동물계에서 항바이러스와관련된 dsRNA 의존성 인산화 효소(PKR)의 유전자를 식물체에서 발현시킬 경우 PKR에 의한 단백질합성 및 식물바이러스의 증식조절 가능성에 대한 기초자료를 확보하기 위하여 사람에서 분리된 PKR cDNA를 Agrobacterium 방법에 의하여 연초식물체(Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc)로 형질전환시켰다. HindIII/PstI처리에 의해 얻어지는 약 1.8kb의 phPKR cDNA절편을 일련의 유전자 조작 방법을 통하여 식물발현벡터인 pBI121에 도입하여, p12168을 재조합하였다. 이를 A. tumefaciens LBA 4404에 형질전환시켜 연초식물체형질 전환에 이용하였다. 2mg/l BA와 0.5mg/l NAA가 포함되고 100$\mu\textrm{g}$/ml의 kanamycin이 첨가된 MS배지에서 shooting시킨 후 phytohormone이 첨가되지 않은 MS배지상에서 rooting을 시켜 형질전환 연초식물체를 얻었으며, 형질전환식물체는 정상식물체와 유사한 생육양상을 나타내었다. 형질전환식물체의 유전자도입은 hPKR cDNA의 전사부여는 RT-PCR 방법에 의하여 확인되었다.
Proceedings of the Korean Information Science Society Conference
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2005.07b
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pp.247-249
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2005
Cleavage Site 분석 및 예측은 바이러스 증식에 필요한 핵심 단백질인 Protease$(3CL^{pro})$를 예측하게 하고, 예측한 Protease의 활성을 억제함으로써 바이러스 중식을 저지하게 된다. 본 연구에서는 신경망과 결정트리, 유전자 알고리즘을 이용하여 SARS-CoV의 cleavage site를 분석하고, 학습 결과에서 추출된 규칙(Rule)에 의해 cleavage site를 예측한다. 또한 신경망에서 학습된 지식(Knowledge)을 이용하여 유전자 알고리즘의 성능을 향상시키는 지식기반 유전자 알고리즘 (KBGA: Knowledge-Based Genetic Algorithm)을 제안한다.
Dengue virus is a typical mosquito-borne virus, and the half of the world's population is exposed to infection. Dengue virus causes relatively mild symptoms such as dengue fever. However, when not treated properly, it is known to cause severe symptoms such as dengue hemorrhagic fever and dengue shock syndrome with a mortality rate of over 20%. Development of dengue virus detection technology is very important because it is reported that early diagnosis of dengue fever can lower the mortality rate to less than 1%. In this study, patent search related to dengue virus detection technology was conducted in Korea, USA, Europe, Japan, and China. The quantitative analysis of 69 validated patents from the searched patents was conducted by country, year, and patent holder. In addition, in-depth analysis was carried out by classifying into three categories: molecular diagnostics, immuno-diagnostics, and cell culture-based diagnostics from all validated patents. From these results, we analyzed the patent trend related to dengue virus detection and dengue fever diagnosis technology and discussed the features and limitations of molecular diagnostics and immuno-diagnostics at present level. Furthermore, we discussed the direction of technology development and future prospects to overcome limitations.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2002.11a
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pp.124-125
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2002
Two experiments were conducted to investigate the response of chitosan supplementation in diet on the major economic traits of broiler in two different breeds. In the both experiments, the Arbor Acres and Ross breeds were used as experimental stocks and two groups were assigned in each breed. The control group birds(CON) were fed with basal diet only and the experimental group birds(EXP) were fed with basal diet added with 10.5mg chitosan/bird/day. The chitosan was supplied to birds from day-old in experiment 1 and from 15-day-old in experiment 2. In experiment 1, the mean body weight at 35-day-old were significantly(P〈0.05) heavier by 121.2 g and 243.7 g in the EXP groups than in the CON groups of Arbor Acres and Ross, respectively. Whereas, the mean body weights at 35-day-old in experiment 2 were lighter by 91.7 g and 70.2 g in the EXP groups than in the CON groups of Arbor Acres and Ross, respectively : however, the comparisons between breeds in the mean body weight at 35-day-old did not show significant difference in each other in both breeds. In the mean feed conversion ratio of Arbor Acres from 14 to 35-day old in experiment 1, it did not show significant difference between EXP and CON groups although the feed conversion ratio of the EXP group of Ross was significantly higher(P〈0.05) than the CON group. In experiment 2, the feed conversion ratios from 14 to 35-day-old did not show significant differences between the two breeds. The percentage of mean abdominal fat depositions of EXP groups in both breeds In experiment 1 were significantly(P〈0.05) higher than those of CON groups. And the percentage of mean abdominal fat deposition of Ross was significantly(P〈0.05) lower than that of Arbor Acres. In experiment 2, the percentage of mean abdominal fat depositions did not show significant difference between EXP and CON groups in both breeds. Whereas, the interaction effects between breed and experimental groups on the above economic traits did not show significant in both experiments.
Chinese yam (Dioscorea opposita cv. Jang-Ma) plants showing necrotic mosaic symptom were collected from their growing fields in Andong, Euisong, Gunwi and Daegu, Korea. Direct negative stainning method by electron microscope showed filamentous particles of about 660 nm in length. Immunosorbent electron microscopy (ISEM) revealed filamentous particles of 660nm decorated with antiserum of Chinese yam necrotic mosaic virus (ChYNMV). The virues purified partially were used to isolate viral RNA as template for RT-PCR to amplify about 1.2 kbp of 3'-terminal region (coat protein, 3'-UTR) with ChYNMV specific and oligo-dT primers. Amino acids sequences of amplified CP genes revealed that the viruses shared 97.9% similarity with ChYNMV (AB044386) wh ich was known as the member of Macluravirus. So the viruses from Chinese yam (D. opposita cv. Jang-Ma) plants were identified as ChYNMV. Comparing the CP amion acid sequences of ChYNMV strains with other macluraviruses such as Cardamon mosaic virus (CdMV), Narcissus latent virus (NLV) and Maclura mosaic virus (MacMV) revealed that N-terminal was the most varialbe region and conserved regions were present within the genus Macluravirus.
Lentiviral vector system is efficient vehicles for the delivery of exogenous genes, and it is generally used in the generation of transgenic chickens. In this study, we used recombinant lentiviral vectors to generate transgenic chicks that express the human superoxide dismutase-3 gene driven by the chicken ovalbumin promoter. It is well known that superoxide dismutases(SODs) are believed to play a crucial role in protecting cells against oxygen toxicity. There are three forms of SOD proteins: cytosolic Cu-Zn SOD, mitochondrial Mn SOD, and extracellular SOD(SOD-3). The recombinant lentivirus containing the human SOD-3 gene was injected into the subgerminal cavity of freshly laid eggs. Subsequently, the embryos were incubated to hatch using phases II and III of the surrogate shell ex vivo culture system. From 341 injected embryos, the 78 chicks hatched after 21 days incubation. The hatched chicks were screened for the human SOD-3 gene by using PCR. Two of 47 male chickens that survived to sexual maturity contained the human SOD-3 gene in their semen. These results showed that our transgenic chicken generation system was completely established.
Cucumber mosaic virus(CMV) was occurred on red pepper showing vein chlorosis or vein necrosis with the incidence rate of 52% from 62 specimens collected in natural fields. Among 32 samples infected with CMV, the specimens of 22 red pepper leaves showing vein chlorosis were infected singly with CMV-VCH. CMV-VCH induced vein chlorosis on the inoculated leaves, and vein banding and vein necrosis on the upper leaves of Nicotiana glutinosa, and then killed after showing bud necrosis. The typical symptoms of vein banding, malformation and blister were produced on the upper leaves of Nicotiana benthamiana and N. tabacum 'Ky-57' without symptoms on the inoculated leaves. The commercial cultivars of 'Bugang', 'Manitta' and 'Gwariput' were shown the typical symptom of vein chlorosis by the mechanical inoculation of CMV-VCH. CMV-VCH was detected specifically by RT-PCR. Virus particles of CMV-VCH were isometric shape having 30 nm diameter. Ultraviolet absorption of purified CMV-VCH was maximum at 260 nm and minimum at 242 nm. The ratio of A260/A280 was 1.71. CMV-VCH had the single nucleo-protein having the molecular weight of 24.5 kDa.
In order to identify the characteristics of a Korean isol ate of infectious hematopoietic necrosis virus(IHNV), IHNV-PRT, we have cloned and analyzed cDNAs coding for matrix protein M1 and M2 of the IHNV-PRT. The Ml gene contained 693 bp open reading frame and encoded a protein of 230 amino acids with a molecular weight of 25.9 kDa. The M2 gene had 588 bp open reading frame, encoding a protein of 195 amino acids with a molecular weight of 21.9 kDa. On the deduced amino-acid sequences, M1 and M2 of the IHNV-PRT were found to be 92-93% (M1) and 97% (M2) identical to those of foreign isolates of IHNV. These results indicate that M genes of the IHNV are highly conserved among different strains of IHNV.
The location of the polyhedrin gene of Bmbyx mori nuclear polyhedrosis virus(BmNPV) was determined by using a cloned polyhedrin gene from the Autographa californica nuclear polyhedrosis virus(AcNPV) as a hybridization probe. The 7.4 Kb PstⅠ fragment DNA of Bm-NPV was cloned to plasmid pUC19 vector. A fragment containing this gene was mapped and sequenced in its entire polyhedrin reading frame. Nucleotide sequences comparison of the polyhedrin of the BmNPV to that of previously reported by Ⅰatrou(1985) revealed that the sequence varied in 10 base, Comparison of the amino acid sequence of the two structured gene revealed that coding sequence varied 74 valine to isoleucine, 76 aspargine to serine and 155 methionine to valine.
Jin, Hye Jeong;Lee, Jihoo;Lee, In Seoung;Kim, Hak Yong
Proceedings of the Korea Contents Association Conference
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2015.05a
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pp.227-228
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2015
질병 치료에 대한 패러다임이 과거 치료 위주에서 조기진단 및 예방의 개념으로 전환되고 있으며 진단용 마커와 단클론 항체 제작은 핵심 기술로 부각되고 있다. 현재까지의 항원결정부위(epitope) 예측은 단백질의 1차구조인 아미노산 배열 순서를 바탕으로 추출되어 진다. 하지만 항원결정부위는 수용성의 항체와 직접 결합하기 때문에 친수성 잔기가 차지하는 비율이 높아야 하며, 면역계가 쉽게 인지할 수 있도록 노출되어 있어야하고, 긴 선상의 폴리펩티드 단백질이 3차원 구조를 형성하기 위해 회전, 유연성 등이 요구된다. 따라서 한 가지 성질 중심으로 할 경우 오류가 나올 가능성이 있다. 이를 보완하기 위하여 본 연구에서는 친수성(hydrophilicity), 극성(polarity), 파묻힘성(buried residues), 접근성(accessibility), 회전성(${\beta}-turns$), 유연성(flexibility), 굴절성(refractivity) 등을 분석한 후 통합 예측시스템을 개발하였다. 이를 검증하기 위해 고양이 백혈병 바이러스의 항원결정부위를 예측해보았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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