thapsigargin was not observed on the $H^+-ATPase$ activity located in the plasma membrane. These results suggest that thapsigargin inhibits the vacuolar $H^+-ATPase$ activity in the roots of tomato.
The foregut epithelium of the last instar larva in the scarab beetle, Allomyrina dichotoma was observed with electron microscopes. The foregut epithelium of the scarab beetle larva is composed of a single-layered squamous absorptive cell. The luminal surface of the epithelium is covered with cuticular intima. The free surface of the squamous cell has a irregular array of microvilli 'brush border', while cell membrans close to the basal lamina are infolded and a lot of mitochondria are concentrated in those processes. The cytoplasm in the epithelial cells is well developed nucleus, mitochondria. And the basal region of cell contains large lipid-, protein droplets and numerous glycogen granules. The basal lamina is located between the basal membrane and muscle bundle, providing barrier between the epithelium and the hemolymph. The epithelium is surround by the subepithelial space and muscles. The subepithelial space, which is composed of fibrous connective tissue is innervated by many tracheoles and axon.
To elucidate how microfilaments and vesicles participate in bile formation, the pericanalicular cytoplasms were observed in the liver of rats treated with taurocholic acid by deep etching with rapid freezing, and copmpared them with the findings on convensional thin sections. The microfilaments were identified around the bile canaliculi in the forms of core filaments of microvilli, filaments of pericanalicular web running in parallel to the border of bile canaliculi, and filaments on the junctional complex. In taurocholic acid-treated rats, microfilaments could be visualized around the bile canaliculi and along their borders. The microfilaments appeared to be installed to link to both the canalicular membrane and vesicles. Such specialized microfilaments are considered to participate in the translocation of vesicles in the pericanalicular cytoplasm. From the evidence, it is assumed that the microfilament induces the vesicles to transport and fuse to bile canalicull into which bile acids is secreted by exocytosis.
Formation, cellular distribution and structural changes of storage lipid, and active site and cellular localization of lipase in endosperms and cotyledons of lipid-rich seeds such as Helianthus annuus, Ricinus communis and Pinus koraiensis, and in those of starch-rich seeds such as Pisum sativum and Zea mays were investigated in relation to the seed development by cytochemical methods. In endosperms and storage cotyledons of lipid- and starch-rich seeds after seed-gathering, there were widely distributed storage material which was composed of spherical protein bodies, spherosomes, and starch granules. But cellular organelles were hardly observed in the cytoplasm. Staining pattern of vesicles released from SER, and of low electron dense membraneous granules, which were perhaps at an early stage of spherosomes, were the same as in the spherosome. Electrondense granules released from RER were observed in the vicinity of plasma membrane. As a result of lipid staining, the spherosomes were more electron dense and were uniform as compared with the protein matrix within the protein body and cytoplasmic proteinaceous granules. The major component of the spherosome was determinated to be lipid. Spherosomes and vesicles containing SER-released materials showed the same as in the electron density. Lipase activity was especially strong in the inner region and on the surface of decomposed spherosomes and near the plasma membrane.mbrane.
The migut epitheluim of the last instar larva in the mosquito larvae, Anopheles sinensis was observed with electron microscopes. The midgut epitheluim of the mosquito larva is composed of a single-layered columnar absorptive cells, regenerative cells and secretory granular cells. The free surface of the columnar absorptive cells has a regular array of microvilli 'brush border', while cell membranes close to the basal lamina are extrmely infolded and a lot of mitochondria are concentrated in those processes. The columnar absorptive cells also contain cell organelles expected to be found in absorptive cell. Midgut regenerative cells which are positioned basally in the epithelium form the groups, which are called 'nidi', composed of 1 or $2{\sim}3$ cells, they show darker appearance than the columnar absoptive cells. The secretory granular cells contain numerous electron dense granules, $200{\sim}400$ nm in diameter. The cone shaped secretory granular cells are located in the basal portion of the midgut epitheluim. The epithelium is surrounded by the subepithelial space and muscle bundles. The subepithelial space, which is filled with fibrous connective tissue, is innervated by many axon cells and tracheoles.
Factors influencing the fusion frequency of protoplasts were investigated with auxotrophic mutants of Pleurotus florida and Pleurotus ostreatus. Immediately after the polyethylene glycol (PEG) solution was added, the protoplasts adhered firmly and shrank. During the subsequent dilution with 0.6 M sucrose, the protoplasts regained their normal size and larger bodies were observed. Interspecific heterokaryons were obtained by fusion of the nutritionally complementing protoplasts. Hyphae of the heterokaryotic fusants formed true clamp connections. The optimum conditions were a total of 1 to 15 million protoplasts per ml, 30% polyethylene glycol 8000 solution with adjustment to pH 8.0 and 0.6 M sucrose stabilized regeneration medium. Other parameters such as $CA^{++}$, glycine, exposure time and temperature influenced mainly the viability of the protoplasts.
Lee, . H. C.;S. J. Uhm;S. Y. Ann;H. J. Chung;Park, H. D.;Lee, H. T.;K. S. Chung
Korean Journal of Animal Reproduction
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v.24
no.4
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pp.439-449
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2000
This study was to investigate the expression of transgene after co-injection of spermatozoon and EGFP gene into mature oocytes in cattle. From frozen semen, spermatozoa were treated by DTT with 0.03% Tween-20, freezing and thawing or 0.02% Triton X-100 to disrupt their plasma membranes. The sperm injected oocytes were co-cultured with bovine oviduct epithelial cells in CRlaa, and expression of EGFP in embryos were observbed under epifluorescent microscope. Two pronuclei were formed in oocytes injected with sperm treated by DTT (44.6%), DTT-Tween-20 (48.4%), DTT-freezing (44.4%) and DTT-Triton X-100 (42.9%). Cleavage and blastocyst formation rates of bovine oocytes which injected with sperm treated by DTT, DTT-Tween-20, DTT-freezing, and DTT-Triton X-100 were 49.1, 58.5, 43.9, and 48.4% and 10.2, 13.0, 6.8, and 6.5%, respectively. Although the most of embryos were showing mosaicism, embryos expressing EGFP gene were observed in all treated groups. Therefore, these results indicate that membrane disrupted sperm could interact with exogenous DNA, and that this procedure may be useful to introduce foreign gene into bovine oocytes.
There have been many problems like plasmolysis in the ultrastructural studies with kelps. The present study was conducted with series of different fixatives and buffer solutions and several resins to solve the plasmolysis phenomena. The fixative of 1470 mosmol($3\%$ glutaraldehyde, $2.4\%$ paraformaldehyde in 0.05M cacodylate buffer with 0.2M sucrose and $0.5\%$ caffeine at pH of 7.2) showed the least frequency of plasmolysis. The relationship between the concentration of primary fixatives and the frequency of plasmolysis was not found. With above fixative the possibility of plasmolysis during infiltration period was not identified using ultra-low viscosity resin. Generally, the kelp(Laminaria religiosa) contains a lot of mucilage, which interupts the infiltration of fixative. The possible physiological mechanisms related with mucilage secretion may be unable to fix the region of plasmalemma properly.
Uptake and accumulation of vitellogenin into ovary were traced by radiolabeled vitellogenin produced in the fat body. Vitellogenin reached the oocytes through the follicle cells and the intercellular space and penetrated the oocyte membrane via the endocytotic vesicles and then accumulated to the growing yolk granules.
쇠오징어(Sepiella maindroni)흠반의 외측 상피조직에서 3종류의 감각세포(A, B 및 D형 감각세포)와, 1종류의 감각상피세포(C형 감각 상피세포) 그리고 2종류의 점액세포(a 및 b형 점액세포)가 각각 관찰되었다. A 및 B형 감각세포는 분포상태가 다를 뿐 형태는 거의 유사한 세포이고 많은 분비액포를 지닌 해면질 형태의 세포로서 전자 밀도가 낮은 물질을 분비하는 분비성 감각세포로 확인되었다. 0형 세포는 매우 작은 감각세포로서 세포의 자유면에 긴 융모가 밀생되어있었고, 측면원형질막은 불규칙한 수지상 연접을 이루고 있었다. 이 세포는 전자밀도가 매우 높아서 검게 보였다. C형 감각 상피세포도 세포의 자유면에 긴 미세융모가 밀생되어있는 단층 원주상 세포로서. 이 세포 역시 측면원형질막이 불규칙한 수지상 연접을 이루고 있고. 엽접내에는 많은 소포와 약간의 사립제가 관찰되었다. 3형 점액세포는 세포질속에 내강이 팽창된 활면소포체를 소지하고 있으며 전자밀도가 높은 구형의 점액과립을 형성하였고, b형 점액세포도 전자밀도가 중등도인 점액질 과립을 소지하고 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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