목적 : 이 연구는 Vipera lebetina turanica의 사독약침액(蛇毒藥鍼液)(Snake venom toxin, SVT)이 인간 신경아세포종의 암세포주인 SK-N-SH 세포에서 암세포성장의 억제 및 그 기전에 대하여 살펴보고자 하였다. 방법 : SVT를 처리한 후 SK-N-SH의 성장억제를 관찰하기 위해 CCK-8 assay와 LDH assay를 시행하였고, apoptosis 평가에는 세포형태의 관찰과 DAPI, TUNEL, Annexin V-PI double staining assay 및 cell detachment assay를 시행하였다. 세포자멸사 관련 세포기전을 보기 위하여 세포주기, 세포내 칼슘량, 세포내 활성산소량 및 미토콘드리아의 세포막전위 변화를 측정하였고, DNA fragmentation assay를 시행하였으며, 세포자멸사 조절 단백인 Bax, Bcl-2, caspase-3, -9의 발현 변화 관찰에는 western blot analysis를 시행하였다. 결과 : SK-N-SH 세포에 SVT를 처리한 후, 신경아세포종 세포의 성장, Apoptosis의 유발 및 기전의 영향을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. SVT를 처리한 SK-N-SH 세포 관찰에서 세포독성은 농도의존적으로 증가하는 경향이 있는 반면 암세포성장의 유의한 억제는 $20{\mu}g/m{\ell}$ SVT에 의해서만 나타났다. 2. 세포자멸사 평가에서 SVT를 처리한 SK-N-SH 세포는 세포자멸사의 특징적 형태를 나타내었다. TUNEL assay에서는 세포자멸사 활성세포가 미약하게 나타난 반면 cell detachment assay와 Annexin V-PI double staining에서는 각각 세포박리와 세포자멸사 활성세포의 유의한 증가를 나타내었다. 3. 세포자멸사 관련 세포기전연구에서 SVT를 처리한 SK-N-SH 세포의 세포주기, 세포 내 칼슘양 및 DNA fragmentation에는 유의한 변화가 관찰되지 않은 반면 세포내 활성산소 양은 유의한 증가를 나타내었고, 그에 따른 미토콘드리아 세포막 전위의 유의한 변동이 관찰되었다. 4. SVT를 처리한 SK-N-SH는 세포자멸사 관련 단백 발현에서 Bax에 대해 유의한 증가를 나타내지 않았으나 caspase-3 및 caspase-9의 유의한 증가와 Bcl-2의 유의한 감소를 나타내었다. 결론 : 이상의 결과는 SVT가 세포 내 활성산소를 증가시킴으로써 미토콘드리아의 세포막전위에 변화를 일으켜 인간 신경아세포종 세포주인 SK-N-SH의 세포박리와 유관한 세포자멸사를 유발함으로써 증식억제 효과가 있음을 입증한 것이다.
목적 : 이 연구는 Vipera lebetina turanica의 사독약침액(蛇毒藥鍼液)(Snake venom toxin, SVT)이 인간 신경아세포종의 암세포주인 SK-N-MC 세포에서 암세포성장의 억제 및 그 기전에 대하여 살펴보고자 하였다. 방법 : SVT를 처리한 후 SK-N-MC의 성장억제를 관찰하기 위해 CCK-8 assay와 LDH assay를 시행하였고, apoptosis 평가에는 세포형태의 관찰과 DAPI, TUNEL, Annexin V-PI double staining assay 및 cell detachment assay를 시행하였다. 세포자멸사 관련 세포기전을 보기 위하여 세포주기, 세포내 칼슘량, 세포내 활성산소량 및 미토콘드리아의 세포막전위 변화를 측정하였고, DNA fragmentation assay를 시행하였으며, 세포자멸사 조절 단백인 Bax, Bcl-2, caspase-3, -9의 발현 변화 관찰에는 western blot analysis를 시행하였다. 결과 : SK-N-MC 세포에 SVT를 처리한 후, 신경아세포종 세포의 성장, Apoptosis의 유발 및 기전에 영향을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. SVT를 처리한 SK-N-MC 세포 관찰에서 $20{\mu}g/m{\ell}$ SVT 처리가 암세포성장의 유의한 억제를 나타내었다. 세포독성 관찰에서 SVT처리는 처리하지 않은 것에 비하여 증가를 나타내었다. 2. 세포자멸사 평가에서 SVT를 처리한 SK-N-MC 세포는 세포자멸사의 특징적 형태를 나타내었다. TUNEL assay에서는 세포자멸사 활성세포가 미약하게 나타난 반면 cell detachment assay와 Annexin V-PI double staining에서는 각각 세포박리와 세포자멸사 활성세포의 유의한 증가를 나타내었다. 3. 세포자멸사 관련 세포기전연구에서 SVT를 처리한 SK-N-MC 세포의 세포주기, 세포내 칼슘량 및 DNA fragmentation에는 유의한 변화가 관찰되지 않은 반면 세포내 활성산소 양은 유의한 증가를 나타내었고, 그에 따른 미토콘드리아 세포막 전위의 유의한 변동이 관찰되었다. 4. SVT를 처리한 SK-N-MC는 세포자멸사 관련 단백 발현에서 caspase-9에 대해 유의한 증가를 나타내지 않았으나 Bax 및 caspase-3의 유의한 증가와 Bcl-2의 유의한 감소를 나타내었다. 결론 : 이상의 결과는 SVT가 세포내 활성산소를 증가시키므로 미토콘드리아의 세포막전위에 변화를 일으켜 인간 신경아세포종 세포주인 SK-N-MC의 세포박리와 유관한 세포자멸사를 유발하므로 증식억제 효과가 있음을 입증한 것이다.
침엽수재(針葉樹材)(Radiata pine, Pinus radiata)MDF와 활엽수재(闊葉樹材)(Rubber wood, Hevea brasiliensis)MDF 각 1종을 대상으로 MDF를 제조하기 전 원료(原料) 섬유(纖維)의 미세(微細) 구조(構造) 및 내부결합력 시험 후 MDF의 파괴면(破壞面)에서 섬유표면(纖維表面)에 접착제(接着劑)가 도포(塗布)된 형태를 주사전자현미경(走査電子顯微鏡)으로 관찰하였다. 원료 섬유는 침(針) 활엽수재(闊葉樹材) 모두 fiber twisting 및 shrinkage fold 등이 관찰되었다. 침엽수재(針葉樹材)의 경우는 유연벽공부(有緣壁孔部)에서 유연벽공(有緣壁孔)이 없는 부분에 비하여 shrinkage fold의 발생 빈도가 낮고 표면(表面) 박리(剝離)는 가도관(假導管) 중 벽공이 없는 부분에서 관찰되었다. 활엽수재(闊葉樹材) 목섬유(木纖維)는 침엽수재(針葉樹材)와 마찬가지로 shrinkage fold가 관찰되었으나 표면(表面) 박리(剝離)는 거의 관찰되지 않았다. 활엽수(闊葉樹) 섬유(纖維)에서는 벽공의 유무에 따른 shrinkage fold의 차이(差異)가 거의 관찰되지 않았는데 이는 목섬유(木纖維)가 침엽수(針葉樹) 가도관(假導管)보다 작은 단벽공(單壁孔)을 갖기 때문으로 생각된다. 또 방사유세포(放射柔細胞)와 가도관(假導管) 및 목섬유(木纖維)의 박리(剝離) 부분(部分)에는 융기부(隆起部)가 관찰되었다. 내부결합력 시험후 나타난 파괴면을 통하여 접착제 분포를 관찰한 결과 거의 모든 섬유(纖維)들이 접착제(接着劑)로 둘러싸여 있었으며 섬유(纖維)간 접착형태(接着形態)도 매우 다양하였다. 침활엽수재(針闊葉樹材)간에 강도(强度)의 차이는 있었지만 파괴(破壞) 형태(形態)는 큰 차이를 나타내지 않았다. 즉 침활엽수(針闊葉樹) 모두 접착층(接着層)이 아닌 섬유(纖維)에서 파괴(破壞)가 발생하였으며 섬유에서 박리(剝離)된, 세포벽(細胞壁)의 일부가 다른 섬유(纖維)의 표면(表面)에 남아있는 형태와 섬유(纖維) 표면(表面)에서 떨어져 나간 형태로 관찰되었다. 세포 구성이 단순한 침엽수(針葉樹) MDF에 비하여 유세포(柔細胞)와 도관(導管) 및 목섬유(木纖維)의 파편들이 활엽수(闊葉樹) MDF에서는 다양(多樣)하게 분포하였다.
The morphological changes in normal and weathering hair shafts of the human scalp were investigated by using the transmission and scanning electron microscopes. The hair shaft composed of cuticular layer, cortex and medula. The surface of normal hairs are smooth and covered by imbricated cuticular scales. The cuticular layer consists of five to seven cuticle cells. These cells, which are flat and thin, measuring about $100{\mu}m$ long and $0.4{\mu}m$ thick, appears intercellular membrane complex in diameter 25 nm. The cortex composed of melanin granules and cornified cells, which multicomponent concentric microfibrils in diameter about 8 nm give rise to macrofibrils in diameter $0.5{\mu}m$ to $0.8{\mu}m$ encased in limiting membrane. The melanin granules are spherical shaped about $0.5{\mu}m$ in size and scattered between macrofibrils. The medulla in the normal hairs are $16{\mu}m$ in diameter centrally region of cortex. Normal hair shafts undergo progressive degenerative changes due to a variety of environmental insults. In the initial weathering process of hair, the cuticular scales became irregularly raised and broken, and then cuticle cells formed cytoplasmic vacuolation, following dissociated intercellular membrane complex, ultimately entirely lost and nuded cortex. Occasionally, transverse fissures were seen at hair shafts indicating that the hairs were deteriorated. Complete removal of the cuticular layer in the heavily damaged cortex portions appeared splitting of the cortical cell into its macrofibrils and scattering of melanin granules.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2010.05a
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pp.3-3
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2010
소나무에서 추출해낸 천연유기유황(Natural Sulfur)의 의학적 가치는 1972년 Jacob 박사와 Herschler 박사가 오래곤 과학대학에서 천연식이유황(Natural Sulfur/MSM)을 가지고 표피조직에 미치는 영향을 구명하면서 keratin 단백질에 대한 연구가 활성화 되기 시작하였다. 세포내 골격물질은 크게 형태와 조성에 따라서 actin microfilament, microtubule, 그리고 intermediate filament(IF)로 구분된다. keratin의 특성은 keratin intermediate family중에서 K17 IF가 새로운 기능을 나타내는데 피부세포의 성장에 핵심적인 조절 역할을 한다는 사실이 밝혀 지면서 Dr. Pierre A. Coulombe(The Johns Hopkins University School of Medicine)연구실은 브로컬리와 같은 십자화과 식물 등에 과량 존재하는 항산화 및 항암물질인 sulforaphane이 K17의 발현을 특이적으로 증가시킨다는 것을 알아내어 피부박리와 같은 피부손상을 기능적으로 복구시킬수 있음을 확인하였다. 현재는 수포성 표피박리증 환자군의 많은 부분을 차지하는 K14 돌연변이와 동일한 유전적 변형을 일으킨 생쥐모델을 이용한 약물 효과 검증과 전 임상단계의 인체실험을 함께 진행중에 있다. Mark E. Van Dyke 박사(Wake Forest Institute for Regenerative Medicine Medical Center)는 인간의 머리털에서 유래된 keratin으로 외상에 의한 신경 절단이나 압좌(압박손상)는 현재 다른 부위의 신경을 잘라 이식하거나 절단된 신경 양끝을 인공도관(conduit)으로 연결해 신경재생을 유도하는 미세수술을 시행하게 되는데, 신경재생을 유도하는 도관에 keratin을 주입하면 신경이식과 맞먹는 신경재생 성공률을 기대할 수 있다고 하였다. 앞으로는 동물성 keratin뿐만 아니라 식물성 keratin도 함께 연구할 필요가 있다. 동물성 keratin의 농업적 이용은 가금류 깃털의 keratin을 축출하여 친환경 육묘용 용기를 만드는데 있다. 이 용기는 자연조건에서 생분해될 수 있는 특성을 갖고 있다.
흉막의 고립성 섬유성 종양은 중피하에 존재하는 미분화 중배엽성 기원의 섬유 세포에서 기원하는 종양으로 알려졌다. 이 종양은 대부분 양성으로 보고되고 있으나 병리학적으로 높은 세포 밀도, 유사분열의 수가 많고(10개의 고배율 시야에서 4개 이상), 핵의 다양성, 출혈, 괴사등이 있으며 악성의 판단기준으로 보고된다. 환자는 62세 여자로 호흡곤란 및 기침을 주소로 본원에 입원하였으며 단순 흉부 방사선 및 전산화 단층 촬영상 우측 흉강내에 거대한 종양소견이 보였다. 이 종양은 23$\times$18$\times$12 cm, 2 kg의 크기와 무게를 가졌으며 우측폐 하엽과 중엽은 압박되어있었으나 종양 절개 후 재 팽창됨을 확인하였다. 또한 횡경막과 심하게 유착되어 박리도중 손상이 동반되어 봉합술이 필요하였다. 병리학적으로 종괴는 세포밀도가 높았고 방추형세포의 다발로 이루어져 있었으며 유사분열의 수가 많이(27 mitosis/10HPF)보였다. 면역 조직 화학 검사상 vimentin과 CD34에 양성 반응을 보였다. 이에 악성 고립성 섬유성 종양으로 확진되었다. 본 교실에서는 흉막에 발생한 악성 고립성 섬유성 종양을 치험하였기에 문헌 고찰과 함께 보고한다.
New Zealand 남섬의 Canterbury 지방과 Nelson 지방의 붕소(硼素) 결핍지역(缺乏地域)과 붕소(硼素) 시비지역(施肥地域)에 생육(生育)하고 있는 라디아타소나무의 해부학적(解剖學的) 차이(差異)를 조사(調査)하였다. 즉 가도관(假導官)의 길이, 방사방향(放射方向)의 가도관(假導官) 내경(內徑), 방사방향(放射方向) 세포벽(細胞璧)의 두께를 조(早), 만재별(晩材別)로 측정(測定)하였고 광학현미경(光學顯微鏡) 및 전자현미경(電子顯微鐘) 특성(特性)을 관찰(觀察) 하였다. 만재(晩材)에서는 가도관(假導官)의 길이에 붕소(硼素) 결핍지역(缺乏地域) 간(間)에 유의차(有意差)가 인정(認定)되었으나, 조재(早材)에서의 가도관(假導官)의 길이 및 가도관(假導官)의 내경(內徑) 및 가도관벽(假導官璧)의 두께는 조(早), 만재(晩材) 모두에서 유의차(有意差)가 인정(認定)되지 않았다. 그러나 붕소(硼素) 결핍지역(缺乏地域)에서 생육(生育)된 리디아타소마누에서는 세포벽(細胞璧)의 박리현상(剝離現象) 및 목질화(木質化)가 덜된 부분(部分)에 많이 관찰(觀察)되었고, 찌그러진 세포(細胞)의 다수출현(多數出現) 및 세포(細胞)의 크기가 불균일(不均一)한 것이 많이 출현(出現)되었으며 세포벽(細胞璧)의 간층(間層)이 넓었음이 관찰(觀察)되었다.
Kim Jae-Hyun;Oh Sam-Sae;Lee Chang-Ha;Baek Man-Jong;Hwang Seong-Wook;Lee Cheul;Lim Hong-Gook;Na Chan-Young
Journal of Chest Surgery
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v.39
no.4
s.261
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pp.289-297
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2006
Background: Surgery for Stanford type A aortic dissection shows a high operative mortality rate and frequent postoperative brain injury. This study was designed to find out the risk factors leading to operative mortality and brain injury after surgical repair in patients with type A aortic dissection. Material and Method: One hundred and eleven patients with type A aortic dissection who underwent surgical repair between February, 1995 and January 2005 were reviewed retrospectively. There were 99 acute dissections and 12 chronic dissections. Univariate and multivariate analysis were performed to identify risk factors of operative mortality and brain injury. Resuit: Hospital mortality occurred in 6 patients (5.4%). Permanent neurologic deficit occurred in 8 patients (7.2%) and transient neurologic deficit in 4 (3.6%). Overall 1, 5, 7 year survival rate was 94.4, 86.3, and 81.5%, respectively. Univariate analysis revealed 4 risk factors to be statistically significant as predictors of mortality: previous chronic type III dissection, emergency operation, intimal tear in aortic arch, and deep hypothemic circulatory arrest (DHCA) for more than 45 minutes. Multivariate analysis revealed previous chronic type III aortic dissection (odds ratio (OR) 52.2), and DHCA for more than 45 minutes (OR 12.0) as risk factors of operative mortality. Pathological obesity (OR 12.9) and total arch replacement (OR 8.5) were statistically significant risk factors of brain injury in multivariate analysis. Conclusion: The result of surgical repair for Stanford type A aortic dissection was good when we took into account the mortality rate, the incidence of neurologic injury, and the long-term survival rate. Surgery of type A aortic dissection in patients with a history of chronic type III dissection may increase the risk of operative mortality. Special care should be taken and efforts to reduce the hypothermic circulatory arrest time should alway: be kept in mind. Surgeons who are planning to operate on patients with pathological obesity, or total arch replacement should be seriously consider for there is a higher risk of brain injury.
This study was undertaken to study the changes of epithelium of oral mucosa caused by diabetic disease in terms of keratinization and morphology of epithelial cells of oral mucasa, and to diagnose the oral diseases caused by systemic origns in terms of oral exfoliative cytology as a diagnostic tool. The author has studied the changes of epithelial cells on the cheek mucosa and upper antirior gingiva of 20 adult diabetic patients by Oral Exfoliative Cytology. And 50 healthy adults were selected as control group. The cytologic smears were stained by Papanicolaou method. The results were as follows : 1. In diabetic patient's cheek mucosa, Yellow staining cells were reveald as 11.8%, which was higher than the control group(4.2%). 2. In diabetic patients' upper anterior gingiva, Yellow staining cells were reaveale as 12.4%, which was lower than the control group(68.2%) 3. The changes of nucleus and cytoplasmic changes were not significantly different in diabetic patients and control group.
The morphological effects of intranasal zinc sulfate(5% solution) irrigation on the mouse olfactory epithelium and the regeneration process of olfactory receptor cells following nasal irrigation were studied with scanning and transmission electron microscope. The results were as follows: 1. The septal epithelium except some basal cells was wholly detached from the basement membrane, during the first 6 to 24 hours after 5% zinc sulfate irrigation. 2. 3 days after $ZnSO_4$ treatment, two layered septal epithelium was formed from basal cells. And microvilli were observed in the apical epithelium of newly formed olfactory epithelial cells. 3. 5 days after treatment, a lot of centrosomes and basal bodies were observed in the olfactory receptor cells, and cilia were lined up between microvilli on the apical membrane of olfactory receptor cells. And immature olfactory knob was first observed in the newly formed olfactory receptor cells. Mature olfactory knob was observed 1 week after treatment. 4. There are very many mature olfactory knobs in the olfactory receptor cells 2 weeks after intranasal zinc sulfate irrigation. These results support that treatment with 5% zinc sulfate is a good experimental model for the regeneration of mammalian nervous tissues because this method could thoroughly detach the septal epithelium. During the regeneration of olfactory receptor cells, the surface membrane of the olfactory receptor cells widen the surface with the microvilli. Then cilia, which arranged in a line, substituted for the microvilli. The part of the surface membrane with cilia protruded and finally formed the olfactory vesicle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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