Representative cDNA libraries were constructed from various tissue sources of Hemibarbus mylodon, an endangered freshwater fish species in Korea, for the mining of expressed sequence tags (ESTs). Randomized and non-normalized EST analysis was performed with 7 unidirectional cDNA libraries generated from brain, intestine, kidney, liver, muscle, ovary or testis. Of 3,383 ESTs in total, the number of singleton was 2,029, and 333 contigs containing 1,354 ESTs were assembled (percent of unigene = 70.0%). Abundantly expressed gene transcripts and broad clustering of putative gene function were tissue-specific in general, and the redundancy was also variable among those libraries. Over half of H. mylodon ESTs were matched with orthologues from other teleosts among which zebrafish gene sequences were the most frequent in those matches. This initial setting of EST libraries achieved in the present study would be a fundamental basis for the banking of gene resources from this endangered fish species.
In the 5'-flanking region of the D-AAT, AspAT and AlaDH gene, I found three or two pairs of sequences(designated as Pl, P2, P3) which show significant similarity to the E.coli consensus sequences of -35 and -10 for promoters. The spacing between -35 and -10 is 16 to 18bp in all the three putative promoters Pl, P2 and P3 which is in good agreement with the preferred spacer length in E.coli and in B.subtilis. Therefore, the putative promoters may also function to increase the efficiency of transcriptional initiation. The most stable, double-helical“Shine-Dalgarno”pairing is formed with a free energy change(ΔG) of -13.0 kcal/mol, -9.6 kcal/mol, -15.8 kcal/mol.
Park, Hyun;Park, Won-Chull;Yoon, Kab-Hee;Chang, Ji-Youn;Ryu, Sung-Ryul;Ka, Kang-Hyeon;Lee, Bong-Hun
The Korean Journal of Mycology
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v.35
no.1
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pp.28-32
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2007
Fruiting bodies of Inonotus obliquus were collected from the trunk of Betula ermani at 1,100 m of Mt. Odae. Diameter range of the trees at breast height (DBH) was $10{\sim}50$ cm and size range of the sclerotia was $8{\times}5{\sim}20{\times}16cm$. Relationships between the examined strains and Inonotus obliquus strain registered in National Center for Biotechnology Information (NCBI) were very near. And all of 10 strains except strains registered in NCBI showed high homologous characteristics by neighbour joining analysis of ITS sequence. Mycelial growth showed a big difference among strains. Mycelial growth of KFRI 744 was fastest and KFRI 739 was slowest. Difference of mycelial growth between KFRI 735 and 738 was slight, but the difference of mycelial growth between KFRI 744 and 739 was almost twice. Also weight reduction rate among strains showed some difference. KFRI 744 was highest and KFRI 741 was lowest. Vegetative incompatibilities were observed in all mycelial pairings except for KFRI 740-741 and KFRI 742-743 combinations.
Somatic chromosome counts and karyotype analyses were carried out for eight taxa of Korean Allium sect. Sacculiferum. The basic chromosome number of sect. Sacculiferum was x = 8, and they could be cytologically divided into two groups, that is, a diploid group (2n = 2x = 16) containing A. thunbergii var. thunbergii, A. thunbergii var. deltoides, A. thunbergii var. teretifistulosum, A. deltoidefistulosum, A. longistylum, A. linearifolium and A. taqueti, and a tetraploid group (2n = 4x = 32) with only A. sacculiferum. All observed chromosomes were classified into metacentric, submetacentric and subtelocentric. The metacentric ones appeared in all treated taxa. One or two pairs of submetacentric chromosomes were observed in most taxa except A. sacculiferum, the unique taxon with subtelocentric chromosomes. All taxa had a pair of homologous chromosomes with satellites, and the B-chromosomes found in A. thunbergii var. thunbergii, A. deltoidefistulosum, A. sacculiferum and A. longistylum, were metacentric or telocentric. The karyotypes of A. longistylum and A. linearifolium were firstly investigated in this study. In conclusion, the somatic chromosome numbers and karyotypes for members of the sect. Sacculiferum were valuable characters in identifying taxa, investigating interspecific relationships and delimiting taxa. In addition, A. thunbergii var. teretifolium, an invalid name (homonym), was renamed as A. thunbergii var. teretifistulosum H. J. Choi & B. U. Oh.
The objectives of this study were to isolate and the sequence of novel $F3'H$ gene related to an anthocyanin pathway, and to confirm the expression patterns of the gene involved in the flower color variations of chrysanthemum mutants. In this study, we isolated the full-length cDNAs and the genomic DNAs of an $F3'H$ gene from a wild type (WT) chrysanthemum (cv. Argus) and its three color mutants. The sequence analysis revealed a putative open reading frame of 1,527 bp that encodes a polypeptide of 509 amino acids. Sequence homology ranged from 97% to 99% between 'Argus' and its three color mutants. The sequence analysis from the genomic DNA revealed that the chrysanthemum $DgF3'H$ gene consisted of three exons and two introns spanning a 3,830 bp length. The sizes of the gene for three mutants ranged from a shorter size of 3,828 bp to a longer size of 3,838 bp when compared to the size of WT. The total size of the two introns was 2,157 bp for WT, but those for three color mutants ranged from 2,154 bp to 2,159 bp. A result of an RT-PCR analysis indicated that the color variations of the mutants AM1 and AM2 can be partly explained by the structural modification derived from the sequencial changes in the gene caused by gamma ray. A Southern blot analysis revealed that the $DgF3'H$ gene existing as multiple copies in the chrysanthemum genome. A systemic study will be further needed to provide a genetic mechanism responsible for the color mutation and to uncover any involvement of genetic elements for the expression of the $DgF3'H$ gene for the color variation in chrysanthemum.
In the course of screening for antifungal agents, a bacterial strain, DM3 was isolated from a mud sample collected at Daechon in Chungnam province and identified as Bacillus licheniformis based on API 50CHB test. It has antifungal activity against 12 plant pathogenic fungi in paper disc assay. At the 95% lethal dose of gamma radiation ($^{60}Co$, 10 kGy, $D_{10}=2.32\;kGy$), the antifungal activity deficient mutant (mDM3) against Colletotrichum gloeosporioides was induced From 2-D electrophoresis analysis, serine hydroxymethyltransferase (45.0 kDa), hypothetical protein(40.7 kDa), NifU protein homolog(15.4 kDa), and resolvase(12.5 kDa) homologous proteins were detected only in B. licheniformis DM3. Lysozyme(18.1 kDa) and alkyl hydroperoxide reductase(15.6 kDa) homologous proteins were expressed uniquely in B. licheniformis mDM3. Further studies are needed to reveal that these proteins from B. licheniformis DM3 could be closely related to the antifungal activity against plant pathogenic fungi.
To clarify the roles of bromelain in plants, we isolated BL1 gene encoding bromelain from pineapple stem tissues and sequenced. The full length cDNA is 933 bp and encodes a polypeptide of 311 amino acid residues. The cDNA is most similar 94% at the amino acid level to bromelain previously isolated from pineapple (BAA21929). Explants of Lactuca sativa were co-cultivated with Agrobacterium tume-faciences LBA 4404 strains containing nptII and BL1 gene for transformation. Through initial selection of regenerated explants by culturing on a kanamycin and carbenicillin containing MS medium, multiple shoots were obtained after 2 months of culture. For a complementary step of selection, putative transgenic shoots were transferred to 1/2 Ms basal medium supplemented with 100 mg/L kanamycin and 500 mg/L carbenicillin. The selected shoots were obtained T1 generation seeds with emasculation, and tested with PCR analysis using 35S promoter and BL1 specific primers whether BL1 gene was introduced to genome of the plants. These results confirmed that produced the specific PCR bands in the putative transgenic lines. Additionally the Northern blot and endo protease activity showed that transcripts of BL1 gene were detected in transgenic lines. Theses results suggest that BL1 gene be successfully integrated and transcripted in the transgenic lettuce plants.
In order to standardize the manufacturing processes of Hahyangju, a traditional Korean liquor, 29 yeast strains were isolated from traditional Nuruk. Strain N8 exhibited a particularly strong resistance to sugar. Strains HA2, HA3 and HA4 grew successfully in medium containing 10% ethanol. In comparison with the growth exhibited by these strains when grown in a yeast malt extract medium, the ethanol production rates for the three strains were 10.8%, 10.45%, and 10%, respectively in a yeast malt extract medium containing 25% glucose. Based on these results, HA3 was the strain selected for use in the manufacturing processes of Hahyangju and it was identified as a Saccharomyces cerevisiae strain with 97% ITS sequence similarity. The use of Saccharomyces cerevisiae HA3 causcd a decrease in the lactic acid content, acidity and growth of lactic acid bacteria in the fermentation mash. Following thc addition of Saccharomyces cerevisiae HA3 to the manufacturing process of Hahyangju, the second fermentation mash showed a 22% increase in the alcohol production rate associated with traditional fermentation; however, the amino acidity, pH and reducing sugar content showed little change. Sensory evaluation of Hahyangju fermented with S. cerevisiae HA3 also showed better scores than Hahyangju mashed by the traditional method.
Staphylococcus aureus is a major human pathogen that produces a wide array of toxins, leading to a number of adverse symptoms. We examined 275 strains of Staphylococcus aureus isolated from various foods between 2006 and 2008 for antimicrobial susceptibility. At least 259 (94.2%) of the tested strains showed antibiotic resistant properties, and 106 (40.7%) of them showed multiple antibiotic resistance. Eleven of the tested strains were resistant to oxacillin and mec A-positive. Moreover, oxacillin-resistant strains were significantly more likely to be multi-drug resistant (p < 0.01). Of the 275 isolates tested, 24.4% were noted as being positive for slime production and 30.5% were positive for biofilm assay. Antibiotic resistance was not associated with a significantly higher prevalence of biofilm formation. Twenty strains were classified using the DiversiLab system. Most of the strains could be classified into 2 clusters and 4 unique types. All 10 mec A-positive strains (cluster I) were grouped together into the same sub-cluster. Cluster II (6 strains) was not found to be resistant to oxacillin in this study. Although the prevalence of methicillin-resistant S. aureus in food is currently low, the risk of its transmission through the food chain cannot be disregarded.
Full length complementary DNA encoding apolipoprotein A-I (apoA-I) was isolated and characterized in mud loach (Misgurnus mizolepis). Mud loach apoA-I cDNA encoding 24 bp of 5'-untranslated region (UTR), 762 bp of single open reading frame (ORF) consists of 254 amino acids and 293 bp of 3'-UTR excluding stop codon and poly (A+) tail. Two overlapping polyadenylation signals (AATAAAATAAA) was found 9 bp prior to the poly (A+) tail. Mud loach apoA-I represented considerable homology to those from other teleost species at amino acid level with conserving common features of vertebrate apoA-I. Molecular phylogenetic analysis inferred the phylogenetic hypothesis that was generally in accordance with the previous taxonomic relationship. Apolipoprotein A-I mRNA was detected in various tissues, but the mRNA levels were quite varied depending on tissues based on semi-quantitative RT-PCR. Liver and brain showed the significantly higher levels of apoA-I transcripts than other tissues. mRNA expression of apoA-I was quite low in very early stage of embryonic development, however dramatically enhanced from 8 hours post fertilization. This increased mRNA level was retained consistently up to 14 days post hatching.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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