Park, Ju Ha;Guo, Lu;Kang, He Mi;Son, Beung Gu;Kang, Jum Soon;Lee, Yong Jae;Park, Young Hoon;Je, Byoung Il;Choi, Young Whan
Journal of Life Science
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v.31
no.2
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pp.209-218
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2021
This study aimed to evaluate the anti-obesity effects of Cudrania tricuspidata leaf extract in the order of leaf development on the shoot (L0, L1, L2, L3, L4, and L5). The leaves at the apex of a Cudrania tricuspidata shoot were classified as L0; the next leaves of the apex were classified as L1, L2, L3, and L4 from highest to lowest; and the lowest leaf was classified as L5. A series of 70% ethyl alcohol leaf extracts were screened for the inhibitory effects of adipogenesis in 3T3-L1 preadipocytes. We found that the apical leaf extract of Cudrania tricuspidata (CTL0) was the most effective. Next, a study was conducted on the inhibitory action mechanism of CTL0. Treatment with CTL0 significantly suppressed the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes in a dose-dependent manner, as confirmed by the decrease in lipid droplet content observed with Oil Red O staining. Treatment with 12.5 ㎍/ml, 25 ㎍/ml, and 50 ㎍/ml of CTL0 significantly reduced the lipid droplet content. Glucose and cellular triglyceride concentrations were reduced in the 3T3-L1 cells on the CTL0-treated medium compared to the differentiation medium (DM control, DMEM + insulin + dexamethasone + rosiglitazone). Compared with DM, CTL0 significantly inhibited the expression of key pro-adipogenic transcription factors, including peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ), LPL, A-FABP, and Glut4. These findings show that CTL0 extract has potent anti-obesity effects.
Background : The NF-${\kappa}B$ transcription factors control various biological processes including the immune response, acute phase reaction and cell cycle regulation. NF-${\kappa}B$ complexes are retained in the cytoplasm in the basal state and various stimuli cause a translocation of the NF-${\kappa}B$ complexes into the nucleus where they bind to the ${\kappa}B$ elements and regulate the transcription of the target genes. Recent reports also suggest that NF-${\kappa}B$ proteins are involved in oncogenesis, tumor growth and metastasis. High expression of NF-${\kappa}B$ expression was reported in many cancer cell lines and tissues. The constitutive activation of NF-${\kappa}B$ was also reported in several cancer cell lines supporting its role in cancer development and survival. The anti-apoptotic action of NF-${\kappa}B$ is important for cancer survival. NF-${\kappa}B$ also controls the expression of several proteins that are important for cellular adhesion (ICAM-1, VCAM-1) suggesting a role in cancer metastasis. In lung cancer, high expression levels of the NF-${\kappa}B$ subunit p50 and c-Rel were reported. In fact, high expression does not mean a high activity, and the activation pattern of NF-${\kappa}B$ in lung cancer has not been reported. Materials and Methods : In this study, the NF-${\kappa}B$ nuclear binding activity in the basal and TNF-${\alpha}$ stimulated states were exmined in various lung cancer cell lines and compared with the normal bronchial epithelial cell line. Twelve lung cancer cell lines including the non-small cell and small cell lung cancer cell lines (A549, NCI-H358, NCI-H441, NCI-H552, NCI-H2009, NCI-H460, NCI-H1229, NCI-H1703, NCI-H157, NCI-H187, NCI-H417, NCI-H526) and BEAS-2B bronchial epithelial cell line were used. To evaluate the NF-${\kappa}B$ expression and DNA binding activity, western blot analysis and an electrophoretic mobility shift assay with the nuclear protein extracts. Results : The basal expressions of the p65 and p50 subunits were observed in the BEAS-2B cell line and all lung cancer cell lines except for NCI-H358 and NCI-H460. The expression levels of p65 and p50 were increased 30 minutes after stimulation with TNF-${\alpha}$ in BEAS-2B and in 10 lung cancer cell lines. In the NCI-H358 and NCI-H460 cell lines, p65 expression was not observed in the basal and stimulated states and the two p50 related protein levels were higher after stimulation with TNF-${\alpha}$ These new proteins were smaller than p50 and are thought to be variants of p50. In the basal state, NF-${\kappa}B$ was nearly activated in the BEAS-2B and all lung cancer cell lines. The DNA binding activity of the NF-${\kappa}B$ complexes was markedly higher after stimulation with TNF-${\alpha}$ In the BEAS-2B and all lung cancer cell line except for NCI-H358 and NCI-H460, the activated NF-${\kappa}B$ complex was a p65/p50 heterodimer. In the NCI-H358 and NCI-H460 lung cancer cell lines, the NF-${\kappa}B$ complex was variant of a p50/p50 homodimer. Conclusion : The NF-${\kappa}B$ activation pattern in the lung cancer cell lines and the normal bronchial epithelial cell lines was similar except for the activation of a variant of the p50/p50 homodimer in some lung cancer cell linse.
Background: Cellular remnants in the bioprosthetic heart valve are known to be related to a host's immunologic response and they can form the nidus for calcification. The extracellular matrix of the decellularized valve tissue can also be used as a biological scaffold for cell attachment, endothelialization and tissue reconstitution. Thus, decellularization is the most important part in making a bioprosthetic valve and biological caffold. Many protocols and agents have been suggested for decellularization, yet there ave been few reports about the effect of a treatment with hypotonic solution prior to chemical or enzymatic treatment. This study investigated the effect of a treatment with hypotonic solution and the appropriate environments such as temperature, the treatment duration and the concentration of sodium dodecylsulfate (SDS) for achieving proper decellularization. Material and Method: Porcine aortic valves were decellularized with odium dodecylsulfate at various concentrations (0.25%, 0.5%), time durations (6, 12, 24 hours) and temperatures ($4^{\circ}C$, $20^{\circ}C$)(Group B). Same the number of porcine aortic valves (group A) was treated with hypotonic solution prior to SDS treatment at the same conditions. The duration of exposure to the hypotonic solution was 4, 7 and 14 hours and he temperature was $4^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$, respectively. The degree of decellularization was analyzed by performing hematoxylin and eosin staining. Result: There were no differences in the degree of decellularization between the two concentrations (0.25% 0.5%) of SDS. Twenty four hours treatment with SDS revealed the best decellularization effect for both roups A and B at the temperature of $4^{\circ}C$, but there was no differences between the roups at $20^{\circ}C$. Treatment with hypotonic solution (group A) showed a better ecellularization effect at all the matched conditions. Fourteen hours treatment at $4^{\circ}C$ ith ypotonic solution prior to 80S treatment revealed the best decellularization effect. The treatment with hypotonic solution at $20^{\circ}C$ revealed a good decellularization effect, but his showed significant extracellular matrix destruction. Conclusion: The exposure of porcine heart valves to hypotonic solution prior to SDS treatment is highly effective for achieving decellularization. Osmotic treatment with hypotonic solution should be considered or achieving decellularization of porcine aortic valves. Further study should be carried out to see whether the treatment with hypotonic solution could reduce the exposure duration and concentration of chemical detergents, and also to evaluate how the structure of the extracellular matrix of the porcine valve is affected by the exposure to hypotonic solution.
The purpose of this study was to estimate internal motion using molecular sieve for quantitative improvement of lung tumor and to localize lung tumor in the small animal PET image by evaluated data. Internal motion has been demonstrated in small animal lung region by molecular sieve contained radioactive substance. Molecular sieve for internal lung motion target was contained approximately 37 kBq Cu-64. The small animal PET images were obtained from Siemens Inveon scanner using external trigger system (BioVet). SD-Rat PET images were obtained at 60 min post injection of FDG 37 MBq/0.2 mL via tail vein for 20 min. Each line of response in the list-mode data was converted to sinogram gated frames (2~16 bin) by trigger signal obtained from BioVet. The sinogram data was reconstructed using OSEM 2D with 4 iterations. PET images were evaluated with count, SNR, FWHM from ROI drawn in the target region for quantitative tumor analysis. The size of molecular sieve motion target was $1.59{\times}2.50mm$. The reference motion target FWHM of vertical and horizontal was 2.91 mm and 1.43 mm, respectively. The vertical FWHM of static, 4 bin and 8 bin was 3.90 mm, 3.74 mm, and 3.16 mm, respectively. The horizontal FWHM of static, 4 bin and 8 bin was 2.21 mm, 2.06 mm, and 1.60 mm, respectively. Count of static, 4 bin, 8 bin, 12 bin and 16 bin was 4.10, 4.83, 5.59, 5.38, and 5.31, respectively. The SNR of static, 4 bin, 8 bin, 12 bin and 16 bin was 4.18, 4.05, 4.22, 3.89, and 3.58, respectively. The FWHM were improved in accordance with gate number increase. The count and SNR were not proportionately improve with gate number, but shown the highest value in specific bin number. We measured the optimal gate number what minimize the SNR loss and gain improved count when imaging lung tumor in small animal. The internal motion estimation provide localized tumor image and will be a useful method for organ motion prediction modeling without external motion monitoring system.
In, Kwang-Ho;Lee, Jin-Goo;Cho, Jae-Youn;Shim, Jae-Jung;Kang, Kyung-Ho;Yoo, Se-Hwa
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.41
no.3
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pp.231-238
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1994
Backgroud: Since the demonstration of the fact that vascular relaxation by acetylcholine(Ach) results from the release of relaxing factor from the endothelium, the identity and physiology of this endothelium-derived relaxing factor(EDRF) has been the target for many researches. EDRF has been identified as nitric oxide(NO). With the recent evidences that EDRF is an important mediator of vascular tone, there have been increasing interests in defining the role of the EDRF as a potential mediator of hypoxic pulmonary vasoconstriction. But the role of EDRF in modulating the pulmonary circulation is not compeletely clarified. To investigate the endothelium-dependent pulmonary vasodilation and the role of EDRF during hypoxic pulmonary vasoconstriction, we studied the effects of $N^G$-monomethyl-L-arginine(L-NMMA) and L-arginine on the precontracted pulmonary arterial rings of the rat in normoxia and hypoxia. Mothods: The pulmonary arteries of male Sprague Dawley(300~350g) were dissected free of surrounding tissue, and cut into rings. Rings were mounted over fine rigid wires, in organ chambers filled with 20ml of Krebs solution bubbled with 95 percent oxygen and 5 percent carbon dioxide and maintained at $37^{\circ}C$. Changes in isometric tension were recorded with a force transducer(FT.03 Grass, Quincy, USA) Results: 1) Precontraction of rat pulmonry artery with intact endothelium by phenylephrine(PE, $10^{-6}M$) was relaxed completely by acetylcholine(Ach, $10^{-9}-10^{-5}M$) and sodium nitroprusside(SN, $10^{-9}-10^{-5}M$), but relaxing response by Ach in rat pulmonary artery with denuded endothelium was significantly decreased. 2) L-NMMA($10^{-4}M$) pretreatment inhibited Ach($10^{-9}-10^{-5}M$)-induced relaxation, but L-NMMA ($10^{-4}M$) had no effect on relaxation induced by SN($10^{-9}-10^{-5}M$). 3) Pretreatment of the L-arginine($10^{-4}M$) significantly reversed the inhibition of the Ach ($10^{-9}-10^{-5}M$)-induced relaxation caused by L-NMMA($10^{-4}M$) 4) Pulmonary arterial contraction by PE($10^{-6}M$) was stronger in hypoxia than normoxia but relaxing response by Ach($10^{-9}-10^{-5}M$) was decreased, 5) With pretreatment of L-arginine($10^{-4}M$), pulmonary arterial relaxation by Ach($10^{-9}-10^{-5}M$) in hypoxia was reversed to the level of relaxation in normoxia. Conclusion: It is concluded that rat pulmonary arterial relaxation by Ach is dependent on the intact endothelium and is largely mediated by NO. Acute hypoxic pulmonary vasoconstriction is related to the suppression on NO formation in the vascular endothelium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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