Medium Fortification based on the Analysis of Amino Acids and Wastes in Hybridoma Culture

하이브리도마 배양에서 아미노산과 노폐물의 조성 분석에 기초한 배지의 선택적 강화

  • 현병용 (한양대학교 화학공학과) ;
  • 이동섭 (한양대학교 화학공학과) ;
  • 박홍우 (한양대학교 화학공학과)
  • Published : 1998.02.01

Abstract

The cell growth and amino acid metabolism of a hybridoma cell line in T-flasks, spinner flasks, and a 2L bioreactor were compared. Similar growth and metabolic behaviour were observed for spinner flask and bioreactor cultivations, while those in T-flasks differed significantly. Through a detailed analysis of nutrients and wastes, 7 amino acids were found to be consumed to a much higher extent than the rest of the amino acids. Supplementing the based medium with selected amino acids, glucose, and vitamines increased the cell density by 70%. The addition of vitamines was found to increase the metabolic rates of glucose and lactate.

본 연구에서는 하이브리도마 세포를 T-flask, spinner flask, 그리고 2L bioreactor에서 batch 배양하여 배양 방법에 따른 세포성장과 대사의 차이점을 살펴보고, 이것의 영양원 분석을 토대로 배지를 강화함으로써 세포성장을 제고하고자 하였다. 배양방법에 따른 세포성장의 차이를 살펴보는 실험에서 Spinner flask와 배양기를 이용한 배양에서는 비슷한 세포성장과 아미노산의 대사를 관찰할 수 있었으나 T-flask 배양에서의 세포성장과 대사는 나머지 두 배양과 현격한 차이를 보였다. 아미노산, 포도당, 그리고 비타민이 강화된 배지를 이용함으로써 원래의 IMDM 배지를 이용한 배양에서보다 70% 정도 높은 세포농도를 얻을 수 있었다. 그러나, 비타민 강화에 따른 에너지 대사의 변화가 관찰되어 이에 대한 연구의 필요성이 제시되었다.

Keywords

References

  1. Biotechnol, Bioeng. v.44 Transient Responses of Hybridoma Cells in Continuous Cultuer to Step Changes in Amino Acid and Vitamin Concentrations Hiller,G.W.;D.S.Clark;H.W.Blanch
  2. Biotechnol. Bioeng. v.38 Factors Controlling Cell proliferation and Antibody Production in Mouse Hybridoma Cells : 1. Influence of the Amino Acid Supply Duval,D.C.;Demangel,K.;Munier-Jolain,S.Miossec;I.Geahel
  3. Biotechnol. Bioeng. v.39 Effects of Ammonia and Lactate on Hybridoma Growth, Metabolism, and Antibody Production Ozturk,S.S.;M.R.Riley;B.O.Palsson
  4. Biotechnol. Bioeng. v.44 Growth Characteristics in Fed-batch Culture of Hybridoma Cells with Control of Glucose and Glutamine Concentrations Kurokawa,H.;Y.S.Park;S.Iijina;T.Kobayshi
  5. Biotechnol. Bioeng. v.43 Stoichiometric Analysis of Animal Cell Growth and Its Application in Medium Design Xie,L.;D.I.C.Wang
  6. Biotechnol. Bioeng. v.43 Fed-batch Cultivation of Animal Cells Using Different Medium Design Concepts and Feeding Strategies Xie,L.;D.I.C.Wang
  7. In Vitro v.17 Large-scale Rotating Filter Perfusion System for High-density Growth of Mammalian Suspension Cultures Tolbert,W.R.;J.Feder;R.C.Kimes
  8. Biotechnol. Prog. v.11 In Pursuit of the Optimal Fed-batch Process for Monoclonal Antibody Prodution Bibila,T.A.;D.K.Robinson