• 제목/요약/키워드: 배양배지

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미나리 체세포 배발생 캘러스의 획득과 발달 형태 (Production and Developmental Pattern of Embryogenic Callus in Oenanthe javanica ($B_{L.}$) DC.)

  • Gab Cheon KOH;Chang Soon AHN
    • 식물조직배양학회지
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    • 제22권5호
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    • pp.283-290
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    • 1995
  • 미나리의 체세포 배발생 조건 및 기작을 구명하고자 배발생 캘러스의 획득에 적합한 시료와 배지를 구명하고 배발달의 과정을 관찰하여 본 결과, 기내 식물체 확보를 위한 미나리의 경정배양은 발생한 줄기 수와 생육상태로 보아 BA가 0.1 - 0.5 mg/L 첨가된 MS배지가 적합하였으며 배발생 캘러스의 발생은 배유와 함께 채취ㆍ배양한 유배를 2,4- D가 1 mg/L 첨가된 배지에서 2 개월간 배양하였을 때 발생하였다. 기내에서 생장한 줄기와 엽병을 배양하였을 경우는 치상후 2과에 엽병의 절단 부위에서 발생한 캘러스는 모두 배발생 캘러스가 아니였으나 치상 후 6 - 8주에 줄기와 엽병의 표피부위에서 발생한 캘러스는 배발생 캘러스이었다. 배발생 캘러스는 계대배양에 의하여 대양 증식이 가능하며 이들은 배발생 캘러스와 비배발생 캘러스를 동시에 형성하였다. 비배발생 캘러스는 다양한 생장조절제를 첨가한 액체 및 고체배지에 반복 및 지체배양하여도 배발생 캘러스로의 분화는 일어나지 않았다. 비배발생 캘러스는 고체배지에 배양하면 쉽게 증식되어 뿌리를 분화하며, 액체배지 에 현탁배양할 경우에는 단세포로 단리되고, 다시 이들은 작은 원형세포괴를 형성한 후 단지 뿌리만을 발생하였다.

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Asp. usamii shirousamii $U_2$ 균의 국식배양에 의한 유기산 및 당화효소 생성에 관한 연구 (Studies on Formation of Organic Acid and Saccharifing Amylase in Koji Culture by Asp. usamii shirousamii $U_2$)

  • 윤복현;박윤중;이석건
    • 한국식품과학회지
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    • 제6권3호
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    • pp.127-132
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    • 1974
  • Asp. usamii shirousamii $U_2$ 균의 국식 배양에 있어서 유기산 및 당화효소생성 조건에 대하여 실험한 결과는 다음과 같다. (1) 유기산 생산은 밀가루 및 밀기울 배지의 경우 $30^{\circ}C$에서 3일간 배양시에 가장 좋았으며 당화효소력은 밀가루 배지의 경우 $35^{\circ}C$, 3일간 배양시에 가장 높았고 밀기울 배지는 $35^{\circ}C$, 2일간 배양시에 거의 최고 역가를 나타냈다. (2) 3일 배양의 경우 배지의 첨수량은 밀가루 배지에서는 60% 첨수일 때, 밀기울 배지에서는 50% 첨수일 때 유기산 생성이 가장 좋았으며 당화효소 생성은 밀가루, 밀기울의 어느 배지에서나 $90{\sim}100%$ 첨수에서 가장 좋았다. (3) 밀가루와 밀기울의 배지를 비교하여 볼 때 유기산의 생성은 밀가루 배지가 좋았으며 당화효소생성은 밀기울 배지에서 높았다. (4) 고구마 전분박과 밀가루를 동량으로 혼합했을 때 밀가루 단일배지보다 유기산 및 당화효소 생성이 높았으며 밀기울에 고구마전분박 첨가의 효과는 없었다. (5) 밀가루, 밀기울 단일배지에 비하여 고구마전분박 단일배지에서는 유기산 및 당화효소 생성이 극히 나빴다. (5) 60% 첨수의 밀가루배지에서 $30^{\circ}C$, 3일간 배양한 경우 생성유기산 중의 약 90%가 구연산이었다.

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하이브리도마 배양에서 아미노산과 노폐물의 조성 분석에 기초한 배지의 선택적 강화 (Medium Fortification based on the Analysis of Amino Acids and Wastes in Hybridoma Culture)

  • 현병용;이동섭;박홍우
    • KSBB Journal
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    • 제13권1호
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    • pp.108-113
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    • 1998
  • 본 연구에서는 하이브리도마 세포를 T-flask, spinner flask, 그리고 2L bioreactor에서 batch 배양하여 배양 방법에 따른 세포성장과 대사의 차이점을 살펴보고, 이것의 영양원 분석을 토대로 배지를 강화함으로써 세포성장을 제고하고자 하였다. 배양방법에 따른 세포성장의 차이를 살펴보는 실험에서 Spinner flask와 배양기를 이용한 배양에서는 비슷한 세포성장과 아미노산의 대사를 관찰할 수 있었으나 T-flask 배양에서의 세포성장과 대사는 나머지 두 배양과 현격한 차이를 보였다. 아미노산, 포도당, 그리고 비타민이 강화된 배지를 이용함으로써 원래의 IMDM 배지를 이용한 배양에서보다 70% 정도 높은 세포농도를 얻을 수 있었다. 그러나, 비타민 강화에 따른 에너지 대사의 변화가 관찰되어 이에 대한 연구의 필요성이 제시되었다.

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이탈리안 라이그래스의 종자배양에 있어서 식물체 재분화에 미치는 몇 가지 요인 (Factors Affecting Plant Regeneration from Seed-Derived Calli in Italian ryegrass (Lolium multiflorum Lam.))

  • 이효신;강경민;조진기
    • 식물조직배양학회지
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    • 제28권6호
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    • pp.323-328
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    • 2001
  • 이탈리안 라이그래스의 종자배양에서 캘러스 형성 및 식물체 재분화 체계를 확립하기 위하여 기본배지와 탄소원의 종류별 식물체 재분화 정도 및 배양효율의 품종 간 차이 등에 대한 실험을 수행하여 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 기본배지의 종류에 따른 캘러스 형성 및 식물체 재분화율은 MS 배지가 N6 배지나 B5 배지보다 높게 나타났다. 배지 내에 첨가되는 탄소원의 종류에 따른 식물체 재분화율은 sucrose가 maltose보다 효과적이었다. 이탈리안 라이그래스의 종자배양에 있어서 모식물의 genotype에 따라 식물체 재분화 능력은 큰 차이를 보였으며, 공시품종 중 'Rio' 와 'Jeanne' 의 재분화 능력이 각각 38%와 56%로 가장 높았다.

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참다래(Actinidia deliciosa)의 엽 및 엽병배양에 의한 식물체 재분화 (Plant Regeneration from Leaf and Petiole Culture of Kiwifruit(Actinidia deliciosa))

  • 김영숙;오성도
    • 식물조직배양학회지
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    • 제25권5호
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    • pp.305-308
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    • 1998
  • 키위의 엽육조직과 엽병조직을 치상하여 캘러스 및 부정아형성에 미치는 생장조절제의 효과를 조사한 결과 기관분 화성 캘러스형성은 2,4-D와 kinetin을 조합한 배지에서보다 NAA와 BA를 조합한 배지에서 양호하였고, 부정아 형성은 NAA와 BA를 조합한 배지에서만 형성되었으며 엽병조직보다 엽육조직을 배양하였을 때 반응이 양호하였다. 유도된 캘러스와 부정아로부터 신초의 형성은 MS기본배지에 0.1mg/L NAA와 2.0mg/L zeatin을 첨가한 배지에 계대배양하였을 때가 가장 효과적이었다. 신초의 발근은 1.0 mg/L IBA용액에 1시간 신초를 침지한 후 0.5 mg/L IAA와 0.1mg/L BA를 첨가한 배지에 배양하면 IBA용액에 침지처리 하지 않은 것보다 더 효과적이었으며 정상식물체로 발달하였다.

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꿩의비름(Sedum erythrostichum Miq.)의 잎과 줄기 절편으로부터 식물체의 재분화에 미치는 생장조절제의 영향 (Effect of Plant Growth Regulators on Plant Regeneration from Leaf and Stem Explant Cultures of Sedum erythrostichum Miq.)

  • 윤의수
    • 식물조직배양학회지
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    • 제24권5호
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    • pp.285-289
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    • 1997
  • 꿩의비름(Sedum-erythrostichum Miq.)의 잎과 줄기의 절편을 몇 가지의 호르몬이 첨가된 MS 배지에 배양하였다. 배양 2주후 2.0 mg/L. 2,4-D와 1.0 mg/L BA를 혼합한 배지에서 잎의 절편으로부터 100%의 캘러스가 형성되었다. 이 캘러스를 2.0 mg/L 2,4-D와 1.0 mg/L BA를 혼합한 배지로 계대배양하였을때 캘러스의 생장이 왕성하였다. 또한 2.0 mg/L NAA와 1.0 mg/L BA를 혼합한 배지로 계대배양한 캘러스로부터 부정아의 분화가 왕성하였다. 생장호르몬이 없는 배지에서 분화된 신초는 1.0 mg/L IAA를 첨가한 배지에서 발근하여 완전한 식물체로 생장하였다.

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부화부산물 수평아리 사체를 이용한 사료용 효모 배양에 관한 연구 (Utilization of Egg Type Male Chicks From Hatchery to Produce Yeast Culture for Animal Feed.)

  • 심관섭;박강희;김정학
    • 한국축산시설환경학회지
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    • 제6권3호
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    • pp.201-209
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    • 2000
  • 수평아리 사체를 이용한 효모의 최적 배양 조건과 효모배양물이 육계의 성장에 미치는 영향을 조사하였다. 수평아리 추출물의 단백질 농도는 72시간 동안 추출되었을 때 가장 높았으며, 수평아리 사체에서 추출물을 얻기 위한 물의 첨가 비율은 수평아리 사체의 무게에 1.5배(v/w ratio)가 적당하였다. 수평아리 사체의 추출물에서 지방은 효모의 성장에 영향을 미치지 못하였다. 수평아리 사체의 추출물과 4% sugarcane molasses로 구성된 SCELP2 배지는 1% yeast extract, 2% bacto pepton 그리고 2% glucose로 구성된 YEPD 배지보다 효모수가 26% 더 증가하였다. 또한 SCELP2 배지에 4% 폐이스트를 첨가한 SBYW2 배지는 SCELP2 배지보다 효모수가 8% 증가하였다. SBYW2 배지에서 배양된 효모배양물을 5주 동안 육계에 급여한 결과 종체량은 4% 첨가구가 대조구보다 9% 증가하였다. 따라서 본 연구 결과 부화부산물로 발생되는 수평아리 사체는 사료용 효모배양물을 생산하기 위한 효모배양 배지의 질소원으로서 이용될 수 있음을 의미한다.

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호르몬, 아미노산 및 단백질이 첨가되지 않는 단순배양배지내 소 난포란의 탄수화물 요구량 (Carbohydrate Requirements of Follicular Bovine Oocytes Cultured in a Chemically Defined, Hormone-, Amino Acid- and Protein-Free Medium)

  • 임정묵
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제1권1호
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    • pp.1-8
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    • 1997
  • 본 연구는 단순배양체계내 소 난포란의 성숙에 요구된는 탄수화물 (glucose, lactate와 pyruvate)을 검토하기 위해 수행하였다. GV(germinal vesicle) 단계의 난구세포로 둘러싸인 소 난자를 단백질, 아미노산 및 호르몬이 첨가되지 않은 modified Tyrodes (mT)에서 24시간, 5% $CO_{2}$ 배양기를 이용하여 성숙배양하였다. Glucose 무첨가군 (0-61%)에 비해 5.6mM의 glucose 첨가군 (71-74%)이 유의적으로 높은 (P<0.05) M-II단계로의 난자 발육을 나타내었다. Glucose를 함유한 배지내에서는 lactate(10mM0와 pyruvate(0.5mM)의 첨가에 따르는 M-II 단계로의 발육에 있어 차이를 보이지 않았다. 그러나 glucose 무첨가 배지에서는 pyruvate와 lactate를 첨가하는 것이 첨가하지 않은 것에 비해 condensed GV(76%vs. 0-2%), M-II, (43-61%vs. 0%)단계에 이른 난자수가 유의적으로 높았다. Glucose 함유 mT배지에 lactate와 pyruvate를 첨가하여 난자를 배양하였을 때, 동결융해 정자와 24시간 정치한 후 난자중 87-93%가 정자침투되었고 39-44%가 전핵단계로 발육하였다. 침투난자의 26-30%는 다정자수정이었다. 결론적으로, GV 단계의 소 난포란은 에너지원으로 lactate, glucose와 Pyruvate를 이용하지만, 감수분열 성숙을 유지하는데 glucose가 가장 효과적이다. 이 결과들로 보아 단순배양배지는 소 난포란의 체외성숙에 영향을 미치는 다양한 물질들을 연구하는데 잠재적으로 유용하다.

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생체발광균주 Photobacterium phosphoreum의 배양배지 및 최적 저장조건에 관한 연구 (Studies on the Culture Media and the Optimal Storage Conditions of Bioluminescent Bacteria Photobacterium phosphoreum)

  • 조동욱;전억한;김병용;김은기;함영태
    • 미생물학회지
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    • 제36권1호
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    • pp.74-78
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    • 2000
  • 본 연구에서는 Photobacterium phosphoreum의 배양 및 생체발광을 위한 최적 배지의 개발과 장기저장 후 생체발광능의 회복을 위한 최적의 저장 조건을 확립하고자 하였다. P. phosphoreum을 배양하기 위한 배지로 Luria broth(LB) 배지를 변형한 modified LB(mLB) 배지를 개발하였다. mLB 배지는 Luria broth에 1.5%의 NaCl과 3%의 글리세롤을 보정, 첨가한 배지로, 미생물 생장 및 생체 발광량이 Nutrient broth 배지보다 약 25% 가량 높은 수치를 보여주었으며, 생장 대수기에서 생장 휴지기로 넘어갈 때 생체 발광량이 최고치에 달하였다. 30% 글리세롤을 첨가하여 $-20^{\circ}C$ $-70^{\circ}C$ 및 액체질소에 3개월간 보관한 후, 배양하여 생장 및 생체 발광량을 조사한 결과에서는 $-20^{\circ}C$ 보관한 시료가 가장 좋은 결과를 보였다. 항 동결제로 5% adonitol을 첨가하여 동결 건조한 시료는 재 배양 시 adonitol를 첨가하지 않은 시료보다 16시간 이상 짧은 생장 유도기를 보여 주었고, 생체 발광량이 최고조에 달하는 시간도 빠르게 나타났다.

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생체(生體) 및 실험실(實驗室)에서 성숙(成熟)된 돼지 난모세포(卵母細胞)의 체외수정(體外受精)에 관(關)한 연구(硏究) (Study on In Vitro Fertilization of Pig Oocytes Matured in In Vivo and In Vitro)

  • 박창식;이규승;서길웅
    • 농업과학연구
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    • 제18권2호
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    • pp.114-118
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    • 1991
  • 본(本) 연구(硏究)는 생체(生體) 및 실험실(實驗室)에서 성숙(成熟)된 돼지 난모세포(卵母細胞)의 체외수정(體外受精) 및 배양(培養)에 적합(適合)한 배지(培地)를 찾기 위하여 실시(實施)한 바, 그 얻어진 결과(結果)는 다음과 같다. 생체내(生體內)에서 성숙(成熟)된 난모세포(卵母細胞)에 대하여 10% FCS을 함유(含有)한 M199수정배지(受精培地)와 1% BSA를 함유(含有)한 TL Hepes 수정배지(受精培地)를 비교(比較)한 결과(結果), 수정율(受精率)은 TL Hepes 수정배지(受精培地)가 M199 수정배지(受精培地)보다 우수(優秀)하였으나, 다정자침입율(多精子侵入率)이 다소 좋지 않은 편이었다. 체외수정후(體外受精後) TL Hepes 세척(洗滌) 및 배양배지(培養培地)에서 48시간(時間) 배양(培養)한 결과(結果), 배양(培養)된 난자(卵子) 53개중(個中) 39개(個) (73.6%)가 분할(分割)되었으며, 분할(分割)된 수정란(受精卵) 39개중(個中) 31개(個) (79.5%)가 2~8세포기(細胞期)까지 균등(均等)하게 분할(分割)되었다. 미성숙난포란(未成熟卵胞卵)을 Waymouth 성숙배지(成熟培地)에서 배양(培養)했을 때가 TL Hepes성숙배지(成熟培地)에서 배양(培養)했을 때 보다 수정후(受精後) 더 많은 확장(擴張)된 정자두부(精子頭部)를 유도(誘導)할 수 있었으나, 대부분 다정자침입(多精子侵入)이 되었다. 48시간(時間) TL Hepes 세척(洗滌) 및 배양배지(培養培地)에서 배양(培養)한 결과(結果) 4세포기(細胞期)까지 발육(發育)을 시킬 수가 없었다.

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