• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• v.31 no.3
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• pp.169-176
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• 2004

Objective: This study was performed to evaluate and compare the embryonic developmental capacity and pregnancy rates in conventional in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) with ejaculated sperm or testicular sperm cycles. Materials and Methods: Fertilization was examined in the following morning after IVF (group I), ICSI (group II) or TESE-ICSI cycles (group III). Fertilized oocytes were co-cultured with Vero cells until embryo transfer (ET). On day 2 and $5{\sim}7$, grades of embryos (<4- or $\geq$4-cell) and blastocysts (BG1, 2, 3 or early) were evaluated. Clinical pregnancy rate was determined by detecting G-sac with transvaginal ultrasonogram. We analyzed the results by $X^2$ and Student's t-test and considered statistically significant when P value was less than 0.05. Results: Fertilization rate was significantly higher (p<0.05) in group I ($79.0{\pm}21.2%$) than in group II and III ($56.8{\pm}21.6%$ and $36.7{\pm}25.3%$). Cleavage and blastulation rate of group I ($95.8{\pm}13.8%$ and $59.5{\pm}25.3%$) were significantly higher (p<0.05) than those of group III ($83.4{\pm}18.6%$ and $40.4{\pm}36.5%$). Clinical pregnancy rate was significantly higher (p<0.05) in group I and II (40.7% and 41.7%) than that in group III (12.5%). No differences were found in the rates of multiple pregnancy and abortion among three groups. Embryonic implantation rate was higher in group I ($15.1{\pm}20.2%$, p<0.05) and II ($14.7{\pm}20.6%$, NS) than that in group III ($5.1{\pm}15.6%$). However, embryonic implantation rate was increased in ET with blastocyst(s) among three groups. Conclusions: Fertilized oocytes obtained from TESE-ICSI were harder to be successfully cultured to blastocyst stage for 5$\sim$7 days than that from IVF cycles. However, all blastocyst(s) ET increased the embryonic implantation rate equally in IVF, ICSI and TESE-ICSI cycles.

• Proceedings of the Korean Society for Agricultural Machinery Conference
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• 2002.02a
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• pp.438-443
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• 2002

본 연구는 수도작에서 토양과 식물체의 분광반사특성과 영상처리를 이용한 기계시각 잡초검출 센서를 개발하기 위한 기초연구로서 분류하고자 하는 대상체들의 분광반사율을 조사하여 주요한 파장을 선정하고 선정된 파장을 이용한 판별분석을 통해 각 대상체에 대한 분류 정확도를 중심으로 잡초검출 가능성을 조사하기 위하여 수행하였으며, 실험으로부터 얻은 결론은 다음과 같다. 1. 토양과 식물체를 구분하는데 효과적인 파장은 마른 토양의 경우 680 nm, 배수 토양에 있어서는 810 nm로 선정하였고, 토양을 배제한 후 벼와 잡초를 구분하기에 효과적인 파장은 580, 680 nm로 선정하였다. 2. 토양과 식물체를 구분하기 위한 판별분석 결과 2가지 토양상태 모두 식물체와 완전히 구분 가능한 것으로 나타났다. 벼와 잡초를 구분하기 위한 실험에서, 벼는 98%의 분류정확도로 구분이 가능하였고, 잡초는 83%의 분류정확도로 구분이 되는 것으로 나타났다. 따라서 차후 분광학적 원리를 이용한 센서를 제작할 때 본 연구에서 선택한 주요 파장과 판별함수를 이용하여 장치를 구성하고 알고리즘을 제작한다면 벼, 잡초, 토양을 효과적으로 구분이 가능할 것으로 판단되었다. 3. 컬러 CCD 카메라를 사용하는 경우에 있어 식물체와 토양을 구분하기 위해 3 종의 파장 중 630 nm 파장만의 이용을 고려하여 그 분류성능을 분석한 결과, 식물체와 토양은 소수의 관측치를 제외하고 완전히 구분이 가능했고, 벼와 잡초를 구분한 결과에서는 비교적 높은 분류능력을 가진 것으로 나타나 차후 컬러 CCD 카메라를 이용하여 장치를 구성하는데 좋은 기초가 될 것으로 판단된다. 배양체의 접종작업은 모든 배양실이 인력에 의존하였으며, 배양체를 배지와 분리하여 불필요한 부분을 제거하고 배양작물에 따라 생육정도를 2~3등급으로 구분하여 배양용기의 배지 위에 치상하는 과정으로 수행되었으며, 작업능률은 호접란의 경우 배양병에 25본을 접종하는데 시간당 6병, 심비디움은 원형 플라스크에 25본을 접종하는데 시간당 10병 정도였다. 바. 식물체의 대량증식에 사용되는 플라스크, 배양병, PE용기 등 배양용기의 세척작업은 농원의 1개배양실에서 간이식 세척기, 이 외의 9개배양실은 모두 물에 담겨 두었다가 세제와 브러쉬 등을 사용하여 인력으로 세척하고 있어 생력화 기술개발이 요구되었다.도가 빠를수록 건조속도가 빨라졌으며, 건조에너지도 1,334kcal/kg.water로 비슷하게 소요되었다. 마. 시험구와 대비구의 건감률은 시험구에서 1.08~1.36w.b./h로 나타나 대비구보다 약 9.9~18.3%가 높게 나타났고, 건조에너지는 10.2~14.6%가 절감되었다. 발아율은 열풍온도가 낮을수록 높게 나타났고 시험구가 대비구보다 발아율이 낮게 나타났으며, 동할률 증가량도 원적외선.열풍 복합건조방법이 높게 나타나 이것은 곡물 표면에 원적외선 방사에의한 복사열이 전달되어 열장해를 받았기 때문으로 판단되며, 금후 더 연구하여 적정 열풍온도 및 방사체 크기를 구명해야 할 것이다.으로 보여진다 따라서 옻나무 유래 F는 포유동물의 생식기능에 중요하게 작용하는 것으로 사료된다.된다.정량 분석한 결과이다. 시편의 조성은 33.6 at% U, 66.4 at% O의 결과를 얻었다. 산화물 핵연료의 표면 관찰 및 정량 분석 시험시 시편 표면을

• Proceedings of the Korean Society for Agricultural Machinery Conference
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• 2002.02a
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• pp.282-288
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• 2002

본 연구는 상업용 규모의 쇄미선별공정에 사용할 수 있는 파이로트 규모 원통형 홈 선별기 시작기의 설계 및 제작에 필요한 기초 연구로서, 실험실용 원통형 홈 선별기를 이용하여 쇄미선별 실험을 실시하였다. 원통 회전속도, trough각도, indent 크기와 형상, 공급량을 요인으로 하여 완전립의 수거율과 순도, 쇄립의 수거율과 순도 및 선별효율을 조사하였다. 수행한 연구결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 선별효율에 대한 원통 회전속도와 trough각도의 단독효과 및 교호작용은 1% 수준에서 유의성이 인정되었다. 원통 회전속도가 커지면trough각도 역시 그에 따라 적절히 증가시켜야만 선별효율의 저하가 방지되는 것으로 나타났다. 2. 최고 선별효율 값은 홈의 모양과 크기, 그리고 공급량에 관계없이 낮은 회전속도 (17rpm)와 중간 trough각도 (37.5$^{\circ}$또는 60$^{\circ}$)가 조합된 처리에서 나타났으며, 60~70% 범위의 높은 값을 보였다. 선별효율에 관한 원통 회전속도와 trough각도의 최적 조합은 17rpm, 37.5$^{\circ}$라고 판단된다. 3. 말발굽형 홈과 반구형 홈 간 선별효율의 차이는 없었다. 따라서, 실제 상업용 규모의 원통형 홈 쇄미선별기 개발에 있어서는 제작이 쉽고 유지.보수가 간편한 반구형 홈을 채택하는 것이 바람직할 것으로 생각된다. 길이 2.5mm이하의 미립인 쇄미의 선별에 사용할 홈의 크기는 2.5mm 보다는 약간 큰 3.0mm 정도가 되어야만 할 것으로 판단된다. 4. 공급량에 따른 선별효율의 차이는 1% 수준에서 유의성이 인정되었으며, 공급량이 작았을 때 전반적으로 선별효율이 높았다.타리 시프터를 채택, 사용하고 있었으며, 로타리시프터 사용상의 문제는 회전몸체를 지지하는 rod spring의 파손 등 구조와 관련된 것이었다. 로타리 시프터에 의한 쇄립의 선별과 제거정도는 만족할 만한 수준은 아니었다. 4. 국내 유통백미 완전립의 길이, 폭, 두께는 각각 5.02mm, 2.93mm, 2.03mm이었으며, 산물밀도와 천립중은 각각 745.3kg/m3 및 20.46g이었다. 5. RPC 백미제품의 품질경쟁력 향상을 유도하고자 현행 쇄미의 정의와 기준을 보다 강화하여 다음과 같은 쇄미 기준과 계급을 설정, 제시하였다. "완전립" - 길이가 3.75mm이상인 미립 "준완전립" - 길이가 2.5∼3.75mm인 미립 "쇄미" - 길이가 1.75∼2.5 mm인 미립 "이물" - 길이가 1.75mm이하인 미립.볼 때 상토 종자혼합비 6 : 1, 성형롤 회전속도 약 7 rpm으로 판단되며, 이 때 제조능력은 시간당 약 65 Kg(펠렛종자 약 39,000 개), 성형률 약 87 %, 종자손실률은 약 30 %, 펠렛종자 내 평균 종자수는 약 5.5 개, 완전 벼 종자 3개 이상 포함 펠렛종자 비율은 약 100 %가 될 것으로 보인다. 세포의 Androgen 생성을 촉진시키는 역할이 있는 것으로 보여진다 따라서 옻나무 유래 F는 포유동물의 생식기능에 중요하게 작용하는 것으로 사료된다.된다.정량 분석한 결과이다. 시편의 조성은 33.6 at% U, 66.4 at% O의 결과를 얻었다. 산화물 핵연료의 표면 관찰 및 정량 분석 시험시 시편 표면을 전도성 물질로 증착시키지 않고, Silver Paint 에 시편을 접착하는 방법으로도 만족한 시험 결과를 얻을 수 있었다.째, 회복기 중에 일어나는 입자들의 유입은 자기폭풍의 지속시간

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• v.24 no.2
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• pp.241-251
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• 1997

체외성숙과 수정된 돼지 난자의 체외발달능이 체외배발생 배양액인 NCSU 배양액에 0.4% BSA, 10% 혈청 혹은 아미노산 (2% BME 아미노산 용액과 1% MEM 아미노산 용액)을 첨가함으로서 조사되었다. 본 실험에 공시된 난자는 체외수정 추 30시간 (2-세포기)혹은 48 시간 ($2{\sim}4$-세포기)에 회수하였다. 실험I에서 0.4% BSA가 첨가된 NCSU 배양액에서 2-세포기 난자들의 배양경과시간에 따른 발달능을 조사한 결과, 배양 후 72 시간 (체외수정 후 102 시간)에 상실배기와 배반포기 배가 나타났으며, 배양 후 120 시간째 (체외수정 후 150 시간)에도 팽창된 배반포기 배까지만 발달하였다. 실험II는 체외수정 후 48 시간의 분할된 ($2{\sim}8$-세포기) 난자들의 핵과 외관적 분할구와의 수적 차이를 조사한 결과, $2{\sim}4$-세포기보다는 5-세포기 이상에서 핵과 분할구의 조화에 차이가 많았다. 실험III에서는 $2{\sim}4$-세포기 난자들을 배양후 5일째의 배반포들의 투명대의 두께, 난자 크기 그리고 inner cell mass (ICM)과 trophectoderm (TE)의 세포 배열을 조사한 결과, 난자의 크기가 커짐에 따라서 투명대가 얇아지고 전체 세포수가 증가하였지만, ICM의 비율은 차이가 없었다. 실험IV에서는 BSA, 혈청 혹은 아미노산이 첨가 혹은 무첨가된 배양액내에서 $2{\sim}4$-세포기 난자들의 배반포 후 부화능력을 조사한 결과, 모든 군에 있는 난자들은 팽창된 배반포기 배까지 발달할 수 있었던 반면, 난자의 부화는 아미노산 혹은 혈청이 포함된 배양액에서만 일어났다. 더우기 상실배기와 배반포기 시기에 혈청의 첨가는 부화 배반포기 배의 발달을 현저히 증가시켰다. 또한 아미노산과 혈청의 영향을 받은 팽창 배반포기 배는 얇은 투명대, 팽창된 난자의 크기 그리고 ICM과 전체 세포수의 증가를 보였다. 이상의 결과로 미루어 볼때, 배양액내에 대한 아미노산과 혈청의 첨가는 돼지 배반포기 배의 부화를 유도할 수 있다고 보며, 더우기 이들 요소들은 투명대의 두께, 난자의 크기 그리고 ICM과 전체 세포수에 영향을 미친다.

• Journal of Marine Life Science
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• v.6 no.2
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• pp.73-79
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• 2021

Bisphenol A is a representative endocrine disruptor and continuously detected in aquatic environment due to wide use, resulting in adverse effects on growth, development, and reproduction in diverse organisms as well as human. Structural analogs have been developed to substitute BPA are also suspected to have endocrine disrupting effects. In the present study, the time-dependent expression patterns of ecdysteroid synthesis (nvd, cyp314a1), receptors (EcRA, EcRB, USP, ERR), and downstream signaling pathway - related genes (HR3, E75, Vtg, VtgR) were investigated using quantitative real time reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) in the brackish water flea Diaphanosoma celebensis exposed to Bisphenol analogs (BPs; BPA, BPF, and BPS) for 6, 12, and 24 h. As results, the expression of nvd, cyp314a1, EcRs, USP, ERR and E75 mRNA was upregulated at 6 h exposure to BPF, which is earlier than BPA and BPS (12 h). On the other hand, HR3, E75 and VtgR mRNA levels were elevated at 6 h earlier at BPS and BPF than at BPA (12 h), but Vtg mRNA level was slightly changed within 24 h. These findings suggest that like BPA, BPF and BPS can also modulate the transcription of ecdysteroid pathway - related genes with different mechanisms, and have a potential as endocrine disruptors. This study will provide a better understanding the molecular mode of action of bisphenols on ecdysteroid pathway in the brackish water flea.

• Korean journal of applied entomology
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• v.61 no.3
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• pp.435-447
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• 2022

The soybean podborer, Matsumuraeses falcana (Lepidoptera: Tortricidae), is one of important pests in soybean crop. In the purpose of forecasting population dynamics of M. falcana, we investigated the effects of temperature on development of each life stage, adult longevity and fecundity of Matsumuraeses falcana at seven constant temperatures of 10, 13, 19, 22, 25, 28, and 31℃. Eggs hatched successfully at all temperature subjected. M. falcana developed from egg hatching to adult emergence at the tested temperatures except 10, 13, and 31℃. The developmental period of each life stage and adult longevity of M. falcana decreased as temperature increased. The lower developmental threshold (LDT) and thermal constant (K) from egg hatching to adult emergence of M. falcana were estimated by linear regression as 10.2℃ and 492.04DD, respectively. Lower and higher threshold temperature (TL and TH) were calculated by the Lobry-Rosso-Flandrois (LRF) and Sharpe-Schoolfield-Ikemoto (SSI) models. TL and TH from egg hatching to adult emergence using SSI model were 16.7℃ and 29.1℃. Thermal windows, i.e., the range in temperature between the minimum and maximum rate of development, of M. falcana was 12.4℃. We constructed the adult oviposition model of M. falcana using adult survivorship and fecundity. Temperature-dependent immature development and adult oviposition models will help constructing the population model of M. falcana and developing the strategies of integrated pest management in soybean fields.

• Korean journal of applied entomology
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• v.61 no.3
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• pp.461-473
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• 2022

Matsumuraeses phaseoli is one of important pests in soybean crops, especially adzuki beans. We investigated the effects of temperature on development of each life stage, adult longevity and fecundity of M. phaseoli for understanding the biological characteristics of M. phaseoli at ten constant temperatures of 7, 10, 13, 16, 19, 22, 25, 28, 31, and 34℃. Eggs hatched successfully at all temperature subjected except 7℃ and 34℃. The developmental period of each life stage and adult longevity of M. phaseoli decreased as temperature increased. Lower and higher threshold temperature (TL and TH) were calculated by the Lobry-Rosso-Flandrois (LRF) and Sharpe-Schoolfield-Ikemoto (SSI) models. The lower developmental threshold (LDT) and thermal constant (K) from egg hatching to adult emergence of M. phaseoli were estimated by linear regression as 9.04℃ and 422.97DD, respectively. TL and TH from egg hatching to adult emergence using SSI model were 20.0℃ and 32.3℃. Thermal windows, i.e., the range in temperature between the minimum and maximum rate of development, of M. phaseoli was 12.3℃. We constructed the adult oviposition model of M. phaseoli using adult survivorship and fecundity. Temperature-dependent development models and adult oviposition models will be helpful to understand the population dynamics of M. falcana and to establish the strategy of integrated pest management in soybean fields.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.25 no.4
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• pp.305-315
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• 2001

In this study, the production of transgenic embryo was attempted by microinjection or round spermatid cultured with foreign DNA. At first, the expression of haploid spermatids specific gene, mTP1 in mouse and hPrm2 in hamster spermatids were investigated by RT-PCR method in testes of young mice and hamster testis. The specific gene expression first appeared at 18 days post partum (dpp) in mice spermatid and 20 dpp in hamster spermatid. Therefore, the round spermatids isolated from 17 dpp mice and 19 dpp hamster were used for the introduction of foreign EGFP gene into haploid round spermatids. For the introduction of EGFP gene haploid round spermatids suspended in medium including EGFP gene were treated with a different electric field strength at 0.11, 0.18 and 0.44 ㎸/cm. After electrical stimulation, viability of testicular sperm cells and 67.6%, 66.4% and 49.9%, in mice and 62.6%, 57.9% and 27% in hamster, respectively. These values were significantly lower than those of non-treated control groups 80.5% in mouse and 69.1% in hamster After 72 hrs culture, the highest expression rate of EGFP gene, 28.5% in mice and 32.1% in hamster were obtained from tile spermatogenic cells electroporated by the field strength or 0.18 ㎸/cm. Then, the ability of fertilization and embryonic development of haploid spermatids transfected with foreign EGFP gene were estimated by the microinjection of spermatids into hamster oocytes. The Irate pronuclear formation rate (77.5%) was lower than non-treated control (80%), and the cleavage rate of the treated group (58.8%) was lower than control (65%). To prove the foreign EGFP integration in hamster embryos, 2-cell stage hamster embryos were subjected to the observation under the fluorescence microscope, and the PCR analysis. As a result, about 44% of 2-cell embryos were showed the integration of EFGP gene into their genome. Therefore, These results suggest the possibility to produce transgenic hamsters by microinjection of haploid spermatid transfected with foreign DNA.

• Development and Reproduction
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• v.12 no.3
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• pp.221-229
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• 2008

For the clinical application, it is needed to keep characteristics of stem cells after storage for a long time. In the present study, we examined stem cell properties of human cord-derived stem cells (HUC) after cryopreservation. Cells were isolated from human umbilical cord and cultured in vitro. At passage 2 or 3, HUC were suspended at a concentration of $1.0{\times}10^6/m{\ell}$ in cryomedium consisting of DMSO and FBS. After freezing at $-80^{\circ}C$ overnight, HUC were cryopreserved at $-196^{\circ}C$ nitrogen gas. After 6 months, HUC were thawed and cultured in vitro. Assessment for the stem cell properties was made upon the morphology, population doubling time, and expression profiles of genes and various proteins. Cryopreserved HUC showed more than 70% viability and maintained fibroblast-like morphology similar to HUC before cryopreservation. Throughout the culture, they underwent average 42.8 doublings and produced $6.75{\times}{10^{18}}$ cells. RT-PCR analyses showed that cryopreserved HUC expressed Oct-4, nanog, SCF, NCAM, nestin, GATA-4, BMP4, and HLA-1 genes. They did not express Brachyury and HLA-DR genes. Immunocytochemical studies showed that cryopreserved HUC reacted with antibodies against SSEA-3, -4, Thy-1, vimentin, fibronectin, HCAM, ICAM, HLA-1 proteins. They did not react with antibody against HLA-DR protein. Theses genes and proteins expression patterns of cryopresserved HUC were similar to those of HUC before cryopreservation. These results suggest that cryopreserved HUC could retain proliferative potential and they expressed various genes and proteins similar to HUC before cryopreservation. Thus, cryopreservation might be useful for HUC for future research and clinical application.

• Development and Reproduction
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• v.14 no.2
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• pp.65-74
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• 2010

Placenta has been shown to be a site of expression of several of the monoamine membrane uptake transporters. However, the correlation between the expressions of norepinephrine transporter (NET) and placental development including gynecological diseases is still unknown. To investigate the expression and functions of NET in placenta, we conducted to compare NET expression in normal and preeclamptic placenta and analyzed the function of NET in HTR8-SV/neo trophoblast cells after NET gene transfection. The expression of NET was analyzed in placental tissues from the following groups of patients (none underwent labor): 1) term normal placenta (n=15); 2) term with preeclamptic placeneta (n=15); and 3) pre-term with preeclamptic placenta (n=11) using semi-quantitative RT-PCR, immunohistochemistry, and Western blot. In order to evaluate the function of NET, NET gene plasmid and NET gene-specific siRNA were trnasfected into HTR-8/SVneo trophoblast cells for 24 hours. NET had low expression in the pre-eclamptic placenta compare with normal placenta but no difference in western blot data. NET was expressed in the trophoblasts, and the up-regulation of NET gene stimulated the invasion of HTR-8/SVneo trophoblast cells by 2.5 fold (p<0.05), whereas the NET-siRNA treatment reduced invasion rates. Also, we observed that the expression of NET induces to expression and activity of MMP-9 in HTR-8/SVneo trophoblast cells in zymography. The results suggest that the expression of NET were reduced in pre-eclampsia and should be inhibited invasion activity of trophoblasts. Therefore, these findings provide useful guidelines for the mechanisms of trophoblast invasion as well as for the basic understanding of gynecological diseases including pre-eclampsia.