Park, Min Young;Jang, Ha-Young;Lim, Yong Pyo;Lee, Jung-Soo;Park, Suhyoung
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.1
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pp.27-34
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2017
Our aim was to find the effective duration and culture conditions for microspore culture in a genetically variant cabbage (Brassica oleraceae L. var. capitata). We discovered that the '$2{\times}NLN$ medium containing $AgNO_3$ 1 mg/l, sucrose 13%' was most efficient in producing the cabbage embryos. The number of induced embryos was higher in $F_2$ or $F_3$ progeny generation than the $F_1$ hybrid cultivar used as plant materials. Thus, we recommend microspore culturing using progeny plants of failed $F_1$ cultivar. The acquisition ratio of embryos and plants derived from microspore was higher in the early flowering period as compared to the late flowering period. When transplanted in the soil, 71.2% plants developed from the early flowering period, compared to 27.0% from the middle period and 1.8% plants from the late period. Thus, we recommend microspore culture using buds collected during the early flowering period.
Recently successful induction of haploid plant by means of anther culture method has become a big topic among geneticists and plant breeders. The haploid plant can be used as a precious material for such basic researches as mutation or genetics. Once the haploid is obtained, production of homozygous plant is not a difficult problem. The method of producing homozygous plant can, also, be applied to the practical breeding works. When applied to the hybridization of self-fertilizing breeding period would be greatly shortened and in cross-fertilizing vegetables production of uniform hybrid seed would be very easily obtained. Last few years many scientists attempted anther cultures using various plant species, but it was successful only in several species. Unlike the other tissue cultures which use somatic organs or tissues as explants, anther culture seems to be very difficult because the plants or calli have to be induced from the haploid microspores or pollen grains. In the present experiment anther culture of fruit trees and ornamental shrubs of four genera and seven species was attemped. Anthers of Various stages ranging from tetrad and late microspore were cultured on the modified Murashige and Skoog's medium supplemented with various concentrations of auxins and kinetin as growth regulators. Handling of materials, sterilization, and other operations of culture were done by routine methods. The results were summarized as follows: 1. Calli were induced in the anthers of Forsythia Koreana Nak., Rhododendron mucronuratum Turcz., R. yedoense Max. var. Poukhanense Nak., and Prunus armeniaca L. var. ansu Max. No signs of callus were observed in Prunus persica Sieb. et Zucc. var. vurgaris Max., Pyrus ussuriensis var. macrostipes (Nak.), and Prunus salcina Lindley. 2. Calli were easily formed in any of the media with differing concentrations of auxins and kinetin. 3. In F. Koreana calli developed from anther surface and connective. Callus emerging out of anther locule was not observed. 4. Somatic calli arose from filament, connective, and inside of anther wall in R. mucronulatum. Many of the microspores accumulated starch grains. 5. The anther lobes located opposite the filament of R. yedoense turned easily to calli. This phenomenon was not observed in R. mucronulatum. Microspore embedded for a period in the medium became starch pollen. No callus was observed arising from microspore. 6. In P. armeniaca calli were not induced from somatic anther tissues. Instead, callus emerged out of anther locule rupturing the anther slit. Starch was not formed in the microspore. 7. In P. persica, Pyrus ussuriensis, and P. salcina, calli were not observed in the anthers examined more than 60 days after culture. Microspores of these species, however, were free of starch grains even after long period of subculture. 8. It was learned that somatic calli of the species examined arose usually from endothelium of anther wall, septum of two neighboring anther locules, parenchyma tissues of connectives, or anther lobes. 9. In the anther locule of P. armeniaca cultured long in medium, swollen microspores, polynucleate microspores, multicellular pollen grains, or callus mass were frequently observed, this indicating that the callus of this species was microspore-origin. 10. It was clarified that in P. armeniaca production of haploid plant by anther culture might be possible.
Park Eun-Joon;Kim Jin-Ae;Lee Jong-Suk;Jang In-Chang;Yoon Michung;Chung Sang-Ho;Kim Moonza
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.1
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pp.37-44
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2005
Microspores were isolated from pepper (Capsicum annuum L.) anthers by using a micro-blender and cultured in modified NLN medium at $25^{\circ}C$. The influence of pretreatment period at $32^{\circ}C$, adding the 2-hydroxynicotinic acid to a pretreatment medium, and co-pretreatment anthers with microscopes on the induction of embryo were examined. Globular and torpedo embryos were observed from 3 weeks after culture. Embryo development was not synchronized within culture. After 4 weeks in culture, in addition to globular and torpedo embryos, cotyledonary embryos were observed. Normal cotylodonary embryos developed into plantlets when transferred to a solid hormone free B5 medium containing $2\%$ sucrose. Embryo yields were significantly higher after 1- and 2-day pretreatment at $32^{\circ}C$. However the development of embryo ceased at the globular or heart stage. In contrast, embryo yields were lower after 3- to 6-day pretreatment at $32^{\circ}C$ and embryo developed at the cotyledonary stage. After adding the 2-hydroxynicotinic acid to anther pretreatment solution, embryo yields were slightly increased. However most embryos occurred were at the globular or heart stage. Co-pretreatment of microspores with anthers was deleterious for embryo induction and development. AS far as we know, this is the first report of success in obtaining high frequency of embryogenesis and plantlets formation from isolated microspores of pepper. Although the culture conditions have to be optimized further, this promising microspore culture system can be used for genetic transformation, selection for dominant and recessive traits as well as for the production of homozygous doubled haploid plants.
The enormous production of spores by the fruitbodies in the cultivation of oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus) is develop an allergy with symptoms similar to an "extrinsic allergic alveolitis (EEA)". the sporeless strain would noy only benefit health of mushroom workers but also reduce the risk of viral infections on the mushroom farms. For the development of a sporeless strain of P. ostreatus we used strain ASI 2069. This non-commercial strain is completely nonsporulating. We have recovered both nuclear types of strain ASI 2069 as monokaryons (hereafter referred to as neohaplonts) by protoplasting the mycelium. Crosses between neohaplonts and SSI's(single spore isolates) obtained from a sporulating commercial strain ASI 2180 yielded fruitbodies that isolated 128 strains. 13 excellent strains are selected from 30 bred strains by quality of fruitbodies and spore number. Among 13 excellent strains, G192 strain is chose finally to high yield and sporelessness.
The ontogeny of pollen wall in Panax ginseng was studied with transmission and scanning electron microscopy from early tetrad stage until pollen maturity. Initial indication of exine development is undulation of plasma membrane for the preparation of bacular mound. The first recognizable structure of the pollen wall is the cellulosic primexine which is formed outside of the plasma membrane while microspore tetrads are still surrounded by callose wall. As development proceeds, foot-layer and baculum differentiation, callose dissolution and exine formation were progressed. During this process, sporopollenin is deposited into the exine, and then endexine development was followed. The intine, innermost pollen wall layer, is developing form hypertrophic Golgi vesicles. The thickness of exine is very even on all along the pollen wall, but intine thickness of apertural region is thicker than that of nonapertural region. Mature pollen of ginseng is $20{\mu}m$ in size, tricolpate and shows fine reticulate sculpturing.
Park, Eun-Joon;Lee, Jong-Suk;An, Dong-Joo;Kim, Moon-Za
Journal of Plant Biotechnology
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v.37
no.4
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pp.494-504
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2010
The effect of the addition of the fresh medium, volume of under solid medium in double layer culture as well as the medium change after pretreating microspores on the production of embryos in microspore culture of hot pepper (Capsicum annuum L.) has been studied. When cultured after heat pre-treatment, changing pretreatment media with fresh culture media proved to be more effective for embryo production rather than supplementing additional culture media. Heat-pretreating for 3 days turned out more effective for embryo production than pretreating for 1 or 2 days. In the case of anther pretreatment, the addition of fresh medium after culture was not effective for embryo production. In pretreating microspores, however, supplementing additional fresh culture media greatly improved embryo yield and quality. The best time point of media addition was 4 days after culture commenced, and the most effective number of times of media addition was one time addition. Moreover, the effective volume of added medium in double layer culture for embryo production was 1.5 ml. The addition of media more than 1.5 ml reduced both embryo yield and quality. Double layer medium was more effective for embryo development than liquid medium. When the volume of under solid medium increased ranging from 3 ml to 7 ml, more cotyledonary embryos were produced in either 5 ml or 7 ml compared to 3 ml, even though the total number of embryos were highest in 3 ml. These results can be used as an important data for establishing an efficient microspore culture system for producing high frequency of normal embryos in hot pepper.
Jo, Man Hyun;Ham, In Ki;Park, Min Young;Kim, Tae Il;Lim, Yong Pyo;Lee, Eun Mo
Horticultural Science & Technology
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v.30
no.5
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pp.573-578
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2012
A total of eleven Chinese cabbage accessions were used for microspore culture and were grown to take basal data. Based on the collected data, breeding materials were chosen to develop new improved Chinese cabbage cultivars. The range of microspore-derived embryoid taken from flower buds was 1.6 to 35.4 embryoids. The embryoids from IT26110 and IT26153 among the Chinese cabbages were more than 34 per flower bud. The viability rate after cold treatment was low from 0.2 to 11.7%. The range of fertility rate was 7.7 to 58.8% in general but the IT26118, IT26122, IT26128, IT26130, and IT26164 were more than 50%. The result of their seed production ability by selfing was 11.9 seeds per siliqua in IT26128 while the others were less than 10 seeds. In the microspore culture using parents of different hereditary, the number of embryoids, the number of plants, the rate of fertility and their pure seed production ability appeared to be very different in doubled haploid lines obtained from fertile plants of Chinese cabbage.
Previously, we have shown that Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. (S. chinensis) has a protective effect against endoplasmic reticulum (ER) stress-induced hepatic steatosis. Gomisin A is a bioactive phytoestrogen derived from S. chinensis. In the present study, the in vitro and in vivo effects of gomisin A on ER stress and hepatic steatosis were investigated. We quantified the expression of markers of ER stress, including glucose regulated protein 78 (GRP78), C/EBP homolog protein (CHOP), and X-box-binding protein-1 (XBP-1), in HepG2 cells treated with tunicamycin or palmitate. Tunicamycin treatment in HepG2 cells induced the expression of markers of ER stress, including GRP78, CHOP, and XBP-1c. However, treatment with gomisin A reduced the expression of markers of ER stress. These inhibitory effects were also observed in palmitate-incubated HepG2 cells. The in vivo inhibitory effects of gomisin A were assessed in mice injected with tunicamycin or fed with a high fat diet (HFD). Gomisin A reduced the expression of markers of ER stress and decreased triglyceride levels in the livers of mice after tunicamycin injection or HFD feeding. Furthermore, gomisin A decreased the expression of inflammatory genes in palmitate-incubated HepG2 cells and the liver of HFD-fed obese mice. These results suggest that gomisin A inhibits ER stress and ameliorates hepatic steatosis induced by ER stress.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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