This study was performed to find out the reasonable sexing methods In the chicken, obtain the basic information for the mechanisms related to chicken sexual differentiation and identify the genes which known to involved in chicken sex differentiation. The chromosome analysis of chicken embryonic fibroblast was a simple method to determine sex of chicken by means of Z and W chromosome identification. The bands of female chicken genomic DNA digested with Xho Ⅰ and Eco RI restriction endonuclease showed to be useful in direct sex determination and these repetitive sequences of Xho Ⅰ and Eco RI families were proposed to be very homologous in their sequences by colony hybridization analysis. Seven of 150 random primers were selected to amplify the W chromosome-specific band by using arbitrary primed PCR and three of them were useful to identify the sex of chicken. To identify the sex differentiation genes in the chicken, PCR for the amplification of ZFY and SRY sequences was performed. ZFY and SRY sequences were amplified successfully in the chicken genome, implying that chicken genome might have the sex-related conserved sequences similar to mammalian ones. The PCR products of ZFY amplification were the same in both sexes, suggesting that these sequences may be located on autosome or Z chromosome. The profile of PCR amplification for SRY sequences showed variation between sexes, but this result was not enough to specify whether the SRY gene in chicken is on the autosome or sex chromosome.
This study was investigated genetic variation in 24 Taraxacum accessions from various regions in South Korea based on the sequences of two chloroplast DNA (cpDNA) regions (trnL-trnF and rps16-trnK). T. mongolicum, T. officinale, and T. laevigatum were triploid, and T. coreanum and T. coreanum var. flavescens were tetraploid. The trnL-trnF region in native Korean dandelions (T. mongolicum, T. coreanum, and T. coreanum var. flavescens) were ranged from 931 to 935 bp in length, and that of naturalized dandelions were ranged from 910 bp (T. officinale) to 975 bp (T. laevigatum) in length. The rps16-trnK region in T. mongolicum, T. coreanum, T. coreanum var. flavescens, T. officinale, and T. laevigatum was 882-883 bp, 875-881 bp, 878-883 bp, 874-876 bp, and 847-876 bp, respectively, in length. The sequence similarity matrix of the trnL-trnF region ranged from 0.860 to 1.00 with an average of 0.949, and that of the rps16-trnK region ranged from 0.919 to 1.000 with an average of 0.967. According to the phylogenetic analysis, the Korean native taxa and naturalized taxa were divided independent clade in two cpDNA region. T. coreanum var. flavescens clustered only with T. coreanum, and there were no significant differences in their nucleotide sequences. The finding that two accessions (T. coreanum; Jogesan, T. mongolicum; Gangyang) had a high level of genetic variation suggests their utility for breeding materials.
Cirsium pendulum plants were collected from Hongcheon, Pyeongchang, Wonju, Yangyang in Kangwondo, Gapyeong in Gyeongkido, and Choongju in Choongcheongbukdo. Cirsium setidens plants were collected from Taebaek in Kangwondo and Bonghwa in Kyeongsangbukdo. Genomic DNA was prepared from those plants and used for the amplification of 18S rDNA, ITS1, 5.8S rDNA, ITS2, and part of 28S rDNA. The PCR products were sequenced, and the sequence was deposited in the GenBank. The comparison of those sequences has revealed that the rDNA sequences are identical for all six C. pendulum plants, but that the ITS1 and ITS2 sequences contain variable nucleotides. The two C. setidens plants had different nucleotides in 18S rDNA, ITS1, and ITS2. The comparison of the DNA sequences of C. pendulum and C. setidens collected in this study with C. pendulum of Hokkaido in Japan and C. japonicum of Anhui in China indicated that the plants of those three species are clearly divided into three distinct groups. The silymarin content of the collected plants was analyzed and turned out to be quite high. Therefore, it has been found that both C. pendulum and C. setidens plants are producing large amounts of silymarin, which has been reported to have various medicinal effects.
Kim, Young-Dong;Paik, Jin-Hyub;Kim, Sung-Hee;Hong, Suk-Pyo
Korean Journal of Plant Taxonomy
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v.33
no.4
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pp.373-386
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2003
Internal transcribed spacer (ITS) sequences of nuclear ribosomal DNA were determined for 14 individuals representing eight taxa from Scopolia s. str. and related genera, Anisodus and Atropanthe. We found that the ITS sequences of Korean endemic species, S. parviflora, are significantly different from its allied species, S. japonica. This is contradictory to traditional taxonomic treatments in which those species are regarded as conspecific. S. parviflora exhibited closer relationship to S. carniolica, which is disjunctly distributed in Europe. In spite of substantially high sequence divergence between S. japonica and S. parvlflora/S. carniolica clade, morphological resemblance is evident among the species. Morphological stasis concept (retardation of morphological differentiation or evolution of similar characters among the disjuncts in a similar ecological habitat) was referred to understand this rather unusual evolutionary feature. S. lutescens, another Korean endemic species, shared almost identical ITS sequences with S. parviflora. Lack of diagnostic character distinguishing the taxa suggests that they are conspecific. Anisodus carniolicoides, which was originally described in Scopolia, was grouped with A. luridus and A. tanguticus. The monophyletic Anisodus formed a sister group relationship with a monotypic genus Atropanthe.
Plants which had been classified to the Scrophulariaceae of the Lamiales were recently reclassified. Many of them were moved to the other families of Lamiales according to the DNA sequences of the plastid DNA. Among those, Melampyrum roseum, Phtheirospermum japonicum, Pseudolysimachion undulata, Lindernia crustacea and Mazus pumilus were chosen for phylogenetic analyses. DNA sequences of 18S rRNA gene and ITS1 of those plants were determined and deposited into GenBank (accession numbers GU359046, GU359047, GU359048, GU359049, GU359050, respectively). Analyses of those DNA sequences confirmed the current classification done on the basis of the plastid DNA sequences of Melampyrum roseum, Phtheirospermum japonicum and Pseudolysimachion undulata. However, it was not possible to classify Mazus pumilus and Lindernia crustacea due to discrepancies of analyses data.
Twelve Cucumber mosaic virus (CMV) isolates were isolated from genetically modified (GM) and non-GM Capsicum annuum in two GM fields, Namyangju and Anseong, and their properties were investigated in this study. Coat protein (CP) gene of the CMV isolates were synthesized by RT-PCR using genus-specific primers which designed to amplify a DNA fragment of 950 bp. Purified cDNA fragments were cloned into the pGEMT easy vector for sequence determination. Nucleotide sequences (internal 657 bp) of CMV isolates were compared with Fny-CMV CP sequences and there were no significant collection site specific sequence similarities found. When predicted amino acid sequences (219 amino acids) were compared with Fny-CMV CP amino acids sequences, there were 96.8% to 97.3% similarities found from Namyangju collections and 95.9% to 96.8% similarities from Anseong collections. The phylogenetic analysis with nucleotide sequences showed definite differences in CMVs which have been isolated from the two regions.
Pedicularis growing at Mt. Halla of Jeju Island is known as an endemic species of P. hallaisanensis Hurusawa. On the other hand, the plant is morphologically similar to P. amoena, P. spicata, and P. verticillata in gross morphology, so the taxonomic treatment of the taxon remains controversial. To clarify the taxonomic position of the plants, we examined external morphological characters and nuclear ribosomal DNA ITS sequences for P. hallaisanensis and its related species. The plants of Mt. Halla are clearly different from P. amoena and P. verticillata in the morphology of calyx lobes, the length of galea and lower lip, density of glandular hairs on plants, presences of the radical leaves after anthesis and molecular data. However, P. hallaisanensis is not clearly separated from P. spicata distributed in N. E. Asia on external morphological characters and DNA sequences of internal transcribed spacers. In this study, the morphological and molecular data suggested that P. hallaisanensis should be merged into the former species.
This study was carried out to identify the phylogenetic relationship and to know the distribution of the entomopathogenic fungi by comparing the DNA sequences of internal transcribed spacer regions (ITS1 and ITS2) and 5.8S ribosomal DNA (rDNA) repeat unit. The entomopathogenic fungi had their specific sequences in ITS1 and 2 regions depending on species. The comparison of the ITS sequences of standard strains indicated that the sequences ITS1 were more variable than those of ITS2. It seems that Paecilomyces tenuipes, Isaria japonicus and P. japonicus are the same species but called as different names because of very similar sequences, and unidentified Paecilomyces sp. KACC 40220 and KACC 40656 showed identical sequences to P. tenuipes. Thirty six strains of the commercial products of entomopathogenic fungi used in this study were divided into four groups by the phylogenetic analysis based on 5.85 rDNA and ITS regions. We found twenty-three strains were P. tenuipes / japonica, eleven strains were C. militaris, and other two strains were Beauveria bassiana and C. multiaxialis, respectively.
Park, Tae-Seon;Park, Hong-Kyu;Ku, Bon-Il;Kim, Young-Doo;Ko, Jae-Kwon;Lee, In-Yong;Park, Jae-Eup
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.13
no.4
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pp.290-297
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2009
This research aims to contribute the characterization of acetolactate synthase (Ec 4.1.3.18; ALS) and the resistance mechanism by sequence analysis of ALS gene of the sulfonylurea-resistant and -susceptible Monochoria vaginalis. The ALS gene was obtained from susceptible (S) and resistant (R) M. vaginalis to sulfonylurea herbicides (SUs). The 815 bp the fragment and the genomic DNA sequence coding for acetolactate synthase (ALS) of S and R biotypes of M. vaginalis were cloned and sequenced. Nineteen clones were divided greatly into 4 groups as result of sequencing. The first group was not difference to S type, the second group was amino acid of P197S which found point mutations causing substitution of serine for proline at amino acid 197, the third group was observed greatly other part of 6 places than group 1, and the fourth group appeared the intergrade of group 1 and 3. Therefore, it could be assumed what ALS gene of various types can be one plant. The peptide of the 13 amino acid Domain A region for ALS genes from R biotype of M. vaginalis differed from that of the S biotype by one base substitution at proline codon of Domain A. It could also be confirmed that point mutation of serine for proline at amino acid 197.
The sequence of ITS (partial 16S ribosomal DNA, complete ITS1, 5.8S ribosomal DNA and ITS2, and partial 28S ribosomal DNA) was analysed by PCR and autosequencing in Sarcodon aspratus. The ITS lenght of S. aspratus was 716 base pair. As this sequence compared with other reports on S. aspratus (ace No AF335110), the sequence variation based on nucleotide deletion and substitution was $1.8\%$. This nucleotide variation rate in same species was very higher than in other species. Also, the sequence varitation rates between this S. aspratus and S. imbricatus, and S. squamus were $8\%\;and\;10\%$, respectively. This results suggested that the high sequence variation of S. aspratus might be caused specific host and inhabitat environment which limited gene flow.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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